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张庆军
作品数:
3
被引量:1
H指数:1
供职机构:
湖北省预防医学科学院
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发文基金:
国家留学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
黄希宝
湖北省预防医学科学院
陈国英
湖北省预防医学科学院
卢笑丛
湖北省预防医学科学院
李汉帆
湖北省预防医学科学院
张瑜
湖北省预防医学科学院
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机构
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张庆军
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陈国英
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黄希宝
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张瑜
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1篇
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2009
2篇
2007
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大肠埃希菌中疟原虫MSP1-17编码基因蛋白重组及表达
被引量:1
2007年
目的为免疫原性及疟疾特异性早期诊断研究,以及高效抗红内期疟原虫复合多价基因疫苗的研究提供基础。方法(1)以鼠约氏疟原虫MSP1编码基因为模板,片段自4855到5271共416bp,扩增出PyMSP1 DNA片段,将该片段克隆入质粒pPGEX-2T,构建含有GST编码的质粒pGEX-2T-PyMSP1-17。(2)用上述构建的质粒植入大肠埃希菌DH-5α表达重组蛋白。结果(1)构建出约氏疟原虫裂殖子表面蛋白1融合基因片段真核重组表达质粒。(2)获得MSP1-GST融合蛋白,在大肠埃希菌DH一5a收获到重组的约氏疟原虫裂殖子表面蛋白浓度为46mg/L。(3)原核表达的蛋白产物免疫小鼠后分离血清,采用间接免疫荧光法(IFA)检测疟原虫,滴度在1:400~1:1000之间均可识别IFA血片中的疟原虫。结论设计重组MSP1-17基因在大肠埃希菌中真核系统内能够得到充分表达,并具有免疫原性和抗原性。无论是作为DNA疫苗研究的候选者抑或是制备特异性抗体进行疟疾早期诊断都具有重要的意义;由于该抗原的表达量高、免疫原性强,是目前很有希望的疟疾疫苗候选抗原之一。
张庆军
陈国英
黄希宝
由井克之
关键词:
约氏疟原虫
裂殖子表面蛋白
基因重组
约氏疟原虫重组裂殖子表面蛋白免疫原性的研究
2007年
目的检测约氏疟原虫裂殖子表面蛋白C端相对分子质量为41000重组蛋白的抗原性和免疫原性,对其抗虫感染效果进行评价,为疟疾DNA疫苗的研究提供基础资料。方法采用重组表达质粒pPGEX-2T—PyMSP1在大肠杆菌中表达的融合蛋白,免疫BALB/c小鼠,2周后用约氏疟原虫子孢子感染小鼠。用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定抗MSP1抗体滴度,MSP1融合蛋白特异性免疫反应测定,MSP1对小鼠免疫保护作用。结果免疫11d后抗体水平开始上升,到42d达到最高峰,各时段抗体滴度分别为:第11天1:2183、第21天1:38115、第42、63、86和第124天均维持在1:798560水平;ELISA检测免疫后第21天小鼠抗MSP1的IgG、IgM、IgG1、IgG2a、IgG2b和IgG3,其405nm波长的吸光度(A405)依次为1.82±0.61、0.33±0.05、2.35±0.77、1.14±0.40、2.22±0.58、0.18±0.02。免疫后的小鼠体内产生特异性保护免疫,子孢子攻击感染20d后,原虫密度有较快的下降。结论所表达的重组约氏疟原虫裂殖子表面蛋白,具有一定的抗原性和免疫原性,能够诱导小鼠产生特异性保护抗体,并且该抗体能够维持在较高的水平。
张庆军
陈国英
卢笑丛
黄希宝
张瑜
李汉帆
关键词:
疟原虫
免疫原性
实验动物从业人员'3R原则'的知晓现状及对策
回顾了3R的原则、内涵及发展的历史。分析了实验动物使用人员对3R原则知识缺失的原因和现况。建议在实验动物从业人员培训过程中增加3R原则的内容;引导在校学生重视实验动物专业选修课。在教材上增加3R原则及其应用的内容。
卢笑丛
孙凡中
张庆军
关键词:
实验动物
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