郭川
- 作品数：12 被引量：56H指数：4
- 供职机构：厦门大学更多>>
- 发文基金：福建省科技攻关计划国家自然科学基金福建省科技计划重点项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学兵器科学与技术军事更多>>
- 蟹类原肌球蛋白的克隆与表达
- 原肌球蛋白是甲壳类动物的主要过敏原之一。本文通过分子生物学技术方法,分别克隆得到锯缘青蟹、中华绒鳌蟹和三疣梭子蟹的原肌球蛋白基因序列。测序结果表明,三个基因的序列长度均为855 bp,编码284个氨基酸残基,三者氨基酸序...
- 梁银龙曹敏杰郭川苏文金张凌晶刘光明
- 关键词：锯缘青蟹中华绒鳌蟹三疣梭子蟹原肌球蛋白克隆
- 文献传递
- 针对F-16战斗机模型的故障诊断与容错控制方法研究
- 固定翼飞机是世界上使用频率最高的飞行器之一,人们对于其控制系统的安全可靠性要求越来越高,而故障诊断与容错控制技术是提高飞机可靠性的有效途径。在最近几十年里,F-16战斗机一直是世界上最成功的轻型战斗机机种之一,拥有复杂的...
- 郭川
- 关键词：F-16战斗机故障诊断容错控制
- 文献传递
- 原核高效表达猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白的特性及应用被引量：4
- 2007年
- 从已构建的PRRSV ORF7重组质粒pUCm-T-ORF7中用PCR扩增ORF7基因亚克隆至表达载体pGEX-4T-3,构建重组表达质粒pGEX-4T-3-ORF7并转化大肠杆菌。经SDS-PAGE及Western blotting鉴定,成功表达了谷胱苷肽转移酶(GST)融合的核衣壳蛋白(N),重组N蛋白表达量约为菌体总蛋白的35%,主要以可溶的形式存在,且能形成同源二聚体。重组N蛋白经谷胱苷肽凝胶(glutathione sepharose 4B)亲和层析后得到高度纯化,并将该蛋白作为抗原建立了间接ELISA检测方法。利用该方法对某猪场76份猪血清进行检测并将结果与IDEXX公司ELISA试剂盒检测结果作比较,2种方法的总符合率达93.4%,检测结果之间差异不显著(P>0.05)。结果表明大肠杆菌表达的重组GST融合N蛋白具有良好的抗原性,因而有望利用该重组蛋白开发为试剂盒应用于临床PRRSV抗体的检测。
- 吴国平郭川曹敏杰刘冰心梁银龙苏文金
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白同源二聚体间接ELISA
- 鸡白细胞介素2基因的克隆、原核表达及功能研究被引量：4
- 2006年
- 以RT-PCR法从鸡脾脏细胞中扩增出鸡白细胞介素2编码基因,通过双酶切、连接步骤克隆进原核表达载体pQE30及pGEX-4T-3,构建了鸡白细胞介素2基因的重组原核表达质粒pQE30-chIL-2及pGEX-chIL-2.重组质粒转化大肠杆菌JM109后经诱导表达,分别得到两种表达产物.以SDS-PAGE和Westernblot检测确认表达产物为带6组氨酸标签及GST蛋白的融合鸡白细胞介素2,分子量分别为16 kDa及39.5 kDa.表达蛋白与抗鸡白细胞介素2单抗均有良好的免疫结合性,进一步证实为鸡白细胞介素2.表达产物经过纯化复性后,具有明显促进鸡脾淋巴细胞增殖的作用.
- 郭川郑忠辉吴国平林由苏文金曹敏杰
- 关键词：鸡白细胞介素2克隆原核表达免疫印迹
- 鲤肌肉肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶的分子克隆(英文)被引量：3
- 2007年
- 肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶(myofibril-bound serine proteinase,MBSP)是最近发现的一种蛋白酶。该酶参与肌原纤维蛋白的降解及鱼糜制品弹性的下降。但是,对该酶一级结构的研究,迄今为止,未有报道。本文根据已测定的鲤MBSP N-末端氨基酸序列以及丝氨酸蛋白酶活性中心保守序列设计兼并引物,结合RT-PCR技术实现了MBSP基因片段的扩增。再根据克隆到的MBSP片段序列设计基因特异引物,用于MBSP基因的5′和3′末端快速扩增。综合以上结果,鲤MBSP的全长被确定。序列分析表明,MBSP cDNA含有一732 bp的开放阅读框,编码243个氨基酸残基,其中信号肽长度为21个氨基酸残基。组成丝氨酸蛋白酶活性中心的氨基酸残基(His61,Asp107和Ser197)在MBSP中保守存在。成熟MBSP含有222个氨基酸残基,分子量为24.5 ku,比其天然蛋白的分子量30 ku略小。成熟MBSP的等电点为10.43。鲤MBSP与鲫MBSP,猪胰蛋白酶,牛胰蛋白酶,美洲鲽胰蛋白酶的同源性分别为80.6%,55.8%,55.3%和53.9%。而与仓鼠肌肉中具有胰凝乳蛋白酶性质的蛋白酶的同源性为39.2%。MBSP有高含量的赖氨酸残基(11.93%),此特性可能与该酶的肌原纤维结合特性有关。
- 郭川梁银龙刘光明苏文金曹敏杰
- 关键词：克隆同源性
- 猪繁殖和呼吸综合征病毒ORF7基因的克隆与序列分析被引量：2
- 2006年
- 根据猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)已发表的核苷酸序列,设计了1对特异性引物P1/P2,用RT-PCR扩增了PRRSV福建毒株FJ-1和FJ-2的全长核衣壳蛋白基因(ORF7),将扩增产物连接到pUCm-T载体并转化大肠杆菌DH10B,提取阳性重组质粒进行序列测定与分析.结果表明:FJ-1和FJ-2毒株ORF7基因均为372 bp,编码123个氨基酸,与美洲型参考毒株VR-2332及欧洲型参考毒株LV的核苷酸同源性分别为95.16%,94.35%和61.40%,60.65%,其推导的氨基酸同源性分别为95.93%,95.12%和56.49%,55.73%.研究表明,福建流行的FJ-1和FJ-2属于美洲型PRRSV毒株.
