殷秀辰
- 作品数：22 被引量：37H指数：3
- 供职机构：上海市农业遗传育种重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科技兴农重点攻关项目公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 新Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1和3D蛋白的原核表达及鉴定
- 2012年
- 为表达新I型亚肝炎病毒(DHV-1C)的VP1和3D重组蛋白,本研究根据GenBank中的DHV-1C N株全基因序列,设计合成两对引物扩增其VP1和3D基因,构建重组表达载体并进行诱导表达。SDS-PAGE和western blot分析表明,VP1和3D重组蛋白分别在诱导3 h和4 h后表达量达到峰值,其大小分别为37.68 ku和65.80 ku,并且能够与抗DHV-1C阳性血清产生特异性免疫反应。
- 孟凡依殷秀辰李刚陈玉环张云刘明冯新畅
- 关键词：VP1克隆表达
- 猪流行性腹泻病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立被引量：4
- 2017年
- 以乳化灭活的猪流行性腹泻病毒(PEDV)作为抗原,免疫大白兔,制备兔抗PEDV高免血清,纯化抗PEDV IgG并进行生物素标记。以体外表达的PEDV S蛋白作为抗原,商品化的PEDV单克隆抗体作为捕获抗体,生物素标记的IgG作为检测抗体,建立了检测PEDV的生物素-亲和素系统的双抗夹心ELISA方法。结果表明:该方法最低检测限量为20 ng/μL,且稳定性和特异性较好。对25份临床猪腹泻样品进行检测,3份检出PEDV阳性,与RT-PCR法的符合率为100%。本研究为PEDV临床检测提供了新方法,也为猪腹泻病原的多重检测技术研究奠定了基础。
- 张清真陶洁殷秀辰熊年年李星刘惠莉
- 关键词：双抗体夹心ELISA
- 一株鹅源巴氏杆菌的分离鉴定及耐药性分析被引量：14
- 2014年
- 对某种鹅场病死鹅进行剖解,肝涂片镜检后观察到革兰氏染色阴性短小杆菌,瑞氏-吉姆萨染色见两极浓染。用巴氏杆菌特异性引物进行PCR扩增,将扩增产物克隆至pMD18-T载体上,测序结果通过BLAST比对与多杀性禽巴氏杆菌的相似性为99.0%,确定其为多杀性巴氏杆菌。用16种常用抗菌药物的纸片法对该分离菌进行药敏试验,结果显示,该菌对四环素和万古霉素不敏感;对克林霉素、链霉素中度敏感;对内酰胺类(青霉素、氨苄西林)、大环内脂类(红霉素、克拉霉素)、喹诺酮类(环丙沙星)抗生素等高度敏感。用小白鼠和鹅进行动物回归试验,分为0.1mL/只、0.3mL/只和0.5mL/只剂量组,分别皮下接种TSB培养的病原菌,并分别在接种后6h和48h内出现死亡,死亡动物的剖检病变与巴氏杆菌感染的鹅相同,并在病变器官内分离出该病原菌。
- 刘红玉邵周伍林李刚殷秀辰陈玉环吴晓颖刘思国张云
- 关键词：多杀性巴氏杆菌PCR检测耐药性分析
- LT蛋白诱导小鼠脾脏IFN-γ变化规律研究
- 2014年
- 为研究大肠杆菌热敏性肠毒素(Escherichia coli heat-labile enterotoxin,LT)蛋白佐剂(野生型、突变型)对免疫小鼠体内细胞因子表达水平的影响,建立了检测干扰素(IFN-γ)的荧光定量PCR方法,并检测了经LT滴鼻免疫小鼠脾脏中IFN-γmRNA的表达水平。结果表明:野生型和突变型LT蛋白免疫小鼠脾脏中IFN-γ的mRNA水平呈时间依赖性升高,而PBS对照组没有明显变化。野生型LT蛋白免疫后48 h,小鼠脾脏IFN-γmmRNA的表达量与对照组相比显著上升并达到峰值,在60 h后开始下降;突变型LTRG蛋白免疫后60 h左右,IFN-γmRNA水平达到最高峰值,72 h后开始下降。本研究表明:野生型及突变型LT蛋白免疫小鼠均能增强小鼠脾脏中IFN-γ的转录表达,产生针对抗原的非特异性免疫应答。
- 董端凝殷秀辰哈卓饶柏钟刘惠莉
- 关键词：IFN-Γ小鼠实时定量PCR
- 猪流感病毒分离株A/Swine/Shanghai/3/2014(H1N1)致病性研究
- 引言猪流感(Swine Influenza,SI)是由甲型流感病毒引起的猪的急性呼吸道传染病。目前该病呈世界分布,地方性流行为主。猪是禽、猪、人流感病毒唯一的共同易感宿主,不同型流感病毒可以在猪体内进行重新组装,从而出现...
