蔡峻
- 作品数：53 被引量：166H指数：8
- 供职机构：南开大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学化学工程文化科学更多>>
- 几丁质结合蛋白Bt‑CBP及其编码基因和制备方法与应用
- 本发明涉及一种几丁质结合蛋白Bt‑CBP及其编码基因和制备方法与应用,属于基因工程技术领域。本发明首次从一株苏云金芽胞杆菌中克隆出几丁质结合蛋白的编码基因,通过构建原核表达载体，在大肠杆菌中表达了该基因，获得了具有高活性...
- 蔡峻张娜李蓬飞陈月华
- 文献传递
- 苏云金芽胞杆菌几丁质酶表达调控
- 李丽娜姜昆陈月华蔡峻
- 缺失突变的chiB启动子及其组成型表达蛋白的应用
- 一种缺失突变的几丁质酶编码基因chiB启动子及其组成型表达蛋白的应用。本发明首先提供了一种DNA定向分子育种方法，经所述的方法进行DNA操作后获得的缺失突变的几丁质酶编码基因chiB启动子序列——chiBp△135，如序...
- 陈月华罗洋谢池楚李蓬飞蔡峻
- 文献传递
- 苏云金芽胞杆菌几丁质酶的表达调控
- 苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis(简称Bt)除了能够形成杀虫晶体蛋白外,也普遍产生几丁质酶.该酶不但可以增效Bt的杀虫活性,还能有效抑制真菌的生长.研究发现多数Bt菌株的几丁质酶能够组成型表达,...
- 曹张磊姜昆谢池楚李丽娜潘锦华蔡峻
- 关键词：苏云金芽胞杆菌几丁质酶生物合成基因调控
- 一种苏云金芽胞杆菌营养期强启动子Prsi及其应用
- 一种苏云金芽胞杆菌营养期强启动子Prsi及其应用。本发明发现了一个在苏云金芽胞杆菌营养期工作的强启动子Prsi，具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列，其核心位点如图1所示。本发明发现的启动子为组成型强启动子，该启动...
- 蔡峻张艳丽严冰
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- 几丁质酶在苏云金芽孢杆菌中的分布及抑小麦赤霉菌菌株的筛选被引量：8
- 2007年
- 利用几丁质平板法和几丁质酶基因特异引物 PCR 两种方法,对本室保藏的995株苏云金芽孢杆菌的几丁质酶及其基因进行了检测.结果显示所有被检测的菌株都可以在几丁质为唯一碳源的平板上生长.其中93.0%的菌株 PCR 检测阳性,54.1%的菌株可产生明显的水解圈.证明苏云金芽孢杆菌中几丁质酶普遍存在.通过研究发现 Bt 几丁质酶活力高低与其血清型及杀虫晶体蛋白基因的类型无相关性.同时对286个菌株进行了抑小麦赤霉菌实验,筛选出19株抑真菌效果较好的苏云金芽孢杆菌.
- 卢伟赵秋敏陈艳玲韩苗苗蔡峻陈月华
- 关键词：苏云金芽孢杆菌
- 特异氨基酸位点对Vip3Aa18杀虫功能的影响
- 以本实验室提交到GenBank的vip3Aa18基因及其构建菌株为实验材料,运用生物信息学软件分析了Vip3Aa18蛋白的二硫键位点、蛋白酶水解位点、结构域等位点和功能区。预测结果显示,Vip3Aa18蛋白的第292位和...
