钱晶 作品数:31 被引量:35 H指数:3 供职机构: 吉林大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技支撑计划 公益性行业(农业)科研专项 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 轻工技术与工程 更多>>
新城疫病毒样颗粒的构建及免疫原性和免疫机制研究 病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)是由病毒结构蛋白装配而成的空心蛋白颗粒,与真实病毒形态结构相似,无自主复制能力,可作为安全有效的新型疫苗预防病毒性传染病,近年来VLP技术已成为疫苗研究领域... 钱晶关键词:树突状细胞 天然免疫 文献传递 猪链球菌2型分解代谢控制蛋白A的克隆和原核表达 被引量:7 2013年 原核表达猪链球菌2型分解代谢控制蛋白A(catabolite control protein A,ccpA)并进行纯化,通过免疫印迹反应初步鉴定重组蛋白的抗原性和特异性。采用PCR方法,扩增ccpA基因序列,克隆至原核表达载体pET-28a中,转入大肠杆菌BL21中进行诱导、表达和亲和层析纯化;经Western blotting初步评价ccpA的抗原性。重组原核表达质粒pET-28a-ccpA经双酶切及测序证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约38000,能被相关抗体所识别。因此,能成功在大肠杆菌中表达猪链球菌2型ccpA,为猪链球菌2型相关调节蛋白的免疫学研究奠定基础。 冉会玲 郎需龙 王兴龙 张瑞 钱晶 陈思 王秀然关键词:猪链球菌2型 原核表达 一种嵌合型新城疫病毒样颗粒的制备方法 本发明属于禽病预防疫苗制备技术领域,具体涉及一种嵌合型新城疫病毒样颗粒的制备方法的专利申请。该方法包括制备新城疫病毒样颗粒、制备GM‑CSF‑GPI锚定蛋白、嵌合型新城疫病毒样颗粒组装等步骤。利用本发明所制备的嵌合型新城... 丁壮 徐小洪 钱晶 丁佳欣 李金斗 黄蕾 尹仁福文献传递 布鲁氏菌胞内寄生的研究进展 被引量:2 2012年 布鲁氏菌是一种能够在哺乳动物巨噬细胞内生存和增殖的兼性厌氧菌。近年来,布鲁氏菌的研究主要集中在参与细胞内寄生过程中的毒力因子及其对宿主细胞的影响。主要论述布鲁氏菌如何逃避巨噬细胞的防御及其在细胞内寄生状况。 张瑞 王秀然 李晓艳 王景龙 钱晶 冉会玲 王兴龙关键词:布鲁氏菌 巨噬细胞 寄生 防御机制 羊布鲁菌16M VjbR蛋白酵母双杂交诱饵表达载体的构建及其毒性和自激活效应检测 2013年 利用Sos招募系统(SRS),通过PCR扩增羊布鲁菌16M VjbR基因的编码序列,定向克隆到酵母表达载体pSos中,构建诱饵重组质粒pSos-VjbR,经测序正确后其将转入酵母菌cdc25H(α)感受态细胞,检测其表达产物对酵母细胞有无毒性作用及对报告基因有无自激活作用。结果表明,经序列测定证实重组诱饵质粒pSos-VjbR构建成功。重组质粒转化入酵母细胞后,经检测其表达产物对cdc25H(α)酵母细胞无毒性作用,对报告基因亦无自激活作用。可以利用SRS研究与羊布鲁菌16M VjbR蛋白相互作用的蛋白,为进一步研究羊布鲁菌致病机制奠定了基础。 