- 陶洁殷秀辰张春玲哈卓刘惠莉
- 文献传递
- 粘膜佐剂肠毒素LT蛋白制备及配伍疫苗研制
- 刘惠莉赵艳敏师小潇唐思静哈卓殷秀辰陶洁倪建平董端凝李星潘洁饶柏钟
- 项目属于兽医学领域-新型疫苗及疫苗佐剂研制。 大肠杆菌热敏性肠毒素(Heat-labile toxin，LT)是高效粘膜佐剂，基因改造的无毒mLT粘膜佐剂蛋白与畜禽疫苗配伍，研制可经粘膜免疫的新型疫苗，提升免疫的针对性和...
- 关键词：
- 关键词：兽医学
- 猪乙型脑炎病毒RT-LAMP检测方法的建立和应用
- 为建立一种简单,快速,灵敏,特异性好的猪流行性日本乙型脑炎病毒(JEV)的检测方法,本研究根据Genbank登录的SA14-14-2疫苗株及SA14毒株的E基因组序列,利用在线软件Primer Explorer V3设计...
- 李海洋哈卓殷秀辰饶柏钟张磊峰刘惠莉
- 文献传递
- Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1基因重组腺病毒的构建及其免疫效果评价
- 鸭病毒性肝炎(Duck virus hepatitis, DVH)是由鸭肝炎病毒(Duck hepatitis virus, DHV)引起的，主要侵害4周龄以内的雏鸭的一种传播迅速、高度致死，以肝肿大出血为主要特征的病毒...
- 殷秀辰
- 关键词：VP1蛋白重组腺病毒免疫效果
- 文献传递
- 含粘膜佐剂的鸡新城疫疫苗诱导雏鸡非特异性免疫应答的研究被引量：1
- 2014年
- 为研究分析重组大肠杆菌不耐热肠毒素(labile enterotoxin,LT)作为粘膜佐剂,配伍鸡新城疫疫苗的冻干样品对免疫鸡非特异性免疫应答的影响,在前期已经构建的LTR72/G192基础上,选择2、4μg LTRG蛋白作为每羽份疫苗添加量,及降低新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)50%抗原量等配伍条件。按照生产条件制备冻干疫苗,进行雏鸡免疫试验,免疫后24、48、72 h采集脾脏、胸腺淋巴结,检测几种非特异性细胞因子表达水平。结果表明:IL-6、INF-γ水平在各疫苗免疫后24h即升高,48 h达最高值;添加2、4μg LTRG蛋白的NDV疫苗组IFN-β、TNF-α水平在48 h左右显著升高,其中含4μg LTRG疫苗组与其他组差异具有极显著统计学意义(P<0.01);IL-6、IFN-γ转录水平有所增强,但各组间差异不具有显著统计学意义(P>0.05),72 h左右几种细胞因子水平均迅速下降,与NDV疫苗接种组相近。由此可见,LTRG能辅助抗原诱导免疫雏鸡的非特异性免疫应答,有利于对感染病毒的清除。
- 殷秀辰哈卓李星张清真刘惠莉
- 关键词：新城疫病毒佐剂
- 含佐剂蛋白的鸡新城疫冻干疫苗对雏鸡免疫效力的研究
- 2015年
- 研究了佐剂蛋白大肠杆菌热敏性肠毒素LTRG与鸡新城疫疫苗(NDV)联合冻干制品的免疫效果。选择不同剂量的佐剂蛋白与鸡新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)LaSota抗原配比,按生产程序制备冻干疫苗。经滴鼻途径免疫雏鸡,检测血清抗体、粘膜抗体水平,分析不同配伍疫苗的免疫效果。结果表明:含4μg LTRG佐剂蛋白的NDV冻干疫苗,免疫雏鸡血清IgG抗体水平明显高于其他添加组及NDV疫苗组,差异显著;粘膜IgA抗体与NDV疫苗组比较,差异极显著。LTRG佐剂蛋白与鸡新城疫疫苗配伍制备冻干疫苗,能增强免疫雏鸡的免疫应答能力,尤其是可产生较好的粘膜抗体水平。
- 殷秀辰谢春芳张磊峰李星哈卓刘惠莉
- 关键词：血清IGG抗体
