胡婷婷
- 作品数：7 被引量：8H指数：1
- 供职机构：广西大学更多>>
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- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 一种编码半胱氨酸脱羧酶的基因
- 本发明公开了来自碱性重金属污染土壤未培养微生物的一个新的脱羧酶基因。该基因是下列核苷酸序列之一：1)序列表中序列1的DNA序列；2)与序列表中序列1限定的DNA序列具有80％以上同源性的DNA序列。序列1的DNA从5’端...
- 武波蒋承建胡婷婷
- 文献传递
- 未培养细菌β—葡萄糖苷酶基因的克隆、表达及酶学性质的初步研究
- β-葡萄糖苷酶是纤维素酶系中的一种，是纤维素降解的限速酶。因此，通过构建基因工程菌以促进β-葡萄糖苷酶的表达，是实现纤维素高效降解的有用途径。
构建未培养细菌的宏基因组文库是新兴的筛选新型基因的有效方法。在本研...
- 胡婷婷
- 关键词：葡萄糖苷酶基因克隆酶学性质
- 文献传递
- 一种编码β－葡萄糖苷酶的基因
- 本发明提供了一种编码β－葡萄糖苷酶的基因，名称为Unbgl1B，它通过构建碱性污染土壤未培养微生物的宏基因组DNA文库和文库克隆的β－葡萄糖苷酶活性检测筛选法获得，是下列核苷酸序列之一：1)序列表中序列1的DNA序列及其...
- 武波胡婷婷蒋承建
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- 一种编码半胱氨酸脱羧酶的基因
- 本发明公开了来自碱性重金属污染土壤未培养微生物的一个新的脱羧酶基因。该基因是下列核苷酸序列之一：1)序列表中序列1的DNA序列；2)与序列表中序列1限定的DNA序列具有80％以上同源性的DNA序列。序列1的DNA从5’端...
- 武波蒋承建胡婷婷
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- 一种编码β-葡萄糖苷酶的基因
- 本发明提供了一种编码β-葡萄糖苷酶的基因，名称为Unbgl1B，它通过构建碱性污染土壤未培养微生物的宏基因组DNA文库和文库克隆的β-葡萄糖苷酶活性检测筛选法获得，是下列核苷酸序列之一：1)序列表中序列1的DNA序列及其...
- 武波胡婷婷蒋承建
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- 碱性土壤微生物基因的克隆和多样性分析被引量：8
- 2006年
- 从碱性土壤样品中直接抽提和分离宏基因组DNA,首先构建了包含5562个阳性克隆的碱性土壤16SrDNA文库,随机抽取9个克隆测序后构建的系统进化树表明了碱性土壤环境微生物种群基因的多样性。纯化土壤宏基因组DNA后采用EcoRⅠ酶部分酶切处理,我们又构建了以pGEM-3Zf(+)为载体的DNA部分文库AL01。AL01文库包含23650个克隆,随机插入载体的外源DNA片段平均大小为3.2kb左右,DNA文库的总容量为75.68Mb。建库效率为从每克环境样品中获得6000个左右的含随机外源DNA片段插入载体的克隆。采用酶活筛选策略,我们从AL01文库中筛选到一个编号为pGXAA2011的阳性克隆携带有一个完整的碱性蛋白酶基因。蛋白酶活性检测其酶活作用最佳温度为40℃,最适作用pH值为9.5。另外,我们还克隆和表达了一个新型-葡萄糖苷酶基因unglu01,该基因和现有数据库中的-葡萄糖苷酶基因没有任何DNA或者氨基酸水平的同源性。将unglu01基因的ORF与表达载体pETBlue-2连接后导入宿主菌株Tuner(DE3)pLacI中,该重组表达克隆在含柠檬酸高铁铵和七叶苷的LA平板上表现清晰的-葡萄糖苷酶活性,SDS-PAGE电泳可以检测到29kDa大小的目的蛋白。
- 胡婷婷蒋承建梁璇隆文杰武波
- 关键词：宏基因组文库未培养微生物碱性蛋白酶Β-葡萄糖苷酶
