邵俊高 作品数:12 被引量:21 H指数:3 供职机构: 新疆农业大学动物医学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
一种预防奶牛乳腺炎的核酸疫苗PV-Fn的设计及其构建 本发明属于微生物学,分子生物学及免疫学领域,涉及牛乳腺炎奶样中金黄色葡萄球菌来源的粘附素分子FnBPA核酸疫苗的设计和制备使用。通过对来源于奶牛乳腺炎地区分离株FnBPA的部分基因的克隆,分析其序列及抗原表位,筛选抗原表... 苏艳 王世民 张宝江 邵俊高 韦海娜文献传递 重组牛乳源金黄色葡萄球菌黏附因子FnbpA A功能区的表达与鉴定 2013年 黏附素分子FnbpA(纤连蛋白结合蛋白A,fibronectinbindingproteinA)是金黄色葡萄球菌感染早期最重要的致病因子,也是一个重要的免疫靶标。由于不同地区流行的菌株产生的黏附素有一定的差异,将分离自新疆地区奶牛乳源金黄色葡萄球菌黏附素分子FnbpA的A功能区亚克隆至pGEX原核表达载体并转入BL21中诱导表达,SDS—PAGE分析表明,切除GST标签后在63kD处出现特异性条带。纯化切除GST标签的蛋白经弗氏佐剂乳化免疫试验兔。ELISA方法检测免疫兔的抗体效价并评估抗体和葡萄球菌结合能力,结果表明,目的蛋白的抗体效价可达6.7×10^6,并可在体外识别菌体抗原。 苏艳 王世民 李莹 韦海娜 邵俊高 张宝江 殷涛关键词:金黄色葡萄球菌 原核表达 蛋白纯化 免疫原性 ELISA 马链球菌马亚种新疆分离株XZ1SeM蛋白表达和免疫原性分析 被引量:3 2015年 为研究马链球菌马亚种新疆分离株XZ1SeM重组蛋白的免疫生物学功能,评价其作为抗原开展研制马链球菌疫苗的价值。采用PCR方法从马链球菌马亚种扩增其SeM基因,将其克隆至原核表达载体pGEX-4T-2,诱导表达并用纯化的重组蛋白作免疫原免疫小鼠,分析比较重组蛋白免疫后小鼠抗体水平及对小鼠的免疫保护力。结果表明,纯化得到64ku的SeM重组蛋白,且该蛋白可与马链球菌马亚种阳性血清发生特异性反应。间接ELISA检测的抗体效价高达1∶128 000,具有良好的免疫原性,免疫小鼠攻毒结果显示重组蛋白免疫对小鼠有良好的保护效果。 邵俊高 李善春 苏艳关键词:免疫原性 一种马流产沙门菌PCR检测试剂盒及其检测方法 本发明涉及一种可用于检测马流产沙门氏菌的PCR检测试剂盒,包括引物、dNTP、缓冲液和DNA聚合酶,其中的上游引物是5’ATTAGTGCCGGTTTTATCCT3’下游引物是5’TTACCACTCGCATCAAATC3’... 苏艳 邵俊高 杨康 张宝江文献传递 新疆地区牛乳源金黄色葡萄球菌粘附因子ClfA基因的克隆与序列分析 被引量:3 2013年 采集新疆奶牛隐性乳腺炎乳样,对分离鉴定的致病性金黄色葡萄球菌,提取分离菌株的基因组DNA,参考GenBank中发表的ClfA(Clumping Factor A of Staphylococcus aureus)基因序列,设计特异性引物经PCR扩增得到1 560bp的ClfA基因。对新疆3个地区分离的9株金黄色葡萄球菌分别进行ClfA基因的克隆和序列分析,对ClfA蛋白的氨基酸序列分析结果表明,新疆3个地区ClfA蛋白氨基酸的同源性为91.5%~100%,与国外其他分离菌株的同源性为91.9%~100%,差异性较小,该结果表明ClfA基因在该菌进化和流行过程中是保守的。 邵俊高 苏艳关键词:金黄色葡萄球菌 克隆 马链球菌马亚种IgG结合蛋白的原核表达和免疫原性 被引量:3 2016年 为研究马链球菌马亚种IgG结合蛋白(EAG)免疫原性和保护力,评价其作为马链球菌疫苗抗原的价值。采用PCR法扩增马链球菌马亚种EAG基因,将测序正确的EAG扩增产物与原核表达载体pET-28a(+)连接构建重组质粒,对转化后的大肠杆菌进行诱导表达,用诱导纯化后的重组蛋白作免疫原免疫小鼠,分析重组蛋白免疫小鼠后的抗体水平及对小鼠的免疫保护力。