王军毅 作品数:46 被引量:214 H指数:8 供职机构: 浙江省淡水水产研究所 更多>> 发文基金: 国家科技部农业科技成果转化资金 浙江省重大科技专项基金 公益性行业(农业)科研专项 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 经济管理 更多>>
室内水泥池培育黄颡鱼夏花鱼种技术与经济效益分析 被引量:4 2012年 经2005年到2008年连续四年的生产实践,证明用室内水泥池培育黄颡鱼苗到夏花鱼种是切实可行的;文中选取了较有代表性的四批次鱼苗培育结果进行总结分析。 杨浩 杨国梁 王军毅 张宇飞 杨华斌 高强关键词:水泥池培育 夏花鱼种 黄颡鱼 鱼苗培育 piggyBac转座子介导的转基因叉尾斗鱼的构建 被引量:2 2012年 为探讨piggyBac转座子在鱼类动物中应用的可能性,以包含家蚕(Bombyx mori)肌动蛋白3启动子驱动的增强型绿色荧光蛋白(enhance green fluorescent protein,EGFP)基因的piggyBac质粒为载体,以及一个包含piggyBac转座酶的辅助质粒,采用显微注射的方法将其导入叉尾斗鱼(Macropodusopercularis)受精卵中,利用PCR技术证实了piggyBac转座子能够介导EGFP基因进入叉尾斗鱼基因组,并能够稳定遗传到下一代,符合孟德尔遗传规律。EGFP基因遗传到G1代的阳性鱼占交配鱼比率,即外源基因整合率为12.30%。实验证明,piggyBac质粒有可能成为水产动物转基因实验的新型载体。 高强 杨国梁 钟伯雄 王军毅 陈雪峰 危浩 庄兰芳 叶少群 杨浩关键词:叉尾斗鱼 PIGGYBAC转座子 转基因鱼 显微注射 罗氏沼虾选育新品种──“南太湖2号”与非选育群体生长性能的比较 被引量:18 2012年 采用不同颜色荧光标记方法对罗氏沼虾Macrobrachium rosenbergii选育新品种──"南太湖2号"与非选育群体的生长性能进行了比较,试验共进行103 d。结果表明:"南太湖2号"两个选育群体间的生长性能及相对成活率差异不显著(P>0.05);"南太湖2号"选育群体的特定生长率、肥满度和肌肉中RNA/DNA值(3.86%/d、3.08、2.98)均显著高于非选育群体(3.55%/d、2.51、1.58)(P<0.05);选育群体的相对增重率比非选育群体快36.87%;选育群体的相对成活率比非选育群提高7.76%。研究表明,应用数量遗传学方法选育的罗氏沼虾"南太湖2号"的生长性能要明显优于非选育群体。 高强 栾生 杨国梁 王军毅 孔杰 胡红浪 张宇飞 陈雪峰 罗坤 叶少群关键词:罗氏沼虾 长三角地区罗氏沼虾成虾主要疾病的病原研究 被引量:5 2012年 2009年8月—2010年8月在长三角地区开展了罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)成虾主要疾病的流行病学调查。结果显示:所采集病样按其症状分为肌肉白浊病(以上海和浙江病样为主)、蓝体病(以江苏病样为主)、红体病(以浙江病样为主)三类。从采集的罗氏沼虾病样中分离到优势细菌11株,人工感染健康罗氏沼虾,筛选出3株主要致病菌,分别命名为SHB1,GYB8,HZL2。经形态学、生理生化特性及16 S rRNA鉴定,确定3株主要致病菌依次为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila),费氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)、普通变形杆菌(Proteus vulgaris)。常规药物敏感性试验表明,3种主要致病菌以及其它分离株细菌对环丙沙星和恩诺沙星高度敏感。 徐洋 沈锦玉 姚嘉赟 潘晓艺 郝贵杰 尹文林 杨国梁 王军毅关键词:敏感药物 罗氏沼虾野田村病毒NASBA-LFD检测方法及其检测试剂盒 本发明公开了一种罗氏沼虾野田村病毒NASBA-LFD检测方法及其检测试剂盒。本发明是根据GenBank上公布的罗氏沼虾野田村病毒(MrNV)序列,筛选保守区域设计了MrNV NASBA-LFD反应体系所需的引物与探针;采... 林锋 沈锦玉 刘莉 钱冬 曹铮 王军毅 郝贵杰 盛鹏程 袁雪梅 吴颖蕾罗氏沼虾野田村病毒和双顺反子病毒双重RT-PCR检测方法与序列分析 被引量:7 2012年 罗氏沼虾野田村病毒(Macrobrachium rosenbergii nodavirus,MrNV)和双顺反子病毒(M.rosenbergii dicistrovirus,MrDV)是已报道对罗氏沼虾易感的主要致病性病毒,该研究通过建立双重RT-PCR方法对MrDV和MrNV两种病毒同时进行检测。根据MrDV和MrNV基因组序列的保守区分别设计特异性引物,并对双重PCR的退火温度和引物浓度进行优化,在获得优化反应体系和反应条件后,对罗氏沼虾样品进行检测。结果表明,双重PCR最佳退火温度为60℃,反应体系最佳引物终浓度MrNV384为0.1μmol/L,MrDV472为0.05μmol/L,对病样总RNA的最低检测限为360fg。引物的特异性检测表明,该检测方法对TSV、WSSV、IHHNV和嗜水气单胞菌TPS-30基因组无交叉反应。