赵亚杰
- 作品数:31 被引量:21H指数:3
- 供职机构:武汉生物制品研究所更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划国家科技重大专项“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 荧光素标记抗CD3/CD4/CD8单克隆抗体的质量控制
- 目的:对本室用荧光素标记的抗CD3、CD4和CD8单克隆抗体进行质量控制。
方法:采用流式细胞术,利用其多参数的流式细胞分析技术,对单色、多色荧光标记抗体的偶联率及偶联效果进行分析与评价。
结果: 荧...
- 孙可芳闭兰端义坤赵亚杰张涛张爱华
- 关键词:荧光标记单克隆抗体生物制品
- 文献传递
- 治疗用抗HFRS病毒单克隆抗体质量分析
- 2001年
- 邹昌勇雷继军邬义安杜厚明喻远祥杨明赵良赵亚杰孙可芳
- 重组变形链球菌表面蛋白抗原(PAC)的表达和纯化
- 目的:进行PAC蛋白的表达和纯化,获得高纯度的抗原用于进行抗体检测。
方法:将转化了克隆有PAC蛋白基因的PET载体(PET-PAC)的大肠杆菌进行诱导表达,表达产物经Ni离子金属螫合层析纯化,并进行SDS—P...
- 闭兰罗丹王炯赵亚杰吴小丽齐建新张爱华
- 关键词:表面蛋白抗原变形链球菌龋齿DNA疫苗效力试验
- 文献传递
- 人T淋巴细胞CD3ε链的原核表达及纯化
- 2009年
- 目的原核表达并纯化人T淋巴细胞CD3ε(hCD3ε)链。方法以健康成人外周血单个核细胞总RNA为模板,采用RT-PCR法扩增人CD3ε链基因,并克隆入pCR-II载体,酶切鉴定及测序分析后,再定向克隆至原核表达载体pGEX-4T-3中,构建重组表达质粒pGEX-4T-3-hCD3ε,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达产物经GST亲和层析纯化后,进行Western blot鉴定。结果酶切分析及DNA测序证实,hCD3ε链基因被正确克隆入pGEX-4T-3载体,并能在原核系统中稳定表达。表达产物的相对分子质量为49 500,0.2 mmol/L IPTG 25℃诱导表达4.5 h,目的蛋白的表达量最高,占菌体总蛋白的29.3%,其中可溶性表达占12.8%。纯化的融合蛋白纯度可达86.1%,可分别被兔抗人CD3ε多抗和羊抗GST多抗识别。结论已成功地原核表达并纯化了GST-hCD3ε融合蛋白。
- 金玉玲张爱华闭兰赵亚杰彭祥兵孙可芳
- 关键词:人T淋巴细胞原核表达纯化
- 人T淋巴细胞CD3ε链在原核系统中的融合表达及初步鉴定
- CD3分子是T细胞膜上的重要分化抗原,是成熟T细胞的特征性标志。因此,抗CD3单抗作为检测T细胞亚群的一类重要的检测试剂,得到了广泛的应用。CD3分子ε链无糖基化位点,比较适合于原核表达。而且Transy C等人鉴定的1...
- 金玉玲张爱华闭兰赵亚杰
- 文献传递
- 荧光标记CD3/CD4/CD8单克隆抗体的质量控制被引量:1
- 2007年
- 目的对荧光素标记的CD3、CD4和CD8单克隆抗体进行质量控制。方法采用多参数的流式细胞分析技术,对单色、多色荧光标记抗体的偶联率及偶联效果进行分析与评价,并进行稳定性试验。结果荧光标记的单克隆抗体特异性保持完好;单色标记的抗体荧光强度均比进口对照低一个数量级;FITC-CD3/PE-CD4平均荧光强度与进口对照相差较大,FITC-CD3/PE-CD8和FITC-CD4/PE-CD8平均荧光强度与进口对照相差较小;FITC标记产物的F/P值控制在1~2之间;标记抗体于2~8℃放置18个月,稳定性良好。结论应用FITC、PE标记的CD3、CD4和CD8单克隆抗体可以采用流式细胞仪进行检测。
- 孙可芳肖建闭兰端义坤赵亚杰张涛张爱华
- 关键词:流式细胞术荧光素标记单克隆抗体
- 人抗乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)Fab噬菌体抗体库的构建、筛选及鉴定
- 主要内容:本课题采用基因拼接(splicing overlapping extension,SOE)的方法,以pComb3H-SS噬粒为载体,构建了一个库容量为4×105的人抗乙型肝炎病毒表面抗原Fab噬菌体抗体库,从所...
- 张爱华闭兰赵亚杰端义坤余模松
- 文献传递
- 武汉(Wu)系列抗入T细胞及其亚群单抗被引量:1
- 1989年
- 本文报告了Wu系列抗人T及其亚群单抗按国际第三次人白细胞分化抗原专题讨论会要求进行检定的结果。这是国内第一套较全的OKT样系列单抗,即WuT1(OKT1,CD5);WuT3(OKT3,CD3);WuT4(OKT4,CD4);WuT6(OKT6,CD1a):WuT8(OKT8,CD8);WuT9(OKT9,抗转铁蛋白受体,抗TfR);WuT10(OKT10,CD38);WuT11(OKT11,CD2)及Wu-Tac(Tac,CD25)。
- 史良如陈善华王中德谭向阳欧阳斌徐辉吴晓波封江南王志友孙可芳赵亚杰
- 关键词:单抗亚群T细胞人白细胞分化抗原
- 抗SARS冠状病毒单克隆抗体的制备和鉴定
- 2006年
- 目的建立能稳定分泌抗SARS-CoV单克隆抗体的杂交瘤细胞株。方法用SARS-CoV灭活全病毒液免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术建立6株稳定分泌抗SARS-CoV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并进行全面鉴定。结果免疫双扩散证实1C6细胞株分泌的单抗为IgG2a亚类,其余5株细胞分泌的单抗为IgG1亚类;腹水效价均达到10-6以上;6株细胞分泌的单抗均不与麻疹病毒等其它5种呼吸道病毒发生交叉反应;Westernblot证实6株细胞分泌的单抗均识别相对分子质量约150000的S蛋白及其相对分子质量为120000的裂解片段;相加指数证实6株细胞分泌的单抗识别相关的抗原表位;用硫氰酸铵洗脱法比较了6株细胞分泌的单抗的相对亲和力大小,依次为1A4>4F6>1C6>1B10>2H2>1F3;中和试验证实单抗4F6和1F3具有中和活性,中和效价均为1∶10;杂交瘤细胞株连续培养3个月以上及冻存半年后复苏,细胞生长良好,效价稳定。结论已获得抗SARS冠状病毒的单克隆抗体,为SARS的早期诊断及进一步研究奠定了基础。
- 张囡王志友张爱华金玉玲闭兰赵亚杰罗先凤
- 关键词:严重急性呼吸道综合征单克隆抗体
- 采用免疫沉淀研究人SARS免疫球蛋白的特异性反应性
- 目的研究人SAPS免疫球蛋白和单人份SARS恢复期病人血浆与SARS NS-1病毒株裂解产物和转染基因工程重组全长S、缺失S片段裂解产物的特异反应性。方法采用免疫沉淀方法对人SARS特免球蛋白以及10份SAILS恢复期病...
- 张爱华刘俊生闭兰张智赵亚杰李策生方志正杨晓明
- 文献传递