结果表明,诱导后可得到26 kDa的EAG重组蛋白,且该蛋白可与该菌阳性血清发生特异性反应。间接ELISA检测免疫小鼠的抗体效价可达1∶8 100,重组蛋白免疫后对小鼠保护力可达90%。该结果表明,表达的EAG蛋白具有良好的抗原性,可有效提高小鼠的体液免疫水平及免疫保护力。 邵俊高 姜慧娇 常建新 张宝江 李善春 苏艳关键词:免疫原性分析 Kozak序列对金黄色葡萄球菌黏附因子FnBPA-A DNA疫苗诱导小鼠免疫应答的影响 被引量:5 2013年 黏附因子FnbpA(纤连蛋白结合蛋白A,Fibronectin binding protein A)是金黄色葡萄球菌表面的蛋白质成分,是该菌感染早期最重要的致病因子,可促进其对寄主组织的侵入,也是一个有潜力的免疫靶标。将牛乳源金黄色葡萄球菌中FnBPA基因的A功能区克隆至真核表达载体中,分别构建含Kozak序列和不含Kozak序列的FnBPA-A基因真核表达载体,重组质粒经鉴定测序正确后,免疫C57BL/6小鼠检测其抗体水平和淋巴细胞增殖情况,并对各组小鼠进行攻毒实验。检测的结果表明Kozak修饰的重组DNA在血清抗体效价(P<0.05)和免疫保护率方面均优于不含Kozak序列的重组DNA,在刺激淋巴细胞增殖方面Kozak修饰的重组DNA的刺激效果虽然也高于不经修饰的重组DNA,但是差异不显著(P>0.05)。根据总体的免疫效果来看,Kozak序列对增强FnBPA的重组DNA疫苗诱导的免疫应答起了不容忽视的作用。 苏艳 王世民 邵俊高 张宝江 韦海娜关键词:金黄色葡萄球菌 KOZAK序列 免疫应答 牛源金黄色葡萄球菌黏附素纤连结合蛋白A分泌型DNA疫苗诱导小鼠免疫效应的研究 被引量:1 2013年 采用PCR方法对编码金黄色葡萄球菌黏附素纤连结合蛋白A(FnbpA)的A区基因片段进行了特异性扩增,构建了真核表达载体pVAX-SFn,转染BHK-21细胞后经ELISA可检测出分泌表达的FnbpA蛋白。将真核重组表达质粒肌肉注射C57BL/6小鼠,免疫后检测小鼠血清抗体效价、淋巴细胞增殖及对试验小鼠攻毒试验。结果表明,该重组表达载体诱导细胞和体液免疫应答的强度均明显超过对照组。对小鼠的攻毒试验结果提示该重组DNA经肌肉注射途径接种可对小鼠产生免疫保护。本试验的结果对该DNA疫苗今后在实际中的应用奠定了良好的试验基础。 苏艳 王世民 邵俊高 张宝江 韦海娜 李莹关键词:金黄色葡萄球菌 DNA疫苗 免疫效应 牦牛体表寄生硬蜱的鉴定及吸血前后观察 被引量:4 2012年 为探究牦牛体表寄生硬蜱的优势蜱种及其生物学特性,以便能更好地预防、控制蜱传疾病,从牦牛体表采集蜱虫约1000只,进行蜱种鉴定和饲蜱试验。通过形态学鉴定,牦牛体表寄生的优势蜱种为森林革蜱、草原革蜱、银盾革蜱和亚东璃眼蜱。本文通过查阅资料进一步研究了它们的形态学区分点,并通过实验室饲养观察其吸血情况。研究查清牦牛体表寄生蜱虫的种类,掌握其生活史,对今后牦牛养殖业及蜱传疾病的综合防治具有重大意义。 张薇 王真 王新 邵俊高 巴音查汗关键词:形态学鉴定 牛乳源金黄色葡萄球菌Efb基因的克隆与序列分析 被引量:1 2012年 对分离自新疆的奶牛乳源金黄色葡萄球菌,提取分离菌株的基因组DNA,参考GenBank中发表的细胞外纤维蛋白原结合蛋白(Efb)基因序列,设计特异性引物经PCR扩增得到长432bp的Efb基因。对新疆三个不同地区分离的9株金黄色葡萄球菌分别进行Efb基因的克隆和序列分析,对Efb蛋白的氨基酸序列分析结果表明:新疆三个不同地区Efb蛋白氨基酸的同源性为91.0%~100%,与其他地区分离菌株的同源性为86.5%~100%,差异性较小。该结果表明,Efb基因在该菌进化和流行过程中是保守的。 韦海娜 王世民 邵俊高 苏艳关键词:金黄色葡萄球菌 克隆