对阳性样品的病毒扩增序列分析表明,MrDV RNA依赖性RNA聚合酶编码区序列无变异,MrNV-RNA2序列存在较多变异,进化树结果表明2011年长三角的MrNV病毒主要来自于中国基因型和东南亚基因型。该方法的建立为罗氏沼虾病毒性疾病的预防和种苗的繁育奠定了基础。 潘晓艺 刘杜鹃 沈锦玉 张宇飞 蔺凌云 王军毅 郝贵杰 姚嘉赟 徐洋 袁雪梅关键词:罗氏沼虾 双重RT-PCR 人工养殖与选育对罗氏沼虾遗传多样性的影响 被引量:22 2012年 为探讨人工养殖与选择育种对罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)遗传多样性的影响,实验测定了孟加拉野生群体、缅甸野生群体、浙江养殖群体、广西养殖群体及选育群体"南太湖2号"共111只罗氏沼虾核糖体转录间隔区2(Internal transcribed spacer 2,ITS2)基因序列,结果发现58个碱基变异位点,定义56个单倍型。在5个群体中,孟加拉野生群体的遗传多样性最高(平均核苷酸差异数K和核苷酸多态性指数Pi分别为7.186和0.0155),依次为缅甸野生群体、浙江养殖群体、广西养殖群体,选育群体"南太湖2号"遗传多样性最低(K和Pi分别为3.032和0.0065)。5个群体间配对Fst分析表明,养殖群体与野生群体遗传分化显著(P<0.01),选育群体"南太湖2号"不仅与野生群体遗传分化显著,同时还与广西养殖群体产生了显著的遗传分化(P<0.01)。系统树显示,孟加拉野生群体和缅甸野生群体聚为一支,浙江养殖群体、广西养殖群体和选育群体"南太湖2号"则聚为另一支。研究结果表明,人工养殖和选育降低了罗氏沼虾的遗传多样性水平,并导致群体间发生了显著的遗传分化。 陈雪峰 杨国梁 孔杰 栾生 张宇飞 王军毅 高强 罗坤 宫金华 叶少群关键词:罗氏沼虾 遗传分化 罗氏沼虾气单胞菌MrM0602株的分离和致病性研究 被引量:4 2008年 从濒死的罗氏沼虾体内分离到菌株M rM0602,经形态学观察及API 20E鉴定系统鉴定为嗜水气单胞菌。人工感染健康罗氏沼虾,100%致死剂量为1.0×104cfu/m l,半致死剂量(LD50)为3.16×103cfu/m l。测定菌株M rM0602的胞外产物对小鼠和新西兰大白兔红细胞的溶血活性,表明胞外产物对小鼠红细胞有微弱的溶血活性,对新西兰兔红细胞无溶血活性。胞外蛋白酶活力测定显示,菌株M rM0602胞外产物具有很高的蛋白酶活力,且耐热性很强,65℃仍保持较高活性。常规药物敏感性试验表明,菌株M rM0602对环丙沙星和恩诺沙星高度敏感。 张友平 王军毅 刘问 钱冬关键词:罗氏沼虾 气单胞菌 胞外产物 重楼杀灭罗氏沼虾寄生纤毛虫的初步研究 利用系统溶剂极性法提取重楼,制备粗提物,以寄生罗氏沼虾上的纤毛虫(聚缩虫和靴纤虫)为指示寄生虫,进行杀灭罗氏沼虾寄生纤毛虫的药效活性追踪试验,初步确定重楼杀灭纤毛虫的活性部位,并对活性部位进行安全性评价.实验结果表明:不... 姚嘉赟 沈锦玉 杨国梁 王军毅 尹文林 徐洋关键词:重楼 纤毛虫 罗氏沼虾 活性部位 罗氏沼虾缅甸野生原种rDNA-ITS区序列特征 被引量:4 2011年 对罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)全序列特征进行了分析。罗氏沼虾ITS1长度为1 070~1 150 bp,GC含量为51.4%~52.7%;5.8S长度一致为163bp,GC含量为55.2%;ITS2长度为484~545 bp,GC含量为53.4%~54.6%。序列比对显示,ITS1存在61处SNPs,其中C/T转换为28处(占45.9%),A/G转换为23处(占37.7%),A/T颠换为1处(占1.6%),T/G颠换为3处(占4.9%),C/G颠换为4处(占6.6%),A/C颠换为2处(占3.3%);ITS2存在15处SNPs,其中C/T转换为6处(占40%),A/G转换为5处(占33.3%),A/T颠换为1处(占6.7%),T/G颠换为2处(占13.3%),C/G颠换为1处(占6.7%)。整个ITS中微卫星序列(SSR)共有20处,其中ITS1中有14处,以(AG)n类型最多;ITS2中有6处,以(GA)n类型最多。人工查找结果发现,罗氏沼虾ITS1在181、390和781位点存在3处59 bp正向重复单元。个体内差异分析表明,罗氏沼虾ITS由于SSR重复数不同,而存在个体内差异。同源性分析表明,罗氏沼虾ITS1与海南沼虾(M.hainanense)同源性最高,为50.64%,而与脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)同源性最低,为45.39%;5.8S与其他甲壳动物有着极高的同源性,其中与日本沼虾(M.nipponense)同源性达到100%;ITS2与日本沼虾同源性最高,为53.46%,而与克氏原螯虾(Procambarus clark)的同源性最低,为42.53%。基于ITS构建的NJ树显示,罗氏沼虾与同属的日本沼虾聚为一支,与传统分类相符。 陈雪峰 杨国梁 王军毅 高强 宫金华 叶少群 张海鹏关键词:罗氏沼虾 内转录间隔区