孙连生
- 作品数：19 被引量：16H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金：贵州省科学技术基金贵州省优秀科技教育人才省长资金项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 白介素-11对巨核细胞及血小板生成影响的研究进展
- 1996年
- 白介素-11是一种由造血基质细胞分泌的造血生长因子,已发现它对巨核细胞及血小板生成有较强的促进作用。本文分别从体外培养和体内给药两方面,对单一IL-11或与其它因子联合应用的效果作一综述。
- 孙连生
- 关键词：白细胞介素巨核细胞造血血小板
- 质粒DNA同源重组法构建腺病毒载体hosm被引量：4
- 2004年
- 目的构建含hosm基因的重组腺病毒载体,观察其对肿瘤细胞生长的影响。方法用脂质体介导的粒DNA同源重组方法构建含人osm基因的重组缺陷型腺病毒载体,用PCR法鉴定所构建的ad-hosm栽体。结果 成功构建了含hosm基因的重组腺病毒栽体。结论 脂质体介导的质粒DNA同源重组法能有效构建重组腺病毒载体;PCR法简化了阳性重组腺病毒的鉴定程序,为进一步研究重组腺病毒介导人osm基因对肿瘤细胞的生物学活性的影响提供了条件。
- 胡朝全孙诚谊孙连生王玉芝
- 关键词：腺病毒载体基因转移肿瘤细胞生物学
- rhIL-11对照射猴外周血小板数及造血祖细胞恢复的影响
- 为了给rhIL-11的临床应用提供实验依据,我们观察了rhIL-11在体外对人骨髓造血祖细胞集落形成和对3.0Gy照射猕猴的外周血小板及其祖细胞恢复的影响.结果表明:①rhIL-11可明显提高照射猴外周血血小板数的最低值...
- 柳晓兰郭德煌罗庆良郝静熊国林孙连生邱丽玲
- 文献传递
- 重组腺病毒载体含人抑瘤素的扩增及纯化被引量：4
- 2004年
- 目的 :构建含人抑瘤素 (HOSM)基因的重组腺病毒载体 ,观察其对肿瘤细胞生长的影响。方法 :用脂质体介导质粒DNA同源重组方法构建HOSM基因的重组缺陷型腺病毒载体 ,用聚合酶链反应 (PCR)法鉴定所构建的ad HOSM载体 ,在人胚肾细胞 (2 93细胞 )中扩增病毒。CsCl梯度超速离心纯化病毒 ,噬斑法测定病毒的滴度。结果 :获得了高纯度、高滴度的重组腺病毒载体。结论 :细胞内质粒DNA同源重组法能有效构建重组腺病毒载体 ,2 93细胞能有效扩增病毒。CsCl梯度超速离心法能制备高纯度的病毒 。
- 胡朝全孙诚谊孙连生王玉芝
- 关键词：基因转移技术腺病毒科聚合酶链反应抑瘤素M
- 直接注射表达hIL-6基因的质粒DNA促进照射小鼠的血小板生成的恢复(英文)
- 2001年
- 出血是大剂量电离辐射后所致损伤的主要临床症状之一 ,且可发展成致命的出血综合征。国内外均尝试在辐射或化疗动物模型上用一些细胞因子促进血小板恢复 ,以减少出血。但由于多次注射等不尽人意 ,因此人们仍在进行新措施的研究。用病毒载体进行基因治疗有一定的优势 ,但也有可能增加感染的几率。本实验尝试运用质粒载体对辐射损伤进行基因治疗。本研究观察了辐射对体内质粒载体基因转移效率的影响 ,以及转移hIL 6基因后对照射小鼠造血恢复的影响。经 6 .5Gy照射的小鼠一次肌内注射表达IL 6的质粒DNA后 ,用ELISA方法检测血浆IL 6水平 ,以蛋白表达量评价基因转移效率。结果显示 ,治疗组从照后 4天hIL 6开始增加 ,于照后 11天左右达峰值 ,而此时对照组仍处于低水平。治疗组照后 2 8天时蛋白表达仍维持在较高水平。不同照射剂量治疗组的结果相比 ,7.5Gy照射组hIL 6水平约为 5 .0Gy照射组的两倍。体内高表达的hIL 6明显促进照射小鼠造血恢复 ,治疗组不仅血小板的最低值明显提高 ,而且骨髓细胞中CFU GEMM和CFU Meg也明显增加。外周血血小板数的增加部分是由于网织血小板的增加 ,说明巨核细胞释放血小板的速度加快。以上结果表明电离辐射可以明显提高IL 6质粒DNA的体内转染效率 ,为质粒载体基因的方法治疗辐射?
