王爱华
- 作品数：19 被引量：183H指数：7
- 供职机构：山东农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家水禽产业技术体系建设项目山东省科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 正交法整体优化差异显示反应体系被引量：8
- 2004年
- mRNA差异显示PCR(mRNAdifferentialdisplayPCR ,DDRT PCR)是分离差异表达基因的有效方法 ,但该方法的准确性极易受到外部因素和内部因素的影响。采用正交法优化DDRT PCR反应条件 ,充分考虑到模板浓度、锚定引物浓度、随机引物浓度、dNTPs浓度、镁离子浓度以及Taq酶用量等因素在差异显示反应过程中的交互作用 ,一次PCR反应即可确定最佳反应组合。将筛选出的条件用于DDRT PCR ,得到差显结果假阳性率低 ,重复性和稳定性好 ,而且简化了反应条件的优选程序 ,这表明正交法是优化差异显示反应条件的理想方法。为了进一步简化整个差异显示反应系统的操作程序 ,降低假阳性率 ,研究采用了非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 (polyacrylamidegelelectrophoresis,PAGE)和银染显示差异带的方法 ,并用反向Northern法来验证回收条带 。
- 柳淑芳杜立新朱靖王爱华李宏滨
- 关键词：DDRT-PCR银染
- 用RAPD技术筛选中国荷斯坦牛产奶量性状遗传标记
- 选用320条10碱基随机引物在由36头高产(305天产奶量>8500kg)和32头低产(305天产奶量<5600kg)中国荷斯坦牛所组成的两个DNA池间进行RAPD-PCR扩增,从中筛选出稳定性好、带型清晰且在两DNA池...
- 杜立新万海伟王爱华李宏滨
- 关键词：分子标记荷斯坦牛产奶量
- 文献传递
- 不同日龄雏鸭感染鸭坦布苏病毒后血清中免疫球蛋白及细胞因子的动态变化被引量：1
- 2016年
- 为研究雏鸭感染鸭坦布苏病毒(DTMUV)后血清中相关免疫指标的动态变化及其在不同日龄雏鸭中的差异性,本实验分别对5日龄、10日龄、25日龄雏鸭静脉接种DTMUV,并于接种后不同时间对雏鸭血清中的免疫球蛋白Ig A、Ig G、Ig M及细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ进行检测。结果显示,不同日龄雏鸭接种DTMUV后,血清中3种免疫球蛋白含量均显著高于对照组(p<0.05),表明体液免疫在抗DTMUV的感染中发挥了主要作用。5日龄雏鸭血清中IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ含量均较低;10日龄雏鸭血清中IL-2、IL-4、IL-6水平均不同程度升高,但IFN-γ含量仍低于对照组;25日龄雏鸭血清中IL-2、IL-4、IFN-γ含量在接种后一周内均显著高于对照组(p<0.05),IL-6含量则持续稳定在较高水平。综上所述,雏鸭接种DTMUV后细胞免疫受到了一定抑制,随着日龄的增长,DTMUV对雏鸭细胞免疫的抑制作用减弱,细胞免疫也逐渐在抗DTMUV的感染中发挥作用。
- 李秀丽程冰花陈浩路云建提金凤王爱华窦砚国牛晓宇于相龙刁有祥
- 关键词：雏鸭免疫球蛋白细胞因子
- 25株H9N2亚型禽流感病毒HA基因的遗传进化分析
- 引言 禽流感(Avian Influenza,AI)是由A型流感病毒(Avian Influenza Virus type A)中的任何一型引起的一种感染综合征.血凝素(Hemagglutinin,HA)蛋白和神经氨酸酶...
