沈新迁
- 作品数：7 被引量：21H指数：4
- 供职机构：上海交通大学农业与生物学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市白玉兰科技人才基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)DX01转座突变株的构建及转化体系的优化被引量：5
- 2011年
- Tn5转座子及其衍生载体被广泛应用于革兰氏阴性菌的基因功能研究,但尚未见有利用Tn5转座子导入革兰氏阳性菌短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)DX01菌株的报道。本研究通过构建Tn5转座载体,对短小芽孢杆菌DX01菌株进行了Tn5转座插入诱变,获得了大量的突变株。同时,考察了感受态细胞培养浓度、电击电压、电击缓冲液及复苏培养基的选择等对DX01电转化效果的影响,建立了实验条件下的最佳电转条件。从1 109个转化子中随机抽取20个继代培养15代后,进行了稳定性分析;对转化子的PCR及Southern blot分析证实Tn5已随机插入到DX01基因组中。
- 胡晓璐沈新迁傅科鹤顾振芳陈云鹏
- 关键词：短小芽孢杆菌突变电击转化
- 短小芽孢杆菌转座突变株的GFP标记及在水稻上的定殖被引量：8
- 2012年
- 【目的】研究GFP标记的短小芽孢杆菌在水稻植株上的定殖规律,为其生物防治应用提供科学依据。【方法】从短小芽孢杆菌GFP标记的转座突变株库中筛选强表达GFP且遗传稳定的突变株,用作水稻植株的定殖示踪。【结果】采用荧光酶标仪、流式细胞术检测及荧光显微镜观察等手段,对1 467株Tn5-egfp随机插入突变株的GFP表达作了定量和定性分析,最终获得8株荧光表达较强的突变株,并对突变株作了T-DNA插入拷贝数鉴定。在开放和封闭系统中,标记菌在水稻幼苗根际土壤中均可以存活15 d以上,且前者标记菌的数量下降相对更慢。【结论】短小芽孢杆菌在根毛区及侧根分生处的数量最多,并在根表面形成菌膜。该菌可通过水稻幼苗根部的伤口或幼嫩根毛等部位侵入根系,主要分布在皮层细胞及其间隙,在植物的维管束内亦可观察到荧光标记菌。研究结果表明该菌在水稻幼苗根际土壤中有着良好的定殖能力。
- 沈新迁刘通胡晓璐顾振芳陈云鹏
- 关键词：水稻短小芽孢杆菌绿色荧光蛋白定殖
- 高效降解秸秆的深绿木霉菌ATMT突变株的筛选被引量：1
- 2012年
- 以羧甲基纤维素粉或滤纸为唯一碳源,对深绿木霉菌T23的农杆菌介导的突变株进行了生长速度、产孢率、色素形成等形态学观测,同时,测定了滤纸酶酶活及羧甲基纤维素酶酶活,从中筛选出降解纤维素能力较出发菌T23显著变化的突变株7株。其中,多拷贝T-DNA插入突变株较单拷贝的突变株生长速度快,产孢率高。并且,这些突变株的发酵液呈明显的色素差异。突变株插入的拷贝数越多,酶活越强,在降解过程中这2种酶都观察到了产物的反馈抑制现象。
- 马逸飞沈新迁刘雨晴曹珊珊黄博陈雪吟陈云鹏
- 关键词：深绿木霉纤维素酶突变株纤维素降解
- 木霉hex(1)基因的克隆、表达和功能分析
- x(1)基因作为丝状真菌所特有的基因,在细胞抗逆境胁迫及部分病原菌的致病性方面起着重要作用.本课题组前期蛋白质组学研究发现深绿木霉(T.atroviride)在受有机磷农药胁迫后,HEX(1)蛋白的表达量显著增强,揭示h...
- 唐俊沈新迁吴琼陈捷
- 关键词：木霉菌RNA干扰同源重组
- 短小芽胞杆菌DX01菌株Tn5转座突变株的抑菌活性筛选体系的建立被引量：5
- 2012年
- 为建立短小芽胞杆菌Bacillus pumilus DX01菌株的Tn5转座突变株抑菌活性的高效筛选体系,采用发酵液平板抑菌法研究了各突变株发酵液对稻瘟病菌Magnaporthe grisea生长的影响,并测定了目标突变株的几丁质酶和蛋白酶活性及发酵液对稻瘟病菌分生孢子萌发的抑制率。从2 633个突变株中筛选出6个抑菌活性较对照菌株DX01显著变化的突变株。对照DX01发酵液对真菌孢子萌发的抑制率为36%,而突变株Tn5-901和Tn5-194则分别为96%和3%,抑菌活性与对照的差异达到极显著水平。其余4个突变株的几丁质酶、蛋白酶活性多重比较结果与发酵液平板抑菌结果并不完全一致,但发酵液平板抑菌法简单、高效,适用于短小芽胞杆菌突变株的抑菌活性初筛。
- 胡晓璐陈云鹏沈新迁刘通顾振芳
- 关键词：抑菌活性
- GFP标记的短小芽胞杆菌(Bacillus pumilus)转座突变株的构建初探被引量：5
- 2012年
- 以水稻叶面附生菌短小芽孢杆菌(B.pumilus)为研究对象,通过构建pMOD-egfp-Tetr转座复合体,采用电击转化法对短小芽孢杆菌DX01菌株进行了Tn5转座插入诱变,获得了大量的转化子。对转化子进行了遗传稳定性分析和分子鉴定,并且在荧光显微镜下观察到了强烈的绿色荧光,研究结果表明外源DNA已经成功整合进细菌的基因组中,gfp基因在短小芽孢杆菌中实现了组成型表达。
- 沈新迁胡晓璐刘通孙文良陈云鹏
- 关键词：电击转化绿色荧光蛋白
- 海藻酸钙固定木霉分生孢子高效降解敌敌畏研究被引量：1
- 2010年
- 成功建立了高效降解敌敌畏的海藻酸钙交联固定木霉AMT-28分生孢子体系。与固定化的菌丝或自由悬浮的菌丝相比,固定不同浓度分生孢子小球的敌敌畏降解能力均有显著提高,其中以每100 mL海藻酸钠-硅藻土悬液固定107个分生孢子小球的效果最佳。同时,孢子固定化小球在敌敌畏降解过程中保持了较高的储存稳定性和良好的重复使用性能。因此,此项技术必将在敌敌畏水污染处理方面得到广泛的应用。
- 孙文良唐俊陈云鹏沈新迁刘鹏
- 关键词：分生孢子固定化敌敌畏
