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CpG ODN佐剂序列IMB-AC5的体外免疫刺激活性分析被引量：1: 2017年; 目的对CpG ODN候选佐剂IMB-AC5进行体外免疫刺激活性分析。方法以目前国外进入临床研究的两种CpG ODN佐剂序列(Coley 7909和Dynavax ISS1018)为对照,采用~3H-TDR法检测IMB-AC5刺激人外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocytes,PBLs)的增殖活性;流式细胞术分析CD19+B活化细胞表面CD69表达水平;ELISA法检测刺激后GEN细胞产生的IL-6和IFNα水平。结果 3种CpG ODN佐剂均能明显刺激人PBLs的增生,IMB-AC5刺激增生能力优于Dynavax ISS1018,略低于Coley 7909;IMB-AC5活化CD19+B细胞表面CD69表达水平与Coley7909相似,Dynavax ISS1018活化效果略低于前二者;3种CpG ODN佐剂体外活化树突状细胞水平差异较大,且呈明显的剂量依赖,IMB-AC5的最佳活化浓度范围为0.15~1.5μmol/L,Coley 7909的最佳活化浓度范围为<0.25μmol/L,活化效果均优于Dynavax ISS1018。结论 IMB-AC5可作为有效的疫苗候选佐剂,且不低于国外同类佐剂的体外免疫刺激活性。; 赵玉娇蔡路奎王晓丹席珏敏陈俊英潘玥邱丽娟姜黎明孙强明; 关键词：CPG ODN 佐剂

DTacP-sIPV或DTacP-IPV/Hib基础免疫大鼠后加强免疫百白破联合疫苗Tdap的体液免疫评价被引量：1: 2021年; 目的观察组分无细胞百白破-Sabin株脊髓灰质炎联合疫苗(DTacP-sIPV)或无细胞百白破-灭活脊髓灰质炎-b型流感嗜血杆菌联合疫苗(DTacP-IPV/Hib)基础免疫大鼠后加强免疫破伤风类毒素、降低抗原含量的白喉毒素和无细胞百日咳联合疫苗(Tdap)是否产生免疫加强效果,为候选青少年及成人Tdap疫苗提供临床前研究参考。方法将自主研发的DTacP-sIPV和已上市的DTacP-IPV/Hib按0、1、2月3剂免疫程序分别免疫Wistar大鼠,检测免疫前和每剂次免疫后各组大鼠血清中各组分抗体水平。基础免疫完成10个月后,用候选Tdap加强免疫1次,并检测加强免疫前和免疫1个月、6个月后血清中各组分抗体水平。结果3剂次基础免疫1个月后,DTacP-sIPV组抗白喉类毒素(diphtheria toxoid,DT)、抗破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)、抗百日咳毒素(pertussis toxin,PT)、抗丝状血凝素(filamentous hemagglutinin,FHA)和抗百日咳黏附素(pertactin,PRN)抗体的几何平均滴度(GMT,Log2)分别为17.41、18.34、18.11、19.93、13.91,血清阳转率均达到100%;基础免疫10个月后,抗DT、抗TT、抗PT、抗FHA和抗PRN抗体的GMT分别下降至15.17、14.26、13.60、14.51、10.39,血清阳转率维持在89%以上。Tdap加强免疫1个月后,DTacP-sIPV组和DTacP-IPV/Hib组抗DT、抗TT、抗PT、抗FHA抗体的GMT分别为16.49和17.26、16.80和17.63、16.70和17.74、18.48和19.26,血清阳转率均达到100%,组间差异无统计学意义(P均>0.05);抗PRN抗体的GMT分别为13.07和11.00,血清阳转率为100%和88%,DTacP-sIPV组高于DTacP-IPV/Hib组(P<0.05)。Tdap加强免疫6个月后,DTacP-sIPV组和DTacP-IPV/Hib组抗DT、抗TT、抗PT、抗FHA和抗PRN抗体的GMT分别下降至15.74和14.87、15.07和15.14、14.84和15.73、16.62和16.37、11.44和9.96,血清阳转率维持在88%以上。结论候选疫苗Tdap在基础免疫接种DTacP-sIPV和DTacP-IPV/Hib的Wistar大鼠模型加强免疫中可诱导产生良好的体液免疫应答,但抗体滴度�; 蔡路奎李婧妍顾琴马艳高娜姬秋彦温嘉纳廖宏玮王虓宇姬光胡文著史荔孙明波梁疆莉; 关键词：TDAP 免疫

