韩燕
- 作品数：55 被引量：169H指数：8
- 供职机构：西安交通大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 应用流式细胞术检测17β-雌二醇对H_2O_2诱导的视网膜神经细胞凋亡的保护作用被引量：4
- 2008年
- 目的用流式细胞技术(FACS)检测H2O2诱导的视网膜神经细胞凋亡以及17β-雌二醇(βE2)对细胞的保护作用。方法取新生24 h内的SD大鼠进行视网膜神经细胞的原代培养,待细胞培养4-5 d,经不同因素处理后,用MTT法检测细胞存活率,用FACS法检测细胞凋亡率。结果200μmol/L的H2O2能有效诱导视网膜神经细胞凋亡;低浓度的H2O2不能诱导细胞凋亡,但高浓度的H2O2诱导细胞凋亡的同时也导致了正常细胞比率的锐减;10μmol/L的βE2能有效对抗H2O2诱导的视网膜神经细胞凋亡;低浓度的βE2对细胞未表现出保护作用,高浓度的βE2对细胞反而表现出毒性作用。结论一定浓度的βE2在一定范围内能对抗H2O2诱导的视网膜神经细胞凋亡,表现对神经细胞保护的作用。
- 贾国荣俞小瑞李红波王淑红韩燕
- 关键词：17Β-雌二醇H2O2视网膜神经保护作用
- 强化胰岛素血糖控制治疗对危重症患者预后的影响被引量：9
- 2008年
- 将62例危重患者随机分为两组，在基础治疗相同的情况下分别给予强化胰岛素血糖控制治疗和常规治疗。观察临床疗效并测定外周血单个核细胞NF-κB活性和血浆细胞间黏附分子1（ICAM-1）水平。结果提示强化胰岛素治疗可改善危重症患者预后，胰岛素有可靠的抗炎作用。
- 南佳彦朱本章高烨韩燕张启云
- 关键词：胰岛素抗炎作用NF-ΚB细胞间黏附分子1
- 小反应体积实时定量PCR的可行性评价被引量：4
- 2010年
- 目的从扩增稳定性、扩增效率以及可靠性等多方面评估实时定量PCR（RtPCR）反应小体积的可行性,同时确定适合小体积体系的模板量。方法将实验分为10、15、20μL 3个体积组,每组分别采用0.1、0.2、0.3、0.4μL的大鼠cDNA为模板,进行大鼠-βactin mRNA的RtPCR扩增。通过扩增曲线和熔解曲线考察反应的稳定性,以梯度模板拟合标准曲线获得反应的扩增效率,其线性相关程度反映模板量是否合适。另外,构建大鼠降植烷诱导的关节炎（pristane-induced arthritis,PIA）模型,采用选定的反应体系,分别对模型组和正常组大鼠脾脏TNF-αmRNA进行扩增,通过TNF-α的相对表达趋势反映小体积扩增的可靠性。结果在大鼠-βactin mRNA的RtPCR扩增中,10、15、20μL 3个体积组均能特异稳定地进行扩增,并保证高扩增效率。而且每个体积组中的模板梯度表现出很好的线性相关趋势。同时选用10μL和20μL反应体积、0.2μL模板对关节炎大鼠脾脏进行TNF-αmRNA扩增,结果一致表现出了预期的显著性上调。结论实验证实10μL、15μL等小反应体积应用于RtPCR扩增中是可行的,具有较好的稳定性和可靠性,同时0.10.4μL cDNA模板在3种体系的合适模板范围内。这种较小的PCR反应体积,不仅节省了试剂和实验材料,对一些来之不易的临床标本尤为重要,也利于高通量大规模的RtPCR检测的实现。
- 韩燕朱文华何晓静蒋丛姗宁启兰吕社民孟列素
- 关键词：实时定量PCR稳定性可靠性