- 程冰花王爱华刁有祥李川川
- 鸡源减蛋综合征病毒SD01株对种鸭致病性的研究被引量：2
- 2015年
- 为研究鸡源减蛋综合征病毒(EDSV)对种鸭的致病性,本研究利用鸡源EDSV SD01株通过口腔途径人工感染实验种鸭,观察实验鸭产蛋量和病理组织学变化,采用血凝抑制试验和荧光定量PCR方法对实验鸭血清抗体滴度、组织器官中病毒载量及排毒规律进行检测。结果显示,实验鸭感染鸡源EDSV后有轻微的呼吸道症状,产蛋量下降,抗体滴度有明显升高趋势。病理组织学变化表现为肺脏、大脑、肾脏、脾脏、卵泡等器官出血以及淋巴细胞浸润,输卵管黏膜水肿、肝脏肿大,肝细胞脂肪变性。荧光定量PCR检测结果显示,不同组织病毒载量和感染持续时间不同,在实验期间,所检测的各组织中均有病毒存在;其中肝脏、输卵管中病毒载量明显高于其他组织器官,气管、肠道中病毒载量最低。以上结果表明鸡源EDSV SD01株对种鸭具有一定的致病性。
- 冯柳柳程冰花刁有祥赵立媛霍现格颜敏王爱华李秀丽路云建
- 关键词：减蛋综合征病毒种鸭
- 猪RYR1基因的检测及其对生产性能的遗传效应被引量：33
- 2001年
- 本研究以PCR RFLPs检测方法 ,分析了RYR1基因在山东省引进猪种及其杂交后代各群体中的分布。在纯种猪中 ,皮特兰猪的n基因的基因频率最高 (10 0 % ) ,其次为长白猪 (11 4 4% ) ,再次为约克夏猪 (6 68% ) ,杜洛克和汉普夏猪为 0 ;在杂种群体中 ,杜洛克×皮特兰猪最高 (5 0 % ) ,长白×约克夏猪为 10 62 % ,约克夏×长白猪为 7 86% ,约克夏×长白与长白×约克夏杂交所得的F2代为 1 31% ,杜洛克×汉普夏和汉普夏×杜洛克猪为 0。利用最小二乘模型分析了RYR1基因对生产性能的遗传效应 ,结果表明 :RYR1基因对 2 0日龄体重和 60日龄体重的影响不显著(P >0 0 5 ) ,但极显著提高日增重 (P <0 0 1)。RYR1基因可极显著地提高猪的胴体瘦肉率 ,降低猪肉的肉色评分 (P <0 0 1)。NN、Nn和nn 3种基因型对瘦肉率和肉色评分的最小二乘均值分别为 64 0 0 %、66 87%、67 87%和 2 73、2 5 7、2 0 2。在繁殖性状方面 ,RYR1基因对仔猪出生重影响不显著 (P >0 0 5 ) ,但显著降低繁殖母猪的产活仔数 (P <0 0 5 ) ,NN、Nn和nn 3种基因型对产活仔数的最小二乘均值分别为 11 16、10 0 0、8 2 6头。
- 杜立新王爱华姜运良张金花
- 关键词：RYR1基因
- 猪FSHβ亚基基因、ESR及ob基因分子遗传标记的检测方法被引量：16
- 2001年
- 本文对影响猪繁殖性能和产肉性能的雌激素受体 (ESR)基因、促卵泡素 (FSH) β亚基基因和ob基因的检测方法进行了研究 ,对不同基因型的PCR反应条件和程序进行了改进 ,建立了一次PCR反应同时检测这 3个基因分子遗传标记的方法 ,结果与分别对
- 杜立新柳淑芳姜运良王爱华
- 关键词：FSHΒ亚基基因ESR基因OB基因分子遗传标记
- 25株H9N2亚型禽流感病毒HA基因的遗传进化分析被引量：7
- 2016年
- 为了解山东省不同地区H9N2亚型禽流感病毒（AIV）的变异情况,本研究汇集了2012-2013年间从山东省不同地区发病家禽中分离到的25株H9N2亚型AIV,采用RT-PCR技术扩增其HA基因,并进行测序和遗传进化分析。结果显示,25株病毒HA基因的开放阅读框全长为1 683bp,共编码560个氨基酸,其核苷酸和氨基酸同源性分别为94.5%-100.0%和93.8%-100.0%;遗传进化分析表明25株病毒分离株均属于欧亚分支中的Y280-like亚分支;HA蛋白有7-9个潜在糖基化位点,其中218位糖基化位点缺失,145位新增糖基化位点;25株病毒分离株HA蛋白裂解位点均为RSSR↓GIF,符合低致病力AIV的特征。受体结合位点较保守,234位受体结合位点均为L（亮氨酸）,仅198位受体结合位点存在变异。分离的病毒株具有与人唾液酸α-2,6受体结合的特性,此类毒株的流行在公共卫生上值得重视。
- 程冰花王爱华刁有祥李川川张英张璐杨国平赵丹丹
- 关键词：H9N2亚型禽流感病毒HA基因遗传进化分析
- 猪选种中的新技术研究进展被引量：4
- 1998年
- 猪肉是人类主要的肉食来源，其生产历来受到人们的重视。现代动物遗传育种技术在推动猪肉生产向高产、优质方面发展中起了极其重要的作用。据统计：全世界养猪头数１９６３年为５３１亿头，１９９５年则增至９亿头，增加了６１％。在此期间瘦肉率提高了２０％。常规的选...
- 王爱华杜立新
- 关键词：选种
- 鸭胚成纤维细胞酵母双杂交cDNA文库的构建与鉴定被引量：3
- 2016年
- 为了解与坦布苏病毒（TMUV）E蛋白相互作用的宿主细胞蛋白,本试验制备鸭胚成纤维细胞（DEF）。采用Trizol法提取细胞总RNA,通过LD-PCR技术合成双链cDNA,经CHROMA SPIN TE-400column纯化后,与pGADT7载体连接,利用同源重组的方法克隆到Y187酵母感受态细胞,构建了鸭胚成纤维细胞的cDNA文库。结果显示：构建的文库滴度为3×107 CFU/mL,文库插入的双链cDNA片段为0.5~2.5kb,平均约为1.5kb,符合酵母双杂交筛选的要求。
- 程冰花路云建刁有祥王爱华李秀丽冯柳柳赵立媛颜敏霍现格
- 关键词：鸭胚成纤维细胞酵母双杂交CDNA文库
