- 重组半胱氨酸脱巯基酶AtLCD的表达、纯化及酶学性质被引量：1
- 2013年
- 目的:在重组大肠杆菌中表达重组拟南芥L-半胱氨酸脱巯基酶AtLCD(H2S内源产生关键酶),确定最佳诱导表达和纯化条件,并研究重组酶的酶学性质。方法:对大肠杆菌BL21(DE3)/pET28a-LCD进行异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导培养,将纯化的目的蛋白AtLCD进行酶学性质的研究。结果:重组蛋白的最佳诱导表达条件为0.1 mmol/L IPTG,30℃诱导3 h。500mmol/L的咪唑洗脱Ni柱可得较纯的目的蛋白。重组酶性质研究结果表明,酶的最适pH为9.5,最适作用温度为37℃,最适条件下的以L-Cys为底物的米氏常数(Km)为1.572 mmol/L,Vmax为1.52 nmol/mg·min。金属离子Mg2+,Fe3+和EDTA对重组酶的活性有一定的抑制作用,Ba2+、Ca2+和Co2+在一定程度上提高了酶的活性,其中Co2+效果更强。蛋白变性剂SDS和酶抑制剂羟胺也不同程度地抑制了酶的活性。结论:明确了重组AtLCD的酶学性质和最佳诱导表达及纯化条件,为该LCD的深入研究和气体信号分子H2S在植物应答逆境胁迫机制的研究奠定了基础。
- 袁慧虹梁雅丽沈洁洁张丽萍刘志强裴雁曦
- 关键词：硫化氢酶学性质
- AtLCD和AtDCD可增强大肠杆菌对Cd~/(2+/)的耐受性
- 硫化氢/(H2S/)是继一氧化碳/(CO/)和一氧化氮/(NO/)后发现的第三种气体信号分子,在动物中与后二者具有相似的作用,能调节动物体内重要的生理功能。在植物中这一分子的作用也逐渐被认识,但是关于植物体内产生H2S的...
- 沈洁洁
- 关键词：硫化氢镉胁迫
- 文献传递
- AtLCD和AtDCD可增强大肠杆菌对Cd<sup>2+</sup>的耐受性
- 硫化氢(H2S)是继一氧化碳(CO)和一氧化氮(NO)后发现的第三种气体信号分子,在动物中与后二者具有相似的作用,能调节动物体内重要的生理功能。在植物中这一分子的作用也逐渐被认识,但是关于植物体内产生H2S的关键酶基因的...
- 沈洁洁
- 关键词：硫化氢镉胁迫
- 一种植物抗蒸腾剂及其使用方法
- 本发明提供了一种植物抗蒸腾剂，其是浓度为10-500μmol/L的硫氢化钠水溶液。使用时现用现配，将其喷施于植物茎叶表面。与现有技术相比，本发明植物抗蒸腾剂对植物抗蒸腾的效果明显、水溶性好、成本低、安全无毒、制备简单。本...
- 金竹萍裴雁曦张丽萍乔增杰于鑫沈洁洁
- 文献传递
