胡永华
- 作品数:31 被引量:5H指数:1
- 供职机构:中国科学院海洋研究所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 一种细菌五型分泌蛋白及其构建方法和应用
- 本发明涉及分子生物学、基因工程及免疫学领域,具体的说是一种细菌五型分泌蛋白、其自我运输和表面展示功能在疫苗抗原表达及传递中的应用。具体为所述五型分泌蛋白具有序列表SEQ ID No.1中的碱基序列,其应用方法:以荧光假单...
- 孙黎胡永华
- 文献传递
- 迟缓爱得华氏菌溶菌蛋白NlpD的致病性研究(英文)
- 2013年
- 目的:以牙鲆为模式生物检测了迟缓爱得华氏菌一个潜在的毒力相关蛋白NlpD的生物学功能。方法:对NlpD蛋白序列进行分析,在大肠杆菌中进行了蛋白重组表达,并通过同源重组原理采用插入失活的方式构建了nlpD的突变型菌株TNlpD。结果:NlpD由316个氨基酸组成,与已知的细菌NlpD具有很高的同源性;生物信息学分析表明,NlpD包含两个结构域:N-端的细胞溶解酶结构域和C-端的肽酶结构域,在大肠杆菌中获得的重组蛋白具有溶菌活性;与野生型菌株相比,TNlpD的生长情况基本无变化,但对牙鲆的致死率以及在牙鲆组织内的扩散和增殖能力大幅下降,此外,TNlpD抵抗牙鲆巨噬细胞活性氧的杀伤能力也明显降低。结论:迟缓爱得华氏菌的NlpD具有溶菌活性,是一种毒力相关因子,在宿主体内扩散增殖、抑制巨噬细胞呼吸爆发等过程中发挥重要作用。
- 靳仁娉张晓华胡永华
- 关键词:毒力
- 一种哈氏弧菌DNA疫苗及其构建方法和应用
- 本发明涉及分子生物学及免疫学领域,具体的说是一种哈氏弧菌DNA疫苗及其构建和应用。其构建方法:利用真核表达载体pID2构建质粒pDV,将后者悬浮于PBS中即为哈氏弧菌DNA疫苗。本发明所得哈氏弧菌DNA疫苗应用简单,一次...
- 胡永华孙黎
- 文献传递
- 一种鳗弧菌减毒疫苗及其应用
- 本发明涉及疫苗学领域,具体的说是一种鳗弧菌减毒疫苗及其应用。减毒疫苗菌株为鳗弧菌C312在含逐渐升高浓度的利福平的培养基中培养,直至培养到培养基中利福平浓度为100ug/ml,所得转化菌株为减毒疫苗菌株C312RM。本发...
- 孙黎于兰萍胡永华
- 文献传递
- 一种大菱鲆CC趋化因子的应用
- 本发明涉及分子生物学领域,具体的说是一种大菱鲆CC趋化因子的应用。趋化因子可作为抗细菌或病毒感染的蛋白。应用方法:将纯化的重组趋化因子在PBS中稀释至200ug/ml,即为趋化因子稀释液;将趋化因子稀释液以0.1ml/每...
- 孙黎陈骋胡永华
- 文献传递
- 一种交叉保护疫苗
- 本发明涉及疫苗学领域,具体的说是一种针对迟缓爱德华氏菌和哈氏弧菌的交叉保护疫苗。交叉保护疫苗为质粒pAQ1重组转化入迟缓爱德华氏菌ATCC15947的重组菌株。所述交叉保护疫苗为迟缓爱德华氏菌和哈氏弧菌的交叉免疫保护疫苗...
- 孙黎胡永华
- 文献传递
- 一种肿大细胞病毒DNA疫苗
- 本发明涉及分子生物学及免疫学领域,具体的说是一种肿大细胞病毒DNA疫苗。以肿大细胞病毒RBIV-C1为模板,采用F1和R1为引物进行PCR扩增病毒基因ORF75,即得DNA疫苗质粒。本发明所得肿大细胞病毒DNA疫苗的免疫...
- 孙黎张健胡永华
- 文献传递
- 海水鱼类重要病原菌的致病机理与病害防控研究
- 孙黎胡永华张敏程爽焦绪栋
- 1、项目所属科技领域:水产养殖病害防治。2、主要科研内容包括三个方面:(1)筛选、鉴定鱼类重要病原菌迟缓爱德华氏菌、弧菌、荧光假单胞菌等的毒力相关因子,分析其与细菌致病性的关系;研究病原在感染过程中与宿主的相互作用,确定...
- 关键词:
- 关键词:水产养殖病害防治免疫防治
- 荧光假单胞菌TonB依赖型外膜受体P698的研究
- 2015年
- 目的:鱼类病原菌荧光假单胞菌是一种革兰氏阴性菌,在水产上可以引起多种经济鱼类的疾病,作为一种鱼类病原菌目前对其致病机理还知之甚少。本研究从鱼类病原菌荧光假单胞菌TSS中克隆得到了一个Ton B依赖型的外膜受体(命名为P698),分析了其与细菌致病性的关系,研究了P698作为亚单位疫苗的免疫保护效应。方法:通过序列分析、荧光定量PCR、基因敲除、体外蛋白重组等方法研究P698的蛋白结构、表达情况以及其与细菌毒力的联系和免疫原性。结果:研究发现P698具有Ton B依赖型外膜受体家族的典型结构。与正常培养条件相比,在缺铁条件下培养的TSS中p698基因的表达没有明显变化。通过插入失活获得p698缺失的突变株TSSP,生长分析发现跟野生株相比,突变株TSSP的生长能力有明显降低。在以大菱鲆为模型的活体侵染实验中发现,与野生株相比,突变株的体内侵染复制能力都有明显降低。为检测P698的免疫保护性,我们对P698进行了体外重组表达,获得了重组蛋白。用重组P698蛋白作亚单位疫苗免疫大菱鲆,在免疫后一个月的鱼体检测到了特异抗体的存在,并且受免疫鱼对于致死剂量的TSS攻毒表现出了显著的保护效应。结论:我们的研究结果表明P698与细菌的侵染有一定相关性,并且作为亚单位疫具有一定的免疫保护效应。
- 张书仁张璐龙昊胡永华
- 关键词:荧光假单胞菌侵染疫苗
- 哈氏弧菌外膜蛋白及其应用
- 本发明涉及疫苗学领域,具体的说是两种哈氏弧菌外膜蛋白及其应用。外膜蛋白为序列表SEQ ID No.1和No.2中的氨基酸序列所示。具体为以哈氏弧菌T4为模板,分别以173F/173R和214F/214R为引物分别PCR扩...
- 孙黎于兰萍孙铂光胡永华
- 文献传递