屈海龙 王景龙 李晓燕 张瑞 王秀然 陈思 钱晶 王兴龙关键词:自激活作用 酵母双杂交 2014-2015年东北地区新城疫病毒分子流行病学研究 薛聪 丁壮 尹仁福 钱晶羊布鲁菌16MUGPase基因缺失株的构建及其特性分析 被引量:2 2017年 目的构建羊布鲁菌16M株的尿苷三磷酸-葡萄糖-1-磷酸-尿苷酰基转移酶(UTP-glucose-1-phosphate-uridylyltransferase,简称UGPase)基因缺失候选疫苗株,并对其侵染宿主巨噬细胞的能力及毒力进行初步分析。方法采用PCR技术对羊布鲁菌的UGPase基因上、下游同源臂进行克隆,利用基因同源重组技术构建自杀质粒,经两步筛选法对重组菌株筛选后,进行巨噬细胞黏附侵袭试验和小鼠体内毒力试验。结果自杀质粒p BK-CMV-Sac B-△UGP构建成功,经双向筛选获得了羊布鲁菌UGPase基因缺失株16M△UGP。16M△UGP缺失株侵入巨噬细胞的CFU数低于16M强毒株,但高于M5疫苗株;小鼠攻毒14 d后,其平均脾指数为(6.55±0.27)g,平均克脾菌数为1.64×104CFU/g,均低于16M强毒株。结论成功构建了羊布鲁菌16M株的UGPase基因缺失株,并证实了UGPase基因的缺失对16M株毒力具有一定影响。 卜昭阳 杨艳玲 郎需龙 钱晶 李诗雨 李争 卢晓冉 沙洲 王莉 王兴龙关键词:毒力 猪链球菌2型分解代谢控制蛋白A经NF-κB/MAPK通路对巨噬细胞RAW264.7影响的研究 被引量:3 2013年 通过猪链球菌2型分解代谢控制蛋白A(catabolite control protein A,ccpA)原核表达蛋白对巨噬细胞RAW264.7进行刺激,结果发现,猪链球菌2型ccpA蛋白可以调节巨噬细胞NO产生,另外该蛋白质可通过对iNOS、NF-κB、p38和ERK1/2MAPK等的调节,从而影响巨噬细胞RAW264.7对细胞因子IL-6、TNF-α和IFN-γ的分泌。该研究为类似蛋白质对免疫细胞NF-κB/MAPK等通路调节影响及细胞因子产生条件探索建立了基础。 郎需龙 冉会玲 王秀然 王凯 卜昭阳 张瑞 钱晶 陈思 万家余 王兴龙关键词:猪链球菌2型 MAPK 区分新城疫病毒样颗粒疫苗免疫血清与野毒感染血清的间接竞争ELISA方法及试剂盒 区分新城疫病毒样颗粒疫苗免疫血清与野毒感染血清的间接竞争ELISA方法及试剂盒,属于病毒检测领域。本发明以NP蛋白为免疫抗原,以单克隆抗体为抗体诊断试剂,利用棋盘法对包被抗原及单抗浓度进行优化,对包被时间、一抗浓度及孵育... 丁壮 林洪哲 李金斗 丁佳欣 徐小洪 钱晶 尹仁福 丁伟文献传递 牛布氏菌virB8基因的克隆及原核表达 被引量:1 2012年 目的克隆牛布氏菌virB8基因并在大肠杆菌中进行表达。方法从牛布氏菌S19基因组DNA中PCR扩增virB8基因片段,插入pEASY-E1载体中,构建重组表达质粒pEASY-virB8,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达产物经HisTrapTMFF纯化后,进行SDS-PAGE分析和Western blot鉴定。结果扩增的virB8基因大小为720 bp;重组表达质粒pEASY-virB8经双酶切及测序证实构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为30 000,表达量占菌体总蛋白的17.3%;纯化的重组蛋白纯度为85%,Lowry法测定蛋白浓度为1.52 mg/ml,可与鼠抗His单抗特异性结合。结论成功克隆了牛布氏菌virB8基因,并在大肠杆菌中表达了重组蛋白,为新型疫苗的研发及布氏菌鉴别诊断方法的建立提供了有效的候选抗原。 张瑞 王秀然 夏力亮 李晓艳 王兴龙 王景龙 冉会玲 钱晶关键词:布氏菌 原核细胞 基因表达 纯化