刘娜 作品数:38 被引量:104 H指数:6 供职机构: 中国食品药品检定研究院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 轻工技术与工程 生物学 理学 更多>>
一种多杂质大样本量液体的微生物富集装置及检测方法 本公开涉及一种多杂质大样本量液体的微生物富集装置,包括预过滤组件和微生物富集组件,所述的微生物富集组件包括了由亲水纤维材料制成的微生物富集单元,所述的亲水纤维材料的吸液量大于5g/g,纤维材料组成的微生物富集单元单位体积... 王学硕 崔生辉 赵琳娜 刘娜2021—2022年上海市区零售鸡肉和猪肉馅中沙门氏菌血清型和耐药特征研究 2025年 目的了解上海市区零售鸡肉和猪肉馅中沙门氏菌分离株的血清型分布和耐药性特征。方法收集2021—2022年上海市区零售鸡肉和猪肉馅中分离的109株沙门氏菌,使用血清凝集方法进行血清学鉴定,采用微量肉汤稀释法,对7类14种抗菌药物进行药物敏感检测,采用全基因组测序分析其耐药基因。结果109株沙门氏菌共检出22种血清群,鸡肉源沙门氏菌以科瓦利斯血清型为主,猪肉源沙门氏菌以伦敦血清型为主。96.3%的菌株为耐药株,菌株对四环素、氨苄西林、氯霉素和复方磺胺耐药率最高,多重耐药菌株占全部菌株的61.4%,最高可对7类12种抗菌药物耐药。所有菌株均检出耐药基因,共得到68种耐药基因。结论2021—2022年上海零售生禽畜肉中沙门氏菌的血清型分布较为复杂,整体耐药水平较高,多重耐药性严重,携带多种耐药基因,耐药性与携带的耐药基因存在相关性。对食源性沙门氏菌的持续监测以及针对重要耐药和传播机制开展深入研究,对保障我国食品安全和指导临床一线用药有重大的意义。 余文 安琳 任秀 刘娜 陈怡文关键词:沙门氏菌 血清型 耐药性 食源性疾病 食品检测用产肠毒素大肠埃希氏菌标准物质的制备及评价 被引量:3 2022年 目的制备并评价产肠毒素大肠埃希氏菌(ETEC)标准物质。方法分别用基质辅助激光解吸电离(MALDI-TOF MS)、生化、16 s RNA基因序列测定三种方法确认菌株种属。采用冷冻干燥技术制备600个ETEC标准样品(103 CFU/样品);从中随机抽取20个进行均匀性检验;模拟25℃和37℃的运输温度测试样品的运输稳定性,同时在4℃和-20℃的条件下进行保藏稳定性检验。组织3家实验室对样品进行协同验证。最后选择20件食品基质来验证样品的使用效果。结果生化、MALDI-TOF MS、16 s RNA基因序列鉴定CMCC(B)43208为大肠埃希氏菌,lt、stp、sth基因确认其为ETEC。均匀性检验中,单因素方差分析得F=1.48,小于F_(INV)(0.05,19,20)。稳定性检验中,在25℃和37℃保藏7 d后结果为103 CFU/样品,在-20℃保藏60 d和4℃保存28 d后结果为103 CFU/样品。协同标定实验中,3家实验室检测样品中菌株均为ETEC(103 CFU/标准样品)。使用效果评价中,ETEC标准样品加入20种食品基质后均可检出,而本底对照均未检出。结论本实验制备的ETEC标准样品均匀且稳定,协同验证、食品基质验证实验结果均与预期设置的103 CFU/样品一致,可以作为标准物质使用。 刘娜 王亚萍 赵琳娜 王学硕 崔生辉关键词:均匀性 稳定性 铜绿假单胞菌能力验证样品的研制及应用研究 被引量:3 2020年 目的:研制符合能力验证要求的铜绿假单胞菌质控样品,并将该质控样品用于铜绿假单胞菌的能力验证。方法:通过对冻干工艺和冻干保护剂的研究,研制出均一性、储藏稳定性和运输稳定性均符合要求的能力验证样品。本次能力验证样品为2瓶以粉底膏为基质的铜绿假单胞菌样品,通过产生随机数字的方式对样品进行编码,然后随机分配给参试实验室。结果:铜绿假单胞菌的质控样品的均一性、储藏和运输稳定性均符合能力验证中质控样品的要求;全国65家实验室中62家结果评定为满意,满意率为95.38%。3家不满意的实验室中2家为省级检验机构,1家为地市级检验机构。省级检验机构的满意率为94.28%,地市级检验机构的满意率为95.65%。结论:研制的铜绿假单胞菌质控考核样品可以满足能力验证的需求,本次能力验证真实地反映了参试单位的检测水平。 余文 安琳 陈怡文 任秀 骆海朋 刘娜 崔生辉关键词:化妆品 铜绿假单胞菌 复方多粘菌素B软膏外用制剂体外抗菌效果评价研究 被引量:3 2021年 目的:建立复方多粘菌素B软膏外用制剂的抗菌效能评价体系。