HPV16 L2肽段偶联AP205 VLP的原核表达及免疫原性分析被引量：1: 2012年; 目的:将编码HPV16衣壳蛋白L2的65～71、112～120免疫优势表位连接到RNA噬菌体衣壳蛋白AP205氮端,组装形成病毒样颗粒,通过在大肠杆菌中实现表达及纯化,对其免疫原性进行研究。方法:合成编码AP205衣壳蛋白基因和HPV16 L2的65～71、112～120位氨基酸表位的基因序列,PCR连接并克隆至pET30a(+)原核表达载体,构建重组表达质粒pET30-AP205-HPV16ΔL2,转化大肠杆菌BL21(DH3)感受态细胞,IPTG诱导表达。表达蛋白经凝胶层析纯化及SDS-PAGE、Western blot等理化性质检测,免疫接种ICR小鼠,通过间接ELISA法检测其免疫原性。结果:成功构建重组表达质粒,重组蛋白在大肠杆菌中以可溶性表达,透射电镜观察可见典型病毒样颗粒,该VLP在动物实验中表现出较好的免疫原性。结论:成功将HPV16 L2表位偶联AP205以形成VLP,在大肠杆菌中实现可溶性表达。; 姜博毕研伟张营营蔡路奎姬秋彦李智华徐维明; 关键词：人乳头瘤状病毒

云南西双版纳百日咳博德特氏菌分离株抗原基因特征分析: 2023年; 目的比对云南省西双版纳地区新的百日咳临床分离株与疫苗株及其他地区流行的百日咳博德特氏菌基因特征,为百日咳的防控提供科学依据。方法对2019年10—12月从云南省西双版纳州人民医院采集的4株百日咳临床分离流行株进行全基因组测序,利用MegAlign 7.1.0软件确定分离株的ptxP、ptxA、prn、fim3基因型,并与我国无细胞百日咳疫苗株CS株以及NCBI数据库中公开的其他国家和地区流行的百日咳博德特氏菌ptxP、ptxA、prn、fim3抗原基因特征进行对比分析;使用RAxML软件基于对28株百日咳博德特氏菌全基因组SNP构建系统发育树。结果云南西双版纳4株百日咳临床分离株BP-L1、BP-L2、BP-L3、BP-L4基因组比CS株多产生了33~36个插入序列引起的基因重排。4株百日咳临床分离流行株的ptxP、ptxA、prn、fim3基因序列与CS株相似度在99.2%~100%。系统发育树结果显示,CS株与参考株TohamaⅠ聚为1支,形成独立进化分支;近年来全球流行的百日咳博德特氏菌分成2个聚类,BP-L1、BP-L4与多数欧美国家百日咳博德特氏菌聚为1支,主要为ptxP3/ptxA1/prn2型菌株,BP-L2、BP-L3与亚洲国家和地区的流行的百日咳博德特氏菌聚为1支,主要是ptxP1/ptxA1/prn1型菌株。结论云南西双版纳临床分离株与疫苗株相比,主要毒力蛋白基因和进化分支发生了明显变化,与近年来国际流行的百日咳博德特氏菌遗传进化一致。; 张梦瑶何美燕左伟伦何燕琴蔡路奎温嘉纳杨玲廖宏玮梁疆莉; 关键词：临床分离株疫苗株

一种白喉杆菌的培养基组合及白喉类毒素的制备方法: 本发明涉及一种白喉杆菌的培养基组合及白喉类毒素的制备方法，属于微生物培养技术领域，培养基组合包括复苏培养基、传代培养基、产毒培养基以及Ⅰ号生长液、Ⅱ号生长液；白喉类毒素的制备方法包括复苏培养、传二代培养、传三代培养、产毒...; 温嘉纳杨净思王虓宇梁疆莉廖宏玮姬光高娜顾琴蔡路奎马艳胡文著赵婷

百日咳鼻内疫苗研究进展: 2023年; 百日咳是由百日咳鲍特菌感染引起的高度传染性疾病。尽管疫苗接种覆盖率很高,百日咳仍对全世界婴幼儿造成致命威胁。现有疫苗提供的低效保护是百日咳防控效果不理想的重要原因。百日咳鲍特菌感染仅限于呼吸道,保护呼吸道黏膜有助于更好地控制百日咳。近年来,多种百日咳鼻内疫苗已被开发用于临床前或临床试验研究,包括百日咳减毒活疫苗、含黏膜佐剂的无细胞百日咳疫苗、全细胞百日咳疫苗、百日咳外膜囊泡疫苗等。本文总结了黏膜免疫在预防百日咳鲍特菌感染中的作用和基于鼻腔黏膜免疫的百日咳疫苗研究进展。; 黄卫蔡路奎杨净思; 关键词：百日咳百日咳疫苗黏膜免疫

