张小海
- 作品数:4 被引量:33H指数:3
- 供职机构:皖南医学院弋矶山医院更多>>
- 发文基金:安徽省高校省级自然科学研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 大鼠终板软骨内源性转化生长因子β1与早期钙化相关基因表达的变化被引量:9
- 2011年
- 目的建立大鼠终板软骨细胞体外自然传代的退变模型,探讨自然退变过程中内源性转化生长因子(TGF)-β1与钙化基因表达变化的关系。方法取大鼠腰椎终板软骨细胞,酶消化法及自然传代法分离培养大鼠终板软骨细胞,选取P2代和P4代,在体外均培养6d,观察细胞表型及利用茜素红染色,观察P2与P4代细胞的变化。用实时PCR检测软骨标志基因Ⅱ型胶原、转录因子SOX-9及代谢相关基因蛋白多糖、基质金属蛋白酶(MMP)-13、含I型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS)4、5的变化,验证体外退变模型的建立,在此基础上,继续检测生长因子TGF.131及钙化相关基因(ANK)、胞外核苷酸焦磷酸酶(ENPP)、组织非特异性碱性磷酸酶(TNAP)的变化。结果相对于P2代细胞,P4代细胞形态上有梭形变趋势,茜素红染色无明显变化。P4代转录因子SOX-9表达明显低于P2代(P4/P2=0.0690,P=0.0489),Ⅱ型胶原(P4/P2=0.0535,P=0.009)及蛋白多糖(P4/P2=0.2672,P=0.0343)表达也均明显低于P2代,其他代谢相关基因无明显改变。P4代细胞TGF-131(P4/P2=0.5934,P=0.0482)、TNAP(P4/P2=0.0385,P=0.0139)和ANK(P4/P2=0.2121,P=0.0009)表达均明显低于P2代,ENPP表达无明显改变(P〉0.05)。结论终板软骨随着传代次数增多,从P2代到P4代,开始发生体外自然退变,Ⅱ型胶原、SOX-9及蛋白多糖明显下调。内源性TGF-β1与钙化相关基因表达均下调,钙化相关基因ANK下调可能由内源性TGF-β1下调引起,提示调节内源性TGF-β1在终板软骨中的表达有可能会阻止椎间盘的退变。
- 徐宏光张晓玲张小海王弘贾瑞平童文学童海骏
- 关键词:转化生长因子Β
- 椎间盘退变与生物力学被引量:18
- 2010年
- 椎间盘退变的因素众多,生物力学是目前学者研究的热点之一。生物力学与椎间盘退变关系密切,可在椎间盘退变基础上进一步加速退变发生进程。生物力可直接使软骨终板发生细胞凋亡并出现Modic退变,也可间接影响椎间盘营养途径。生物力影响椎间盘细胞生物代谢平衡,使细胞内蛋白多糖、胶原纤维及基质金属蛋白酶等物质的合成与分解发生变化,改变椎间盘生物学功能,从而进一步加快椎间盘退变发生进程。
- 张小海徐宏光吴天亮
- 关键词:生物力学椎间盘退变软骨终板蛋白多糖胶原蛋白基质金属蛋白酶
- ANK、ENPPl及TGF-β1基因在大鼠终板软骨细胞传代培养中的表达变化及意义被引量:1
- 2012年
- 目的:通过大鼠终板软骨细胞体外自然传代的退变模型,探讨传代过程中钙化相关基因ANK、ENPPl及内源性生长因子TGF—βl表达的变化及其意义。方法:取大鼠腰椎终板软骨细胞,采用酶消化法及自然传代法分离培养,选取P1、P5及P7代,均在体外培养6d,分别用HE染色、甲苯胺蓝染色及Real—timeRT—PCR法检测软骨标志性基因Ⅱ型胶原、蛋白多糖、转录因子Sox9变化,对终板软骨细胞表型进行鉴定。用Real·timeRT—PCR及Westernblot检测钙化相关基因ANK、ENPPl的变化,Re.al—timeRT—PCR及ELISA检测生长因子TGF-βl的变化。结果:随着细胞传至P7代,细胞形态上有梭形变趋势。茜素红染色无明显变化。软骨标志性基因Ⅱ型胶原、蛋白多糖及转录因子Sox9表达均明显下调(P〈0.05),钙化相关基因ANK、ENPPl表达均明显下调(P〈0.05),内源性生长因子TGF-B1表达明显下调(P〈0.05)。结论:终板软骨细胞传至P7代,终板软骨细胞发生退变,终板软骨细胞内未见钙盐沉积,钙化相关基因ANK、ENPPl下调可能由内源性TGF-βl下调引起,提示调节内源性TGF-βl及钙化相关基因ANK、ENPPl在终板软骨中的表达有可能会阻止椎间盘的退变。
- 徐宏光张小海王弘刘平王凌挺宋俊兴
- 关键词:终板软骨细胞表型TGF-1
- Wnt信号通路对软骨细胞影响研究进展被引量:7
- 2010年
- 软骨细胞病变是关节软骨退行性变的重要病理因素之一,软骨细胞存活状态和软骨基质代谢平衡状态直接影响软骨相关性疾病的发生发展。大量研究显示,Wnt信号通路参与软骨细胞的增殖、分化、迁移、凋亡及稳态维持等过程,在参与软骨细胞生长发育过程中与其他信号通路相互作用、相互影响,共同介导软骨细胞生长发育。全面研究和认识Wnt信号通路调控途径和机制,对软骨相关疾病治疗具有重要意义。
- 贾瑞平徐宏光张小海
- 关键词:WNT信号通路软骨细胞