- 靶向巨噬细胞膜蛋白Vsig4特异性纳米抗体的构建和筛选被引量：2
- 2017年
- 目的构建V-set and immunoglobulin domain containing 4(Vsig4)特异性纳米抗体,以期作为巨噬细胞的分子探针。方法用Vsig4重组蛋白对羊驼进行免疫,分离血液中的淋巴细胞,利用噬菌体展示技术,构建噬菌体展示文库,经过连续3次生物淘筛获得与Vsig4蛋白结合的噬菌体,经测序和基因比对所得VHH序列,用ELISA法筛选出抗Vsig4的高亲和力纳米抗体,并用Vsig4稳定表达细胞系验证纳米抗体的结合能力。结果成功构建了插入率为70%、库容量为7.27×107的噬菌体表达文库,经过克隆筛选获得136个Vsig4阳性单克隆,经测序获得15个不同的VHH基因,将这些基因克隆至原核表达体系,表达和纯化后获得了高纯度的Vsig4纳米抗体,其中Nb119的亲和力最高,并且可以与Vsig4稳定表达细胞系结合。结论成功构建并筛选了特异性、高亲和力的Vsig4纳米抗体,以期用于检测巨噬细胞表面Vsig4的表达和构建特异性分子探针。
- 郑芳罗思羽韩燕宁启兰温玉荣
- 蛋白精氨酸甲基转移酶在E3大鼠哮喘模型中表达变化的研究被引量：2
- 2010年
- 目的观察1～6型蛋白精氨酸甲基转移酶(PRMTs)在E3大鼠急性哮喘模型肺脏和脾脏中的表达变化。方法构建卵清蛋白诱导的E3大鼠急性哮喘模型,分为对照组和哮喘组,每组各10只大鼠,病理及生化检测评估模型构建情况,半定量PCR检测1～6型PRMTs的表达差异。结果和对照组相比,哮喘组大鼠肺脏组织中PRMT1(P<0.01)、PRMT2(P<0.01)、PRMT3(P<0.05)、PRMT5(P<0.05)的表达有显著性升高,而PRMT4(P<0.05)的表达显著性降低;哮喘组大鼠脾脏组织中PRMT2(P<0.05)、PRMT5(P<0.05)的表达也出现显著性升高。结论蛋白精氨酸甲基转移酶在E3大鼠急性哮喘模型肺脏和脾脏中有差异性表达,这可能在哮喘发病的基因转录后调节过程中发挥着重要的作用。
- 孙青竹焦芳芳杨旭东钟波蒋梅花李国良吕彬韩燕宁启兰张富军孙健吕社民
- 关键词：哮喘
- 改革《生物化学与分子生物学》教学方法培养创新性医学人才被引量：12
- 2008年
- 生物化学与分子生物学不但是促进整个生命科学发展的前沿学科，也是医学生的重要基础课。近代医学的发展要求高等医学院校培养的学生，必须具备扎实的生物化学与分子生物学理论知识、以及运用其技术解决医学实际问题的能力和科研创新能力。为此，我们通过夯实学生《生物化学与分子生物学》的基础理论知识、开展多层次的实践训练（基本实验、综合试验及开放性实验）、科学管理的开放性实验室等多种途径，不断提高教学水平，努力培养医学创新性人才。
- 李冬民吕社民杨旭东俞小瑞孟列素王淑红韩燕宁启兰张富军
- 关键词：生物化学分子生物学实践教学
- KCNE2蛋白在自发性高血压大鼠心脏组织中的分布和表达
- 2008年
- 目的研究KCNE2蛋白在自发性高血压大鼠(SHR)心脏不同部位的分布和表达差异,及鼠龄对其表达水平的影响。方法提取幼龄和高龄SHR心肌不同部位(心室、室隔膜和心房)组织的膜蛋白,利用Western印迹技术和图象分析方法,比较KCNE2蛋白在样品之间免疫强度差异。结果SHR心肌不同部位组织中均有KCNE2蛋白的分布;同龄大鼠心肌不同部位组织中KCNE2蛋白的表达均无显著性差异;但在高龄大鼠的右心室和室隔膜组织中,KCNE2蛋白的表达显著高于其在幼龄大鼠相同组织中的表达。结论KCNE2蛋白在SHR心脏不同部位均有分布;在高龄大鼠右心室和室隔膜组织中,KCNE2蛋白的表达水平均高于其在幼龄大鼠同一组织中的表达。