方法:建立适用于美国临床和实验室标准协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)制定的琼脂稀释法的复方多粘菌素B软膏外用制剂前处理方法,搭建由11个种属72株细菌构成的评价用菌种库,并对不同厂家生产的复方多粘菌素B软膏外用制剂的抗菌效果进行评价。结果:待评价制剂MIC与相同处方比例的复方多粘菌素B软膏X和Y的MIC间未见显著性差异(P>0.05),极显著高于进口制剂A的MIC(P<0.01),极显著低于进口制剂B的MIC(P<0.01)。结论:本文初步建立了复方多粘菌素B软膏外用制剂体外抗菌效果评价用菌种库和针对性前处理方法,该方法可有效识别不同制剂之间由于抗菌成分配方不同引起的抗菌效果差异,为今后复方多粘菌素B软膏外用制剂体外抗菌效果评价提供了有效的数据和方法参考。 周刚 赵琳娜 王学硕 刘娜 刘宗银 曹慧敏 林兰 崔生辉关键词:复方多粘菌素B软膏 琼脂稀释法 肠道出血性大肠埃希菌菌株及其基因组DNA标准物质的研制及评价 2023年 目的 筛选肠道致病性大肠埃希氏菌(enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)菌株,并将其申报为中国医学细菌保藏管理中心(China Medical Bacterial Species Conservation and Management Center,CMCC)标准菌株;以此标准菌株研制我国自主知识产权的EHEC菌株及其基因组DNA标准物质,并将其申报为国家药品标准物质。方法 依据GB4789.6-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验致泻大肠埃希氏菌检验》,从160株来源于腹泻患者的大肠埃希菌中筛选EHEC菌株,按照CMCC菌株管理规定整理材料将其申报为标准菌株。用其制备EHEC菌液及其基因组DNA溶液,采用冷冻干燥技术分别制备菌株类(103CFU/样品)和基因组DNA类(20 ng/样品)样品各600个。将这两种样品各随机抽取20个进行均匀性检验;并分别于25、37℃条件下存放1、3、5、7 d取样检测运输稳定性,于4℃条件下存放7、14、28 d取样检测短期保存稳定性,于-20℃条件下存放14、28、60 d取样检测长期保存稳定性。组织3家实验室对两种样品进行协同标定。筛选20种食品基质对菌株样品进行使用效果评价。结果 从160株来源于患者的大肠埃希菌中筛选出1株EHEC菌株,最终申报为CMCC(B)43207标准菌株。均匀性检验中,F_(菌株样品)=0.662 0.05;20个基因组样品的eae、stx1、stx2基因均为阳性。于25和37℃保存7 d、-20℃保存60 d、4℃保存28 d后,菌株样品活菌含量均为10^(3)CFU/样品,基因组样品的eae、stx1、stx2基因均为阳性。随机抽取的EHEC菌株和基因组DNA样品经3家实验室鉴定均为EHEC,活菌含量均在10^(3)CFU/样品的水平,且eae、stx1、stx2基因均为阳性。在20种食品基质中加入样品后均可检出,本底对照均未检出。EHEC菌株及其基因组DNA样品均纳入我国药品标准物质,编号分别为80024和80056。结论 研制的具有自主知识产权的EHEC菌株及其基因组DNA标准物质可提高EHEC检验的时效� 刘娜 王亚萍 赵琳娜 王学硕 崔生辉关键词:基因组DNA 基于流式细胞仪提高乳制品商业无菌检验时效性的研究 2024年 目的基于流式细胞仪探究提高乳制品商业无菌检验项目时效性。方法以地衣芽孢杆菌CMCC(B)63552和蜡样芽孢杆菌CMCC(B)63303菌株制备定量参考品。以4种灭菌乳为基质,制备染菌浓度分别为800、8000、80000 CFU/mL的菌悬液,测试流式细胞仪法灵敏度。制备染菌浓度为8 CFU/样品和80 CFU/样品的灭菌乳和调制乳样品,经(36±1)℃保温(24±2)h后,按照GB 4789.26法和流式细胞仪法进行检测,并分析比较两种方法检测结果。结果在灭菌乳基质中,染菌浓度为800 CFU/mL时,流式细胞仪法对人工污染地衣芽孢杆菌样品的阳性检出率为75%,而对人工污染蜡样芽孢杆菌的样品均未检出阳性;染菌浓度为8000 CFU/mL和80000 CFU/mL时,流式细胞仪法对地衣芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌污染样品的阳性检出率均为100%。