柳娜 作品数:5 被引量:25 H指数:3 供职机构: 甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家教育部博士点基金 甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
菠菜胆碱单加氧酶基因cDNA的克隆及重组植物表达载体的构建 被引量:2 2007年 从菠菜叶片中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增到菠菜胆碱单加氧酶(CMO)基因cDNA,然后将CMO cDNA克隆至pBluescript SK+载体上,序列分析结果表明,该CMO cDNA全长为1 424 bp,开放阅读框1 320 bp,编码440个氨基酸。核酸序列同源性分析表明,该cDNA与已发表的菠菜CMO基因具有99.8%同源性,氨基酸序列同源性达99.6%。在此基础上以pBI121和pBIrd为基础,构建了组成型启动子CaMV 35S和逆境诱导表达启动子rd29A驱动的CMO基因的植物表达载体。 柳娜 王蒂 司怀军 李东魁 刘海英 李有忠关键词:菠菜 克隆 表达载体构建 马铃薯无机焦磷酸酶基因cDNA在大肠杆菌中的表达及蛋白质特征分析 被引量:5 2008年 通过调节蔗糖代谢途径中的协同因子无机焦磷酸(PPi)可以调控马铃薯块茎的休眠和发芽特性。本研究将马铃薯无机焦磷酸酶(PPase)基因(Gen Bank Accession No:EF091820)与载体pET-28a融合,构建了原核表达载体pET—PPA,然后导入大肠杆菌BL21(DE3)中,经SDS-PAGE分析表明PPase基因在大肠杆菌中能够表达。用生物学软件对PPase基因及其编码的蛋白质分析表明,该PPase基因与与茄属的同源性高达89%-97%,与其他物种PPase基因的同源性在77%-80%之间;系统进化树分析表明PPase与茄科茄属和藜科甜菜属的进化类群最接近;其编码的蛋白质具有多个磷酸化位点,没有跨膜区;蛋白质二级结构预测显示,有63个氨基酸可能形成α-螺旋结构,38个氨基酸可形成延长链;通过亚细胞定位可知,它主要是一种细胞质和线粒体基质蛋白。 张宁 司怀军 柳娜 李有忠 刘海英 文钢 王蒂关键词:马铃薯 大肠杆菌 转BADH基因马铃薯无性繁殖二代耐盐性检测 被引量:9 2007年 在0%、0.3%、0.6%NaCl胁迫下,检测转BADH基因马铃薯及其受体亲本‘甘农薯2号’的盆栽植株耐盐性的结果表明:BADH基因的遗传性稳定且转基因植株的耐盐性比非转基因的强。 李东魁 王蒂 张俊莲 司怀军 柳娜关键词:马铃薯 BADH基因 耐盐性 转基因植株 马铃薯无机焦磷酸酶基因cDNA克隆及其反义植物表达载体构建 被引量:8 2008年 以马铃薯栽培品种大西洋(Atlantic)试管苗叶片为材料,用Trizol试剂提取总RNA,通过RT-PCR方法获得马铃薯PPase基因的cDNA片段,将该片段反向连接到克隆载体pBluescriptSK+,酶切鉴定后进行基因测序,所得PPase基因片断为673bp,编码211个氨基酸,与已克隆的PPase基因同源性达到97.62%。将该PPase基因反向插入到表达载体pBI121、pBIC和pBIrd中,分别构建了组成型启动子CaMV35S、块茎特异表达启动子CIPP和低温诱导表达启动子rd29A驱动的反义PPase基因植物表达载体,以期利用转基因技术培育出块茎休眠期延长或缩短的马铃薯新种质。 刘海英 李有忠 柳娜 司怀军 王蒂关键词:马铃薯 CDNA克隆 菠菜胆碱单加氧酶基因cDNA克隆及原核表达 干旱和盐碱是影响植物生长发育最主要的非生物胁迫因子,许多重要的农作物如水稻、马铃薯、烟草等对干旱和盐碱比较敏感,缺乏有效的耐旱机理,经常因干旱和盐碱造成严重的产量损失。培育抗旱耐盐农作物新品种是利用干旱盐碱地最为经济、有... 柳娜关键词:菠菜 植物表达载体 原核表达 文献传递