- 吴国平刘冰心郭川曹敏杰苏文金
- 关键词：PRRSVORF7
- RT-PCR快速检测猪繁殖与呼吸综合征临床组织样品的研究被引量：26
- 2004年
- 根据猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)已发表的核苷酸序列 ,在其核衣壳蛋白基因 (ORF7)保守区设计了一对跨幅约 380bp的特异性引物N1/N2 ,对已知PRRSVJK10 0 1毒株和PRRS临床病料进行RT PCR扩增 ,均扩增出约 380bp的特异片段。用此方法检测 5份疑似PRRS病例肺组织病料 ,结果均为阳性 ,对 2个阳性样品扩增产物进行克隆、测序 ,全长均为 372bp ,与PRRSVVR 2 332毒株ORF7同源性为 95%,证实为PRRSV的核衣壳蛋白基因。结果表明 ,建立的RT PCR检测PRRS临床组织病料特异、快速 。
- 吴国平郭川曹敏杰苏文金
- 关键词：RT-PCR检测繁殖与呼吸综合征
- 猪呼吸道冠状病毒核衣壳蛋白基因的克隆及原核表达被引量：1
- 2005年
- 以RT-PCR法从猪呼吸道冠状病毒(PRCV) 感染的ST细胞中得到核衣壳蛋白(N蛋白)cDNA, 并以此为模板利用PCR技术完成了N蛋白的基因扩增. 通过双酶切、连接、转化等过程构建了猪PRCVN蛋白基因的重组原核表达质粒, 表达产物经SDS PAGE、Westernblot检测被确认为GST融合的N蛋白. 表达蛋白与PRCV阳性血清间有良好的免疫结合性.
- 曹敏杰郭川吴国平翁凌苏文金
- 关键词：猪呼吸道冠状病毒N蛋白克隆
- PRRS病毒GP5的基因序列分析及其重组蛋白的应用研究
- 猪繁殖与呼吸综合征/(PRRS/)是以母猪流产及仔猪呼吸系统障碍为主要病征的传染病,病原为猪繁殖与呼吸综合征病毒/(PRRSV/)。该病毒传染性强,而且感染机体后导致免疫抑制及各种并发症,给养猪业造成巨大危害和经济损失。...
- 郭川
- 关键词：PRRSVGP5重组蛋白
- 文献传递
- 猪繁殖和呼吸综合征病毒福建毒株ORF5的序列分析及原核表达被引量：3
- 2006年
- 根据猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)已发表的核苷酸序列,设计了一对特异性引物(p1/p2),用RT-PCR扩增PRRSV福建毒株FJ-1的全长糖基化囊膜蛋白基因(ORF5),将扩增产物连接到pUCm-T载体并转化大肠杆菌DH10B,筛选阳性重组质粒进行序列测定与分析.再设计另一条引物(p3)与p2从重组载体pUCm-T-ORF5中扩增出缺失了N端30个氨基酸残基的tGP5的编码序列tORF5,克隆入表达载体pGEX-4T-3后在大肠杆菌中表达.结果表明,FJ-1毒株ORF5基因为603 bp,编码200个氨基酸,与北美型参考毒株VR-2332、CH-1a及欧洲型参考毒株LV的氨基酸同源性分别为87%、89%和53%,推定福建毒株FJ-1属于北美型毒株.原核表达产物经过SDS-PAGE及Western Blot分析,证实为GP5与谷胱甘肽转移酶(GST)的融合蛋白.分子量为41 kDa.表达量约占菌体蛋白的15%,主要以包涵体形式存在.
- 郭川吴国平郑忠辉苏文金曹敏杰
- 关键词：PRRSVORF5原核表达