- 孙连生柳晓兰邱丽玲王嘉玺罗庆良
- 关键词：基因治疗血小板生成白细胞介素6质粒DNA
- 小鼠骨髓巨核系祖细胞集落(CFU-MK)培养方法的建立及染色方法的改进
- 2002年
- 目的 :为深入探讨巨核系祖细胞增殖、分化的调控机制提供有效的技术途径。方法 :建立了小鼠骨髓CFU_MK的培养方法 ,并对影响集落形成及染色等条件进行了改进。结果与结论 :单因子rhIL_3,rhIL_6 ,rhGM_CSF ,rhEPO ,rhTPO和脾条件培养液及再障狗血清均具有不同程度的刺激CFU_MK生成的作用 ,尤以再障狗血清的刺激活性最强 ;接种细胞数为 (2～ 3)× 10 5 ml,培养 7～ 10d时CFU_MK的集落形成率较佳 ;采用改进后的不转移、不洗涤、原位复染并 4℃放置 2 4h的染色条件 。
- 柳晓兰郭德煌赵振虎孙连生罗庆良邱丽玲
- 关键词：小鼠骨髓巨核细胞集落刺激因子染色方法
- 重组人白介素-6不同应用条件对照射小鼠血小板恢复的影响被引量：2
- 1997年
- 重组人白介素－６不同应用条件对照射小鼠血小板恢复的影响孙连生柳晓兰邱丽玲军事医学科学院放射医学研究所北京１００８５０急性放射病的出血治疗，目前除了采用输注血小板等对症治疗外，尚无加速血小板恢复的根本措施。近些年来，随着细胞因子药物的兴起，尤其是具有促...
- 孙连生柳晓兰邱丽玲
- 关键词：促血小板生成素白细胞介素6药代动力学
- 重组腺病毒介导HOSM基因在胰腺癌细胞中的表达
- 2003年
- 目的 重组腺病毒介导 HOSM基因转染胰腺癌细胞后 ,用 RT- PCR方法检测外源性 HOSM基因的表达情况。方法 构建了含人抑瘤素 M(OSM,oncostatin M)基因的复制缺陷型重组腺病毒载体 ad- HSOM,以 ad- HOSM转染胰腺癌细胞株后 ,提取细胞的总 RNA,用 RT- PCR法检测 HOSM基因在胰腺癌中的表达。结果 HOSM基因在转染细胞中有效的表达。结论 RT- PCR法能有效的检测外源性 HOSM基因在胰腺癌中的表达 ,为重组腺病毒介导
- 胡朝全孙诚谊孙连生王玉芝王百林
- 关键词：胰腺癌逆转录PCR抑瘤素M基因转移
- 重组腺病毒载体介导HOSM基因对肝癌细胞体外增殖的抑制作用被引量：1
- 2007年
- 目的:构建含人抑瘤素M(human oncostatin M,HOSM)基因的复制缺陷型重组腺病毒载体AD-HOSM,观察其对人肝癌细胞株HepG2在体外生长抑制情况.方法:通过同源重组方法构建含HOSM基因的缺陷型重组腺病毒载体AD-HOSM,用报告基因AD-GFP检测腺病毒的对人肝癌细胞系的转染效率;人肝癌细胞株HepG2转染含HOSM基因的缺陷型腺病毒载体AD-HOSM后,用RT-PCR法检测外源HOSM基因在其中的表达;台盼蓝染色、细胞计数法检测AD-HOSM对HepG2的体外增殖抑制情况.结果:成功构建了重组腺病毒载体AD-HOSM,AD-HOSM对肝癌细胞HepG2有较高的转染效率,并且转染效率与病毒的剂量呈正相关.AD-HOSM感染HepG2细胞48h,HOSM基因在转染细胞能有效的表达.体外试验示,AD-HOSM转染的细胞的增殖却受到明显的抑制.结论:重组腺病毒介导HOSM表达能有效抑制HepG2在体外的增殖,提示重组腺病毒介导的HOSM基因治疗可能成为肝癌治疗的候选方案.
- 胡朝全孙诚谊孙连生王玉芝
- 关键词：腺病毒载体抑瘤素M逆转录
- 巨核细胞发育、分化的分子调控研究进展
- 1999年
- 本文通过回顾几个重要转录因子,锌指蛋白NF-E2、GATA-1和FOG,与巨核细胞有关的研究报道,对它们在巨核细胞发育、分化过程中的关键作用进行了综述。同时也尽可能关注了NF-E2、GATA-1与血小板生成素及其受体间的相互作用。
- 孙连生
- 关键词：巨核细胞转录因子血小板生成素锌指蛋白
