廖菁
- 作品数:3 被引量:11H指数:3
- 供职机构:华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金:中央高校基本科研业务费专项资金湖北省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 低浓度紫杉醇诱导卵巢癌SKOV3细胞有丝分裂阻滞及细胞凋亡的机制研究被引量:3
- 2014年
- 目的:研究低浓度紫杉醇对卵巢癌SKOV3细胞有丝分裂状态及细胞凋亡的影响及相关机制。方法:将Aurora B siRNA转染至SKOV3细胞,同时设置空白对照组及阴性对照组,通过蛋白质印迹法检测Aurora B蛋白表达。转染48 h后,用低浓度紫杉醇(100 nmol/L)处理各组细胞24 h,用流式细胞仪检测各组细胞有丝分裂指数的变化,通过免疫荧光染色观察各组细胞有丝分裂改变和细胞骨架形态改变。同时用100nmol/L紫杉醇处理各组细胞72 h,用流式细胞仪检测各组细胞凋亡。结果:将终浓度100 nmol/L Aurora B siRNA转染实验组SKOV3细胞后,Aurora B蛋白的表达相对于空白和阴性对照组明显下降,差异有统计学意义(P<0.01)。转染48 h后,使用低浓度紫杉醇(100 nmol/L)处理细胞24 h,相对于空白和阴性对照组,实验组有丝分裂指数明显下降,差异均有统计学意义(P<0.01)。通过分裂期标志蛋白p-H3对各组细胞进行免疫荧光检测,实验组的p-H3阳性细胞比例降低,与空白和阴性对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。通过细胞骨架蛋白α-tubulin对3组细胞进行免疫荧光染色检测,实验组出现圆形细胞骨架结构及浓缩核结构的细胞比例明显低于空白和阴性对照组,且差异均有统计学意义(P<0.01)。转染48 h后,采用低浓度紫杉醇(100 nmol/L)处理各组细胞72 h,与空白和阴性对照组相比,实验组细胞凋亡比例降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:Aurora B的表达下调可以降低低浓度紫杉醇对SKOV3细胞有丝分裂的阻滞作用,同时也可抑制低浓度紫杉醇诱导的卵巢癌细胞凋亡,可能是导致卵巢癌细胞对紫杉醇不敏感的关键分子机制之一。
- 廖菁胥琴杨宗元陈刚翁丹卉
- 关键词:AURORARNA干扰卵巢癌紫杉醇有丝分裂
- FOXP1在人卵巢癌细胞系C13和OV2008中的表达及其意义被引量:4
- 2014年
- 目的:研究FOXP1在人卵巢癌顺铂耐药细胞株C13*和敏感细胞株OV2008的表达和细胞定位情况,并初步探讨其表达意义。方法:①流式细胞术检测不同浓度顺铂处理后两株细胞的凋亡率;②实时荧光定量PCR和免疫荧光技术分别从基因和蛋白水平检测FOXP1在两株细胞中的表达和细胞定位情况。结果:①C13*对顺铂敏感性低于OV2008(P<0.05);②实时荧光定量PCR显示:FOXP1在C13*中的表达明显低于在OV2008中的表达(P<0.05);③免疫荧光显示:FOXP1在两株细胞胞核中均100%表达,而在C13*胞浆中的表达显著低于在OV2008胞浆中的表达(P<0.05),同时大部分OV2008胞浆呈现强"帽子"样染色,而此染色现象在C13*中非常微弱甚至消失。结论:FOXP1在卵巢癌细胞胞浆和胞核中均可表达,而在C13*胞浆的表达下调可能与其耐药有关。
- 胥琴刘华郭恩松廖菁朱涛
- 关键词:卵巢癌顺铂耐药
- 氯化锂对卵巢癌细胞增殖凋亡影响及其机制探讨被引量:4
- 2014年
- 目的:观察氯化锂(lithium chloride,LiCl)对卵巢癌SKOV3细胞增殖活性及凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:使用20(A组)、40(B组)和60(C组)mmol/L LiCl处理SKOV3细胞,正常对照组用等体积的细胞培养基培养。采用CCK8法观察LiCl对卵巢癌SKOV3细胞增殖活性的影响;流式细胞仪检测LiCl作用后细胞周期变化及凋亡情况。蛋白质印迹法检测细胞糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase3β,GSK-3β)、磷酸化糖原合成酶激酶-3β(phosphorglation-glycogen synthase kinase3β,p-GSK-3β)及有丝分裂阻滞缺陷蛋白2(mitotic arrest deficient2,MAD2)蛋白表达的变化。结果:不同浓度LiCl分别作用于SKOV3细胞48h后,A组细胞增殖活性为(80.64±1.06)%,与B组(57.18±1.56)%比较,差异有统计学意义,P=0.001;与C组(43.18±6.12)%比较,差异有统计学意义,P<0.001。B组作用24h细胞增殖活性为(75.12±9.35)%,48h为(57.18±1.56)%,72h为(35.36±1.00)%,与24h组相比,48h组(P=0.158)和72h组(P=0.036)细胞增殖活性降低。LiCl能有效抑制SKOV3细胞增殖,呈时间与剂量依赖性。不同浓度LiCl作用96h后SKOV3细胞的凋亡率相对于对照组升高,A组为(7.82±0.87)%,P=0.037;B组为(21.09±1.57)%,P<0.001;C组为(27.83±0.47)%,P<0.001,差异均有统计学意义。不同浓度LiCl作用48h后,细胞出现了明显的G2/M期阻滞,G2/M期的比例由对照组的(10.23±1.50)%依次升高,A组为(19.9±4.16)%,P=0.352;B组为(30.29±0.51)%,P=0.045;C组为(39.32±1.11)%,P=0.009,差异有统计学意义。蛋白质印迹法检测结果显示,LiCl浓度升高,p-GSK-3β蛋白相对表达量升高,A组为(54.39±2.75)%,P=0.019;B组为(72.39±2.89)%,P=0.009;C组为(86.57±2.52)%,P=0.005,差异有统计学意义。LiCl浓度升高,MAD2蛋白相对表达量升高,A组为(52.29±1.34)%,P=0.041;B组为(58.35±1.36)%,P=0.030;C组为(72.07±2.93)%,P=0.006,差异有统计学意义。结论:LiCl能有效抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖,并诱导其凋亡;上调MAD2增强有丝分裂检测点功能,�
- 廖菁丁冬杨宗元胥琴翁丹卉
- 关键词:卵巢肿瘤氯化锂增殖凋亡糖原合成酶激酶-3Β