- 王慧莲吕社民宁启兰韩燕杨旭东钟波Tseng GN
- 关键词：自发性高血压大鼠WESTERN印迹法
- 丹参素通过激活Wnt/β-catenin通路促进大鼠原代成骨细胞的分化被引量：11
- 2018年
- 目的探讨丹参素对原代培养大鼠成骨细胞分化的影响。方法用不同浓度的丹参素(0.1~10μmol·L^(-1))处理原代培养的大鼠成骨细胞,采用MTT实验检测丹参素对成骨细胞增殖的影响;运用Real-time PCR法检测Runx2和Osterix基因mRNA的表达;利用碱性磷酸酶染色检测细胞ALP的活性;利用茜素红染色检测细胞钙化结节的形成;通过Western Blotting检测细胞核内β-catenin的含量。结果丹参素对成骨细胞的增殖无明显作用,浓度为1~10μmol·L^(-1)的丹参素能够上调Runx2和Osterix基因mRNA的表达,增强ALP的活性,促进钙化结节的形成,增强β-catenin在细胞核内的表达。结论丹参素浓度为1~10μmol·L^(-1)能够促进成骨细胞的分化,且Wnt/β-catenin信号通路被发现参与其对成骨细胞分化过程的调控。
- 闫小飞张富军杜小娟武丽涛李冬民韩燕
- 关键词：丹参素成骨细胞细胞分化Β-CATENIN
- 程序化康复锻炼对全膝关节置换术后关节功能恢复的影响
- 目的：探讨程序化康复指导对全膝关节置换术后关节功能恢复的影响.方法：选取2012年1月至2013年1月在我科行全膝关节置换的患者530例,按照康复程序由专人每天监督患者进行相应的康复训练项目进行训练.结果：所选530例全...
- 韩燕华荣丽
- 关键词：膝关节置换术康复锻炼生活质量
- 文献传递
- Vsig4和免疫球蛋白Fc段融合蛋白的真核表达纯化被引量：1
- 2016年
- 目的:本项目将通过构建中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary,CHO)真核表达系统获取小鼠Vsig4膜外端和免疫球蛋白Ig G3a-Fc段的融合蛋白,鉴定Vsig4-Fc和Vsig4纳米抗体的相互作用。方法:采用重合延伸PCR法融合小鼠Ig G3a-Fc和Vsig4胞外段的基因序列,将该融合基因插入真核表达载体中并转染CHO细胞。Western blotting鉴定转染细胞上清中的目标蛋白,通过连续两次亚克隆筛选,获得高表达小鼠Vsig4-Fc融合蛋白的单克隆,之后大量培养增殖转染细胞并收集细胞培养上清,选择Protein A柱纯化方法纯化Vsig4-Fc蛋白,最后经ELISA法鉴定Vsig4-Fc和纳米抗体的结合能力。结果:在CHO细胞中成功构建了小鼠Vsig4-Fc真核表达稳转系,并且在真核表达体系中获得可表达15 mg/L的双分子结构Vsig4-Fc的稳定转染细胞系。经鉴定小鼠Vsig4-Fc融合蛋白能与Vsig4纳米抗体结合。结论:重合延伸PCR法使得Vsig4和Fc基因片段的融合更为高效,两次亚克隆筛选优势细胞系大幅提高了真核蛋白的表达量,为进一步研究Vsig4的生物学功能奠定重要基础。
- 郑芳罗思羽韩燕张富军温玉荣
- 关键词：融合蛋白蛋白质纯化
