王凤雪
- 作品数：102 被引量：279H指数：9
- 供职机构：中国农业科学院特产研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划吉林省科技发展计划基金科技部科研院所社会公益研究专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生经济管理更多>>
- 狐犬瘟热继发细菌感染的诊断及防治
- 2007年
- 通过对一送检病狐临床症状的调查,剖检病变和细菌学检查,并进行RT-PCR检测犬瘟热病毒,确诊该狐为犬瘟热继发大肠杆菌感染,通过疫苗注射和治疗细菌感染,较好地控制了该病。
- 罗国良田宏宇张海玲闫喜军邵西群王凤雪钟伟
- 关键词：犬瘟热反转录聚合酶链式反应
- 人参皂苷单体化合物在制备治疗黄病毒科病毒感染的药物中的用途
- 本发明公开了人参皂苷单体化合物在制备治疗黄病毒科病毒感染的药物中的用途，属于人参皂苷单体化合物的新医药用途领域。本发明从多种人参皂苷单体化合物中筛选出具有良好的抗牛病毒性腹泻病毒的人参皂苷单体化合物，这些化合物通过直接杀...
- 张淑琴谭斌金银萍程世鹏王凤雪郭靖王英平
- 文献传递
- 犬瘟热病毒临床流行野毒株F蛋白信号肽区分析被引量：2
- 2008年
- 根据GenBank上发表的犬瘟热病毒（CDV）融合蛋白基因（F）序列，设计引物扩增F蛋白部分信号肽区，片段长369bp。对2005年～2007年收集的犬瘟热阳性的水貂、狐、貉实质脏器、血液、尿液等样品进行扩增，获得了13个CDVF蛋白部分信号肽区基因片段。序列分析发现，CDV野毒F蛋白该区段核苷酸与氨基酸序列与目前我国使用疫苗株CDV，及其他国内外疫苗株比较存在较大差异，与CDV3对应区段的核苷酸同源性在80．7％～83．2％之间，而推导的对应氨基酸序列同源性只有64．8％～71．3％。部分信号肽区的氨基酸疏水性分析，推测其调控功能也发生变化，本研究为CDV遗传变异和分子流行病学提供理论数据。
- 王凤雪闫喜军柴秀丽吴威邵西群罗国良张海玲易立赵建军
- 关键词：犬瘟热病毒融合蛋白信号肽
- 犬副流感病毒血清抗体流行病学调查被引量：5
- 2007年
- 闫喜军夏咸柱柴秀丽田宏宇王凤雪邵西群
- 关键词：犬副流感病毒流行病学调查血凝抑制试验犬科动物副黏病毒
- 北极狐γ-干扰素cDNA的克隆、表达及活性测定被引量：2
- 2008年
- 为研究狐γ-干扰素的生物学活性,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)从北极狐外周血淋巴细胞中扩增出γ-干扰素(VuIFN-γ)cDNA。序列分析表明VuIFN-γcDNA全长501bp,编码23个氨基酸的信号肽和144个氨基酸的成熟肽蛋白,与已发表的银黑狐和犬IFN-γ核苷酸序列同源性为99.8%和99.4%;氨基酸同源性均为100%。应用原核表达系统高效表达北极狐γ-干扰素成熟肽蛋白,SDS-PAGE和Western blotting分析表达的融合蛋白分子量约为19kD,以不溶性的包涵体形式存在。重组蛋白经纯化和复性,在Vero和MDCK细胞上可明显抑制VSV病毒的复制,并测出北极狐重组γ-干扰素的活性单位分别为1.0×106u/mg和1.56×105u/mg,为进一步开发基因工程狐干扰素奠定基础。
- 张海玲柴秀丽罗国良王凤雪易立邵西群闫喜军
- 关键词：北极狐干扰素-Γ抗病毒活性
- 牛副流感病毒3型核衣壳蛋白基因的真核表达被引量：2
- 2012年
- 根据牛副流感病毒3型(BPIV-3)内蒙09株(NM09)全基因组序列(GenBank登录号:JQ063064)设计特异性引物,利用RT-PCR方法扩增出牛副流感病毒3型分离株的核衣壳蛋白(N)基因,通过NheI和NotI限制性内切酶位点亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/Zeo(+),获得真核重组质粒pcDNA3.1-N。采用Superfect转染试剂将重组质粒转染至BSR细胞中,转染后的BSR细胞经间接免疫荧光试验和RT-PCR方法检测,重组质粒pcDNA3.1-N在BSR细胞中能正确表达N蛋白。本研究结果为BPIV-3新型疫苗的研制奠定基础。