肠道病毒71型灭活疫苗(人二倍体细胞)原液质量分析: 目的：按照疫苗生产工艺的最简化原则，我们从多个方面进行了肠道病毒71型灭活疫苗(人二倍体细胞)详细的技术工艺的探索研究。方法：利用纯化疫苗SDS-PAGE胶各条带质谱分析，系统分析不同的纯化工艺于对肠道病毒71型灭活疫苗...; 董承红蔡路奎纳锐雄赵红玲杨丽仙杨槐彭正华杨增福夏龙辉于丽; 关键词：疫苗肠道病毒71

A群脑膜炎球菌多糖-白喉毒素无毒变异体CRM197结合物的制备及其初步评价被引量：1: 2012年; 目的制备A群膜炎球菌多糖(Group A meningococcal polysaccharide,GAMP)-白喉毒素无毒变异体CRM197(Cross-reactive material 197)结合物,并分析其理化性质及免疫学特性。方法白喉棒状杆菌C7 M1菌株经发酵培养表达CRM197,表达产物经DEAE-4FF层析柱进行纯化,纯化产物经SDS-PAGE及Western blot鉴定。用溴化氰(CNBr)活化GAMP,己二酰肼(ADH)为连接剂,在碳二亚胺(EDAC)催化下将GAMP与CRM197共价结合,制备GAMP-ADH-CRM197结合物,经Sepharose 4FF层析柱纯化后,进行各项生化检测,采用免疫双扩散检测结合物的抗原性,将结合物皮下注射ICR小鼠,间接ELISA法检测小鼠血清中抗GAMP的抗体滴度,分析其免疫原性。结果发酵培养20 h时,菌液上清中的CRM197蛋白表达量最高;CRM197以分泌形式表达,纯化后纯度达95%以上,可与白喉类毒素单抗发生特异性反应;GAMP-ADH-CRM197结合物各项生化指标均符合《中国药典》三部(2010版)要求,与A群流脑诊断血清形成明显的沉淀线,结合物诱生的多糖特异性抗体滴度显著高于多糖组和混合物组。结论成功制备了GAMP-ADH-CRM197结合物,其具有良好的抗原性和免疫原性,为以CRM197为蛋白载体制备脑膜炎球菌结合疫苗奠定了基础。; 张营营蔡路奎姜博毕研伟高丹丹闫铃梅姬秋彦李智华徐维明; 关键词：A群脑膜炎球菌多糖白喉毒素变异体结合物载体蛋白

2004-2019年我国百日咳报告病例流行病学特征分析被引量：24: 2021年; 目的分析2004-2019年我国(未包括香港特别行政区、澳门特别行政区和台湾省)百日咳流行病学特征,为完善百日咳监测体系和修订免疫策略提供数据支持。方法通过国家人口与健康科学数据共享服务平台和国家卫生健康委员会疾病预防控制局收集2004-2019年我国百日咳报告发病数据,并对数据进行描述性流行病学分析。结果2004-2019年我国共报告百日咳病例104276例,年均发病率为0.48/10万;发病数(发病率)从2004年的4705例(0.36/10万)降至2009年的1612例(0.12/10万),然后上升至2019年的30027例(2.15/10万);每年4-9月为发病高峰期,占全年发病55.50%~70.08%。2004-2017年报告发病数中,山东、新疆、四川、河北和陕西发病数占55.87%;<1岁、1岁、2岁、3岁、4岁、5~9岁和≥10岁的发病数分别占53.43%、13.10%、7.46%、5.95%、4.70%、11.86%和3.50%。结论2004-2019年我国百日咳发病呈先降后升的趋势性变化,建议从国家层面完善百日咳监测体系,并对免疫水平下降或婴幼儿接触的高危人群加强免疫。; 蔡路奎李婧妍姬秋彦王亚芳孙明波梁疆莉; 关键词：百日咳流行病学特征免疫策略

一种成人青少年用无细胞百白破联合疫苗及其制备方法: 本发明属于疫苗制备技术领域，本发明提供了一种成人青少年用无细胞百白破联合疫苗及其制备方法。本发明提供的联合疫苗以0.85～0.95wt％浓度的氯化钠溶液为溶剂，包括如下浓度的组分：百日咳毒素10～20μg/mL，百日咳丝...; 梁疆莉孙明波马艳顾琴蔡路奎李婧妍姬秋彦姬光高娜王虓宇廖宏玮胡文著温嘉纳

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蔡路奎

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