席仁荣 作品数:13 被引量:15 H指数:2 供职机构: 深圳市疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 深圳市科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 化学工程 生物学 理学 更多>>
SET基因RNA干扰重组载体及其构建方法和应用 本发明公开了一种SET基因RNA干扰重组载体及其构建方法和应用,所述SET基因RNA干扰重组载体包括表达载体的基本序列、抗性基因序列、多克隆位点、启动子序列、可表达的SET shRNA的寡核苷酸链模板序列,所述的可表达的... 刘建军 席仁荣 黄海燕 邢秀梅 彭朝琼 周丽文献传递 三氯乙烯对L-02肝细胞Rho GDI α、ANXA3及GLO1表达的影响 目的:本文对我们前期利用比较蛋白质组学筛选出的差异蛋白Rho GDIα(Rho GTPases调节蛋白)、ANXA3(细胞凋亡及信号转导相关蛋白)及GLO1(细胞解毒修复系统相关蛋白)在三氯乙烯(trichloroeth... 席仁荣 邢秀梅 黄海燕 刘建军 庄志雄关键词:三氯乙烯 蛋白质印迹 差异蛋白 文献传递 双色红外荧光在蛋白检测中的优势 被引量:1 2008年 目的:通过比较Western blot的两种不同显色方法,了解双色红外荧光检测技术在蛋白检测中的优势。方法:制备L-02肝细胞总蛋白,SDS-PAGE电泳分离后转膜,内参蛋白GADPH,β-actin一抗孵育,二抗用藕联有IRDye700、IRDye800的荧光抗体和辣根过氧化物酶抗体,通过双色红外荧光检测技术和化学发光法检测,比较相同量时,两种方法的灵敏度及特异性差异。结果:双色法显色的图像较化学发光法更清晰直观,且实验背景低。结论:双色红外荧光检测提高了蛋白检测灵敏度,保证实验结果的准确,在蛋白检测方面具有不可比拟的优势。 黄海燕 刘建军 席仁荣 邢秀梅 陈国仁 王艳关键词:化学发光法 WESTERN BLOT 高剂量三氯乙烯对L-02肝细胞中Rho GDIα表达的影响 被引量:1 2008年 背景与目的:观察高剂量三氯乙烯(trichloroethylene,TCE)对L-02肝细胞中Rho GDIα基因在mRNA及蛋白水平表达的影响。材料与方法:以β-actin为内参,采用蛋白印迹(western blot)和实时荧光定量RT-PCR技术对分别40μmol/L TCE(实验组)和DMSO(溶剂对照组)处理的正常L-02肝细胞中的Rho GDIα蛋白和mRNA水平进行检测。结果:高剂量TCE处理后Rho GDIαmRNA表达量显著下降而蛋白含量明显升高。结论:Rho GDIα基因表达在高剂量TCE处理后发生了特异性改变,为揭示TCE对机体的损伤作用机制提供了重要线索。 邢秀梅 张坚松 刘建军 席仁荣 黄海燕关键词:三氯乙烯 RHO BLOT 实时定量RT-PCR 低剂量三氯乙烯诱导下谷胱甘肽转移酶Ω-1的表达变化 2010年 目的分析低剂量三氯乙烯(TCE)诱导的细胞兴奋效应时,谷胱甘肽转移酶Ω-1(GSTO-1)的表达变化。方法利用前期的双向电泳和质谱结果,参照前期兴奋效应的剂量设计,提取染毒细胞的mRNA和总蛋白,进一步使用实时定量RT-PCR和Western blotting分别从mRNA和蛋白水平上验证GSTO-1的表达变化。结果 Western blotting分析发现,0.1mmol/LTCE剂量组能诱导GSTO-1蛋白表达是对照组的2倍,但随着剂量的增加,蛋白表达改变不明显(与对照组相比,P<0.05)。RT-PCR结果提示:低剂量TCE能诱导GSTO-1基因表达增加,随着剂量的增加,表达反而有所减少。结论低剂量TCE能诱导GSTO-1基因及蛋白表达增加。 黄海燕 庄志雄 刘建军 席仁荣 邢秀梅关键词:三氯乙烯 人SET基因RNA干扰重组质粒载体的构建及其在肝细胞中的表达 被引量:1 2011年 目的建立真核质粒载体介导的人SET基因RNA干扰表达体系,并检测其在肝细胞中对SET蛋白表达的影响,为研究SET蛋白在三氯乙烯致肝细胞毒性的作用打下基础。方法设计并合成2对人SET基因特异性短发夹RNA(short hair-pin RNA,shRNA)寡核苷酸链,退火形成双链DNA后插入到真核表达质粒psiRNA-hH1 neo中产生shRNA重组质粒载体,经酶切和测序鉴定成功后,转染至L-02肝细胞中,48h后收集细胞提取总蛋白,Western blotting检测干扰后SET蛋白的表达。结果 shRNA重组质粒的酶切和测序鉴定均正确,Western blotting结果显示重组质粒psiRNA1组的干扰效果较好,对SET蛋白表达的抑制率达60%左右,与正常对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建针对人SET基因的RNA干扰真核质粒载体,其能有效地抑制肝细胞内SET蛋白的表达,为深入研究SET蛋白在三氯乙烯致肝细胞毒性中的作用奠定了基础。 黄新凤 刘建军 蒋英芝 席仁荣 杨亮关键词:RNA干扰 WESTERN BLOTTING 搅拌气升式生物反应器的研究进展 被引量:8 2008年 搅拌气升式反应器作为一种新型高效的生物反应器,因为其独特的优势而越来越受到重视,具有良好的研究和应用前景。概述了搅拌气升式反应器的国内外研究进展,着重评述了搅拌气升式反应器相比于传统机械搅拌式反应器和气升式反应器的所体现出的优点,详细介绍和分析了该新型反应器的基本结构、流体力学性质及相关的重要表征参数,并对其在生物发酵和化工行业中的应用和发展进行了回顾和展望。 席仁荣 吴振强关键词:传质性能 SET基因RNA干扰重组载体及其构建方法和应用 本发明公开了一种SET基因RNA干扰重组载体及其构建方法和应用,所述SET基因RNA干扰重组载体包括表达载体的基本序列、抗性基因序列、多克隆位点、启动子序列、可表达的SET shRNA的寡核苷酸链模板序列,所述的可表达的... 刘建军 席仁荣 黄海燕 邢秀梅 彭朝琼 周丽SET-EGFP重组表达质粒的构建及表达 目的构建癌蛋白SET与增强型绿色荧光表达载体(EGFP)的融合表达质粒pEGFP-N2-SET并获得表达。方法根据人SET基因序列。设计了一对含有Kozak序列、终止密码子、HindⅢ和KpnⅠ酶切位点的引物。从人L-0... 周丽 席仁荣 刘建军 邢秀梅 黄海燕关键词:蛋白磷酸酶2A 文献传递 靶向Annexin A3短发夹环RNA干扰载体的构建及鉴定 被引量:1 2008年 [目的]利用RNA干扰(RNA interfering,RNAi)技术构建和鉴定膜联蛋白A3(Annexin A3)的真核表达载体,为进一步研究Annexin A3在肝细胞中的功能奠定基础。[方法]人工合成3对shRNA序列,退火后定向克隆到真核表达载体psiRNA-hH1neo上,采用酶切和测序法鉴定。[结果]质粒酶切及测序鉴定得到的产物与预期的目的基因一致。[结论]成功构建膜联蛋白A3靶向的真核表达载体。 席仁荣 刘建军 吴振强 邢秀梅 黄海燕关键词:ANNEXIN A3 RNA干扰 真核表达载体