盖永锋
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- 金鱼生长素Ⅰ基因的原核表达及其多克隆抗体制备被引量：1
- 2008年
- 鱼生长激素(Fish growth hormone,fGH)是鱼类脑垂体中分泌的促进生长的单一亚基的蛋白激素.它参与鱼的生长代谢,能够加速蛋白质合成和脂类降解等生理功能,具有增强食欲、提高饲料转化率的作用.用引入酶切位点BamHⅠ和NotⅠ的引物,以质粒pBluescript SK-gfGHⅠ为模板,PCR扩增获得了gfGHⅠ编码区序列,分别定向插入原核表达载体pET-28a中,构建了原核表达载体pET28a-gfGHⅠ,pET28a-gfGHⅠ转化大肠杆菌BL21(DE3),在1.0 mmol/L IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)诱导下,表达出融合蛋白(His)6 tag-gfGHⅠ,该蛋白分子量大约为26 ku;经MALDI-TOF-MS以及抗HIS抗体的Western blotting鉴定,该融合蛋白即为表达的目的蛋白;经超声破碎鉴定该蛋白为包涵体形式存在,用连续超声破碎的方法,回收该蛋白纯度可达85.1%,免疫小鼠,间接ELISA法检测抗体效价为1∶1 600.该抗体的获得为gf-GHⅠ基因在酵母和水稻中的异源表达及功能鉴定奠定了基础.
- 盖永锋张国广陈元婷陈亮
- 关键词：原核表达抗体制备
- 金鱼生长激素Ⅰ和人角质细胞生长因子异源表达的研究
- 本文主要从以下两分部分展开：
(1)鱼生长激素(Fish growth hormone，fGH)是鱼类脑垂体中分泌的促进生长的单一亚基的蛋白激素。它参与鱼的生长代谢，能够加速蛋白质合成和脂类降解等生理功能，具有...
- 盖永锋
- 关键词：生长激素角质细胞异源表达蛋白激素
- 文献传递