对人工污染8 CFU和80 CFU地衣芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌的灭菌乳和调制乳样品,经保温处理后,流式细胞仪法检出率为100%,GB 4789.26法中未见样品膨胀,但是镜检和培养结果检出率为100%。结论当样品中染菌浓度≥8000 CFU/mL时,流式细胞仪法可稳定检出。人工污染地衣芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌的灭菌乳和调制乳样品经保温处理(24±2)h后,流式细胞仪法和GB 4789.26法检出率均为100%。 刘娜 王亚萍 李景云 崔生辉关键词:商业无菌 地衣芽孢杆菌 蜡样芽胞杆菌 乳制品 流式细胞仪 多杂质大样本量液体的微生物富集装置及检测系统装置 本公开涉及一种多杂质大样本量液体的微生物富集装置,包括预过滤组件和微生物富集组件,所述的微生物富集组件包括了由亲水纤维材料制成的微生物富集单元,所述的亲水纤维材料的吸液量大于5g/g,纤维材料组成的微生物富集单元单位体积... 王学硕 崔生辉 赵琳娜 刘娜三种基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱系统对常见微生物鉴定结果的比较 被引量:8 2019年 目的比较Autof MS、Asta MicroIDsys和Bruker Biotyper三种商业化基质辅助激光解析电离飞行时间质谱系统对常见微生物的鉴定效能.方法方法学评价研究.收集2011至2018年本实验室食品中分离菌株及2016至2018年中国人民解放军总医院临床常规分离菌株共169株,经生化鉴定、16S rDNA或ITS测序,分属39个属,95个种.采用扩展直接涂抹法平行使用三种质谱系统进行鉴定,其中革兰阴性细菌(G-)93株、革兰阳性细菌(G+)65株、酵母菌11株.采用SPSS 18.0软件对数据进行统计分析.结果 169株菌株质谱鉴定在种水平置信度得分和可信任得分水平中,Autof MS质谱系统、Asta MicroIDsys质谱系统和Bruker Biotyper质谱系统准确鉴定率分别为91.1%(154/169)、86.4%(146/169)和81.7%(138/169),Autof MS和Bruker Biotyper之间差异具有统计学意义;在属水平鉴定中,Autof MS质谱系统准确鉴定率为98.8%(167/169),Asta MicroIDsys和Bruker Biotyper质谱系统准确鉴定率均为97.0%(164/169),三种质谱系统之间差异无统计学意义.结论三种质谱系统对常见微生物均有很好的鉴定效能.依据各质谱系统的鉴定分值评判原则,Autof MS质谱系统在种可信水平上的准确鉴定率较高. 赵琳娜 张伟 刘娜 崔生辉关键词:细菌 酵母菌 五种不同紫外装置杀灭枯草芽胞杆菌和降解核酸效果的对比研究 2024年 目的比较5种不同紫外装置杀灭枯草芽胞杆菌和降解核酸的效果差异。方法配制0.50×10^(6)~1.0×10^(6) CFU/mL浓度的枯草芽胞杆菌菌悬液,放置于距灯源5 cm处,分别经生物安全柜紫外灯、185产臭氧紫外灯、BKS-UV2016家用紫外灯管、JT8-Y30W紫外灯管和深紫外UVC-LED管照射1 min、30 s、10 s、5 s,培养24 h后比较菌落数差异。用细菌基因组核酸和PCR产物分别配制成相同浓度的溶液,放置于距灯源5 cm处,用上述5种紫外装置分别照射1 min后,用荧光定量PCR方法扩增比较Ct值,并分析有效模板浓度差异。对于能有效降解核酸的装置,参照枯草芽胞杆菌部分减少照射时间进一步分析降解情况。结果在枯草芽胞杆菌实验中,5种紫外装置照射1 min后均能全部杀灭目标菌,当减少照射时间时,深紫外UVC-LED杀灭作用最强。在降解细菌基因组核酸和PCR产物实验中,仅深紫外UVC-LED能降解目的片段,但是降解效率会随着照射时间的减少和样品浓度的降低而减弱。结论深紫外UVC-LED在较短时间内对枯草芽胞杆菌的杀灭效应更强,且能有效降解核酸从而解决部分PCR污染问题。 刘娜 王亚萍 李景云 崔生辉关键词:枯草芽胞杆菌 PCR产物