韩源
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
- 供职机构：上海第二医科大学附属仁济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人血管内皮生长因子的克隆表达及免疫学检测工作标准品的制备被引量：2
- 2004年
- 目的 :克隆表达人血管内皮生长因子 16 5 (humanvascularendothelialgrowthfactor 16 5 ,hVEGF16 5 )基因 ,制备VEGF免疫学检测工作标准品。方法 :用RT -PCR从肝癌组织扩增目的基因VEGF16 5 ,插入到pUCm -T质粒中并测序鉴定。构建原核表达重组质粒 pET32a -hVEGF16 5 ,转化入大肠杆菌 ,经IPTG诱导 ,固化Ni2 + 吸收色谱纯化得到重组人VEGF16 5 (recombinanthumanVEGF16 5 ,rhVEGF16 5 )。用WsternBlot检测rhVEGF16 5免疫原性 ,并通过HUVEC增殖试验检测rhVEGF16 5生物学活性。按标准品的要求制备VEGF检测工作标准品 ,最后用ELASA试剂盒标定。结果 :PCR产物为 6 0 0bp ,测序结果表明其序列正确 ,人VEGF16 5可在大肠杆菌内可溶性表达 ,rhVEGF16 5蛋白相对分子质量为 38kD ,具有生物学活性。工作标准品浓度标定为 5 0 5pmol/L。结论 :成功地克隆了有生物学活性的VEGF16 5基因 ,并制备出VEGF免疫学检测工作标准品。
- 盛世乐韩源黄钢
- 关键词：VEGF165血管内皮生长因子免疫学检测克隆表达IPTG
- 上海地区500例在校大学生骨强度调查被引量：1
- 2003年
- 韩源黄钢
- 关键词：在校大学生骨强度
- 靶向VEGF基因siRNA对放射性核素杀伤肿瘤的增强作用被引量：2
- 2005年
- 目的建立特异性靶向VEGF基因表达的siRNA质粒,在肿瘤细胞内诱导RNA干扰,抑制VEGF表达,观察siRNA对放射性核素杀伤肿瘤的增强作用。方法构建针对人VEGF mRNA干扰质粒载体pRNAH-VEGF和对照载体pRNA-Ctr并转染人乳腺癌的MCF-7细胞株。采用RT-PCR和Western blot检测VEGF在mRNA和蛋白水平的表达抑制作用。用放射性核素32P胶体作为放射源照射细胞24h,采用克隆形成实验分析siRNA对放射性核素杀伤肿瘤的增强作用。结果与对照组相比较,转染了pRNAH(VEGF的MCF-7细胞VEGF mRNA和蛋白质抑制率均明显下调,细胞培养液上清中VEGF浓度下降了60.6%;siRNA和放射性核素联合使用组细胞克隆数量明显少于各自单独使用组;联合使用组细胞凋亡率也高于单独使用组。结论针对人VEGF mRNA干扰质粒载体有效地抑制内源性VEGF表达,增强了放射性核素对肿瘤细胞的杀伤作用。利用RNA干扰技术抑制VEGF表达可作为肿瘤放射治疗中的辅助治疗,以增加疗效。
- 盛世乐韩源覃文新黄钢
- 关键词：RNA干扰SIRNAMCF-7细胞株肿瘤
- 500例上海青年骨强度调查
- 目的调查了500名在校大学生的骨强度,以了解目前上海地区青年骨强度的情况。方法采用超声骨强度仪,测量500名学生非优势侧的胫骨、桡骨、指骨的骨强度。结果女生指骨SOS的平均值与数据库中同年龄的平均值有显著性差异(P<0....
- 韩源黄钢
- 关键词：骨强度
- 文献传递