- 袁宇滑东辉陈月华蔡峻
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- 一株抑真菌、对甜菜夜蛾高效的苏云金芽胞杆菌菌株被引量：3
- 2008年
- 为了扩大苏云金芽胞杆菌的杀虫谱及生防范围,通过抑真菌和杀虫生物活性测定,筛选到一株抑真菌并对甜菜夜蛾高效的菌株Bt519-1。此菌株对所测试的小麦赤霉、黄瓜灰霉等8种真菌都有不同程度的抑制作用,且完全抑制这些真菌孢子的萌发。通过室内生物测定发现该菌株对甜菜夜蛾具有很高的杀虫活性,半致死浓度(LC50)仅为5.5μg/mL。经特异引物检测,证明该菌株含有6种杀虫蛋白基因:cry1Aa、cry1Ab、cry1Ac、cry1I、cry2和vip3A。经SDS-PAGE分析,Bt519-1菌株分别产生分子量大约为135 kD～130 kD、95 kD、80 kD、70 kD和65 kD～60 kD的几种杀虫晶体蛋白。在有无几丁质的培养基中都能产生较高活性的几丁质酶。试验证明苏云金芽胞杆菌Bt519-1是一株既杀虫又拮抗真菌的多功能生防菌株。
- 韩苗苗肖亮蔡峻谢池楚陈月华
- 关键词：苏云金芽胞杆菌拮抗甜菜夜蛾棉铃虫
- B.t.c. cry1C全长基因的克隆及其在增产菌中的表达被引量：2
- 2004年
- 设计的一对引物 ,对苏云金芽孢杆菌科默尔亚种 (Bacillusthuringiensissubsp .colmeri)1 5A3菌株中的cry1C基因进行PCR扩增 ,得到包括结构基因 ,调节基因在内的全长为4 0kb的PCR产物。经两步克隆 ,将此基因连接至穿梭表达载体pHT31 5上 ,得到重组质粒pHT 1C。通过电转化将其导入一株增产菌蜡状芽孢杆菌 (Bacilluscereus) 95 0 9菌株 ,SDS PAGE检测到 1条 60kD左右的蛋白带 ,镜检观察到菱形晶体 ,生测结果表明 ,cry1C基因的导入使Bc95 0 9菌株获得了对甜菜夜蛾的杀虫活性。
- 陈月华李红秀王津红蔡峻任改新
- 关键词：增产菌杀虫活性
- 组成型表达chi基因的Bt工程菌株构建及其特性被引量：1
- 2014年
- 【目的】通过构建能够组成型高效表达几丁质酶的苏云金芽胞杆菌工程菌株,以提高其抑真菌活性。【方法】首先通过PCR扩增获得Bti75菌株chiB全长及系列缺失启动子片段,与本室构建的启动子探测型载体pCB连接,转化Bti75菌株,通过β-半乳糖苷酶活性检测及β-半乳糖苷酶mRNA的Real time-PCR检测,确定了一段长度为190 bp的组成型高效表达启动子。将这一启动子分别与Bti75自身几丁质酶基因chiA以及地衣芽胞杆菌(Bacillus licheniformis)的几丁质酶基因chiMY连接构建了组成型高效表达的工程菌株Bti75(pDA)和Bti75(pDM)。应用几丁质酶酶活检测、SDS-PAGE及酶谱分析检测了工程菌几丁质酶的表达情况。最后,通过检测工程菌发酵粗酶液对真菌孢子萌发和菌丝生长的影响,评估了工程菌对3种植物病原真菌的抗真菌活性。【结果】在没有诱导物存在的情况下,Bti75(pBPΔ7)菌株表达的β-半乳糖苷酶酶活和β-半乳糖苷酶mRNA的转录量分别是Bti75(pBP)菌株的7倍和2.5倍左右。在没有几丁质诱导的情况下,与野生株Bti75相比,工程菌株Bti75(pDA)和Bti75(pDM)的几丁质酶活性均提高了3.5倍左右。SDS-PAGE及酶谱分析证明目的几丁质酶在非诱导条件下达到组成型高效表达,抑真菌实验显示工程菌Bti75(pDA)和Bti75(pDM)抑制3种植物病原真菌的活性明显提高。【结论】发现190 bp的缺失启动子能够组成型高效表达不同来源的几丁质酶,无需诱导物的诱导,工程菌株就能展现良好的抗真菌能力。
- 李蓬飞罗洋谢池楚蔡峻边强陈月华
- 关键词：苏云金芽胞杆菌几丁质酶组成型表达