- 师新川温永俊王凤雪王炜王建科程世鹏武华
- 关键词：真核表达N基因
- 狂犬病病毒感染小鼠原代神经元细胞模型的建立被引量：1
- 2019年
- 为了探究狂犬病病毒致神经系统症状的分子机制,本研究首先成功建立了高纯度胎鼠脑原代神经元细胞培养体系,进而通过使用实验室弱毒株SAD与固定毒株CVS11两种不同毒力的狂犬病病毒分别感染原代神经元细胞,评估这两种病毒在原代神经元细胞的最佳感染条件与病毒生长特性,建立不同毒力狂犬病病毒感染原代神经元细胞模型。在此基础上,通过Western blot技术检测狂犬病病毒糖蛋白、核蛋白以及神经囊泡循环的相关蛋白表达变化情况,结果显示固定毒株CVS11感染神经元细胞导致VAMP2蛋白表达量减少。本研究为进一步研究狂犬病病毒感染宿主致神经系统症状的机制奠定了研究基础。
- 尹坤马子鹏李伊铭孙雨茗王昊乌东高娃孙娜程世鹏王凤雪温永俊
- 关键词：狂犬病病毒
- 表达PRRSV强弱毒Nsp2的Marc-145细胞系的建立及Nsp2蛋白对PRRSV复制的影响被引量：2
- 2012年
- 为探讨Nsp2蛋白对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)复制的影响,采用体外克隆法构建表达高致病性PRRSV TJ株和其致弱毒TJM株Nsp2基因的真核表达质粒pEGFP-TJ Nsp2和pEGFP-TJMNsp2,含有增强式绿色荧光蛋白表达盒,瞬时转染重组质粒到Marc-145细胞系单层,利用G418抗性筛选建立细胞系,通过PCR和RT-PCR鉴定。PRRSV感染筛选的细胞系,检测病毒TCID50。结果建立稳定表达TJ株和TJM株Nsp2基因的猴肾细胞系Marc-145-TJ Nsp2和Marc-145-TJM Nsp2;在表达PRRSV TJ株和TJM株Nsp2蛋白的Marc-145细胞上感染PRRSV病毒,在复制早期病毒时增殖速度快,即Nsp2蛋白对PRRSV复制早期有正向调控作用,并且强毒的Nsp2此作用更明显。
- 王凤雪刘准温永俊冷雪李真光武华
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞系
- PRRSV非结构蛋白2:病毒致病性、免疫和诊断中的一个关键蛋白
- PRRS引起猪繁殖与呼吸系统疾病,是给养猪业带来重要经济损失的猪病.猪繁殖与呼吸系统综合征病毒(PRRSV)的复制酶非结构蛋白2(Nsp2)被认为是PRRSV基因组中最易变区域.本综述讨论了PRRSV Nsp2的分子生物...
- 王凤雪宋妮陈立志程世鹏武华温永俊
- CELO病毒载体在人类和动物疾病控制上的应用
- 2005年
- CELO病毒的DNA长43.8kb,具有末端倒转重复序列(ITR),基因结构与人腺病毒的比较,无可识别的E1、E3和E4区,但存在可替代的新读码框。2个fiber基因是病毒毒力基因,表达2个不同的蛋白,在病毒复制扩散中起作用,缺失fiber1导致柯萨奇病毒和腺病毒受体(CAR)的特异性转导作用消失,使CELO病毒只能感染禽类细胞,不能感染哺乳类动物细胞。在基因组的某些区段可以删除并插入外源基因不影响病毒复制。CELO病毒及其载体可在廉价的鸡胚中得到大量复制。CELO病毒的这些特性为其发展成新型基因工程栽体提供了条件。插入表达外源基因制备疫苗成为可能,新型的无病毒基因的载体也可以应用ITR及一些调控元件、包装信号共同构建形成。CELO病毒与人腺病毒属于同一属,CELO病毒作为基因工程载体有同样的特性,并且具有种属特异性和安全性,在动物基因工程疫苗的研制方面有特殊而广阔的研究和应用前景。
- 王凤雪王云峰
- 关键词：疾病控制禽腺病毒基因组结构基因治疗
