邱黎清 作品数:6 被引量:16 H指数:3 供职机构: 福建师范大学生命科学学院工业微生物发酵技术国家地方联合工程研究中心 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 福建省自然科学基金 福建省科技计划重点项目 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
理性设计盐桥构建伯克霍尔德菌脂肪酶热稳定突变体 被引量:1 2017年 【目的】借助蛋白质工程技术提高伯克霍尔德菌ZYB002脂肪酶LipA的热稳定性,以期更好地将其应用于工业生产中。【方法】利用YASARA、Fold X、Rosetta、Gromacs等生物信息学软件,构建1个脂肪酶Lip A的热稳定性提高的微型突变体电子文库;通过对突变体的结构信息和自由能变化进行评估,筛选出潜在的有价值的突变体。继而利用基因定点突变技术,构建上述候选突变体的突变基因文库,通过实验筛选出热稳定性提高的脂肪酶LipA突变体。【结果】利用上述方法,从构建的20个脂肪酶LipA突变体中,筛选到热稳定性有显著提高的3个突变体LipA-Asn^(125)Asp、LipA-Asn^(125)Glu和LipA-Gln^(262)Glu。经55°C处理12 min后,上述3个突变体的T1250值较野生型分别提高4.0°C、5.5°C和4.4°C;在55°C下的半衰期较野生型分别提高了2.2倍、3.8倍和2.6倍。【结论】利用生物信息学软件,构建脂肪酶LipA突变体电子文库,结合蛋白质的结构信息,可以快速筛选到热稳定性提高的脂肪酶LipA突变体。 刘艳如 赵丙春 董盼盼 邱黎清 黄建忠 朱晓兰 王作镇 舒正玉基于B-factor饱和突变法筛选热稳定性伯克霍尔德菌脂肪酶A突变体 伯克霍尔德菌(Burkholderia sp.) ZYB002脂肪酶A在机械浆造纸工艺中,能有效控制树脂障碍的产生。在实际应用中,机械浆温度高达80℃,因此进一步提高脂肪酶LipA的热稳定性,是提高脂肪酶使用效果,将其更... 邱黎清关键词:B值 热稳定性 文献传递 热稳定性伯克霍尔德菌脂肪酶A突变体的筛选 被引量:3 2015年 【目的】为更好地提高伯克霍尔德菌ZYB002脂肪酶LipA在TMP纸浆造纸工艺中的应用,有必要利用蛋白质工程技术,提高其热稳定性。【方法】基于B-factor值筛选LipA多肽链中潜在的突变位点,利用迭代饱和诱变技术,构建突变文库,筛选热稳定性提高的突变体。【结果】利用上述方法,从4个突变文库中分别筛选到在55℃下,半衰期较野生型脂肪酶LipA分别提高了1.8倍、3倍、2.2倍和1.7倍的脂肪酶突变体。【结论】基于B-factor值选择突变位点,利用迭代饱和突变技术,快速筛选到热稳定性有显著提高的突变体。 刘艳如 邱黎清 黄建忠 赵丙春 王作镇 朱晓兰 高媛媛 舒正玉关键词:热稳定性 B值 影响家畜黄体早期发育过程中血管新生因素分析 被引量:7 2011年 家畜卵巢黄体早期发育过程中血管新生是保证黄体形成所必须的营养与激素得到供应。血管新生是血管生长的一个过程,主要局限于健康成年动物的生殖系统。在哺乳动物中,黄体是血管新生比较强烈的地方,所以黄体是理想的研究血管生成的细胞和分子调控机制的模式系统。目前对其分子机制研究发现,血管内皮生长因子VEGF在这个过程中期主要作用,通过拮抗剂特异性阻断体内黄体时期的作用,发现黄体血管形成和功能被显著抑制。对黄体时期VEGF依赖性血管生成的分子机制研究,将有助于开发新的策略用于治疗黄体相关的不孕症,以及改善动物繁殖性能。本文在先前的研究基础上,对影响家畜黄体早期发育过程中血管新生的因素进行分析,旨在为畜牧生产上的应用提供理论依据与指导。 罗倩萍 张正红 黄晓红 邱黎清 张美娜 成勇 王正朝关键词:血管生成 家畜 伯克霍尔德菌ZYB002胞外脂肪酶的分离纯化及其酶学性质分析 被引量:3 2014年 伯克霍尔德菌ZYB002胞外脂肪酶发酵上清液经冻干、透析、DEAESepharose Fast Flow层析柱和SephadexG-75层析柱等步骤纯化后,获得电泳纯的脂肪酶.纯化后的脂肪酶分子质量为33ku,水解棕榈酸对硝基苯的比活力为1902.5U·mg^-1.脂肪酶催化水解反应的最适温度和最适pH值分别为50℃和8.5;在30-65℃和pH3.0-10.0的范围内保持相对稳定.脂肪酶对烷烃、非离子型表面活性剂等有机溶剂具有较好的耐受性.在最适条件下,脂肪酶水解pNPP的k和‰。。分别为3.79mmol·L^-1和714.29μmol·mg^-1·min^-1. 刘艳如 邱芳锦 舒正玉 王作镇 邱黎清 李欣 江贤章 黄建忠关键词:分离纯化 酶学性质 自转运蛋白作为细菌表面展示系统的研究进展 被引量:3 2015年 细菌表面展示技术已成功应用于生物技术、生物医药等诸多领域。在众多细菌表面展示系统中,基于自转运蛋白构建的细菌表面展示系统因其强大的外源蛋白展示能力,展现出良好的应用潜力和应用前景。本文综述了当前已发现的自转运蛋白的种类、已解析的自转运蛋白的结构及其分泌过程,概述了基于自转运蛋白构建的细菌表面展示系统的优点及其应用情况。 刘艳如 王作镇 赵丙春 黄建忠 朱晓兰 邱黎清 舒正玉