汪礼文
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
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- 日本血吸虫P14基因纳米微球-DNA疫苗的免疫保护作用
- 2011年
- 目的探讨日本血吸虫碱性调宁蛋白样蛋白P14基因的重组真核表达载体(pcDNA3.1(+)-Sj P14)对小鼠血吸虫感染的免疫保护作用。方法制备无内毒素pcDNA3.1(+)-Sj p14及纳米微球-DNA疫苗,将雌性BALB/c小鼠随机分为3组,每组10只,分别为生理盐水对照组、pcDNA3.1(+)-SjP14组及纳米微球-DNA疫苗组。各组小鼠分别肌肉注射生理盐水和pcDNA3 1(+)-Sj P14、纳米微球-DNA疫苗100μg/鼠·次,每2周免疫一次,共3次。末次免疫后2周,尾蚴攻击,6w后处死小鼠,收集成虫,计算减虫率;同时留取肝脏,部分消化后在显微镜下行虫卵计数,计算减卵率结果pcDNA3.1(+)-Sj P14p核酸疫苗能明显提高小鼠的抗血吸虫感染能力,减虫率和减卵率分别达到44.6%和61.6%;纳米微球-DNA疫苗免疫能进一步提高小鼠抗血吸虫感染作用,减虫率和减卵率分别提高至56.2%和73.5%。结论 pcDNA3.1(+)-Sj P14核酸疫苗有一定程度的抗血吸虫感染作用,pcDNA3 1(+)-Sj
- 魏敏汪礼文姚湧唐小牛汪学龙
- 关键词：血吸虫核酸疫苗纳米微球免疫保护
- 日本血吸虫调宁蛋白样蛋白P14基因疫苗对小鼠免疫保护作用研究被引量：4
- 2012年
- 目的研究日本血吸虫调宁蛋白样蛋白P14基因DNA疫苗对小鼠免疫保护作用。方法制备无内毒素DNA疫苗,用于免疫小鼠。将雌性BALB/c小鼠随机分为4组,每组10只。生理盐水组给予100μL/鼠/次;空质粒组100μg/鼠/次、pcDNA3.1(+)-SjP14组、pcDNA3.1(+)-SjP14+pcDNA3.1(+)-SjGST组分别给予100μg/鼠/次;每2w免疫一次,共3次。末次免疫后2w,经腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴(30±1)条/鼠。尾蚴攻击6周后解剖小鼠,收集成虫,计算减虫率;同时留取肝脏,部分消化后在显微镜下行虫卵计数,计算减卵率,部分肝脏用于组织病理学分析(HE染色法),观察肝细胞变化及肉芽肿情况。结果与NS对照组比较,pcDNA3.1(+)-Sj P14p核酸疫苗组减虫率和减卵率分别达到44.6%和61.6%;SjP14核酸疫苗与SjGST核酸疫苗联合免疫组减虫率和减卵率分别提高至56.2%和73.5%。肝组织切片镜下显示,pcD-NA3.1(+)-SjP14组肝脏病变较生理盐水组和空质粒组明显减轻,pcDNA3.1(+)-SjP14+pcDNA3.1(+)-SjGST组肝脏损伤程度最轻,虫卵肉芽肿周围炎症反应轻,肉芽肿面积较小。结论 pcDNA3.1(+)-Sj P14核酸疫苗有一定程度的抗血吸虫感染作用,pcDNA3.1(+)-SjP14与pcDNA3.1(+)-SjGST疫苗联合免疫能增强小鼠对血吸虫感染的保护。
- 唐小牛汪礼文姚勇汪学龙
- 关键词：血吸虫病核酸疫苗
- 日本血吸虫溶血磷脂酶编码基因真核表达载体的构建和表达及鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的 从日本血吸虫成虫cDNA中扩增出溶血磷脂酶编码基因（Si1539）,并亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1（＋）,旨在提取重组抗原进行免疫原性分析,并用于免疫学诊断.方法 提取日本血吸虫成虫总RNA,反转录生成cDNA,PCR法扩增出Sj1539基因,通过克隆载体pGEM-T连接,亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1（＋）,然后转染至人宫颈癌细胞株（HeLa细胞）中表达,表达产物用Western印迹法进行鉴定.结果 Sj1539基因PCR扩增产物片段长度为684 bp.重组质粒pcDNA3.1（＋）-Sj1539经BamH I、Xho I双酶切和PCR扩增鉴定,证实Sj1539基因已成功插入.重组质粒pcDNA3.1（＋）-Sj1539在HeLa细胞中的表达产物经Western印迹法鉴定能够与日本血吸虫感染的兔血清反应,其相对分子质量（Mr）约为25×103.结论 成功构建了日本血吸虫Si1539基因真核表达载体,并获得了表达产物.
- 房功思姚勇汪礼文汪学龙
- 关键词：溶血磷脂酶重组蛋白质类
- pcDNA3.1（+）-SjP14和SjGST真核表达载体的构建、鉴定及其保护作用研究
- 目的:构建pcDNA3.1~/(+/)-SjP14及SjGST真核表达载体,并利用重组质粒免疫小鼠,探讨其对小鼠血吸虫感染的保护作用。
方法:1. pcDNA3.1~/(+/)-SjP14及SjGST真核表达载...
- 汪礼文
- 关键词：核酸疫苗调宁蛋白谷胱苷肽-S-转移酶保护性免疫
- 文献传递
- 日本血吸虫P14钙结合蛋白样蛋白基因真核表达载体的构建、表达和鉴定被引量：4
- 2011年
- 目的从日本血吸虫成虫cDNA中扩增出钙结合蛋白样蛋白SjP14编码基因,并亚克隆至真核表达载体pcD-NA3.1(+),制备重组分子疫苗。方法提取日本血吸虫成虫总RNA,逆转录cDNA,设计引物常规PCR法扩增出SjP14编码基因,通过线性T克隆载体pGEM-T连接,亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),经转染至Hela细胞中表达,表达产物经Western blot鉴定。结果 PCR扩增产物与预期大小相一致,pGEM-T-SjP14及pcDNA3.1(+)-SjP14分别经双酶切后均获得一特异性基因片段,表达产物经Western blot鉴定分子量约为38ku。结论成功构建了日本血吸虫钙结合蛋白样蛋白真核表达载体,并获得了表达产物。
- 汪礼文唐小牛姚湧汪学龙
- 关键词：血吸虫
