杨高晖
- 作品数:18 被引量:41H指数:4
- 供职机构:广西医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广西研究生教育创新计划广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 介导人α-反义寡核苷酸慢病毒载体的构建被引量:1
- 2010年
- 目的构建介导人α-反义寡核苷酸的慢病毒载体,为α-反义寡核苷酸对β-地中海贫血基因治疗的体内试验提供稳定的转染细胞载体。方法根据人α-反义寡核苷酸序列设计siRNA、合成DNA片段,通过双限制性内切酶消化和连接的方法构建pGCSIL-vshRNA-GFP载体质粒,接着该质粒转化感受态的大肠杆菌E.coliDH5α,通过PCR及基因测序鉴定阳性克隆,再经Lipofectamine 2000将pGCSIL-vshRNA-GFP,pHelper 1.0和pHelper 2.0三质粒系统共转染293 T细胞包装病毒,通过绿色荧光蛋白的表达测定收集的病毒滴度。结果重组质粒的外源基因PCR鉴定正确,基因测序结果与所需要的α-反义寡核苷酸序列完全一致,浓缩后病毒滴度为5×109TU/ml。结论成功构建介导人α-反义寡核苷酸的慢病毒载体。
- 赖颖晖赖永榕杨高晖
- 关键词:慢病毒载体反义寡核苷酸基因治疗
- 尿多酸肽对原代红系细胞γ-珠蛋白表达的体外研究被引量:1
- 2020年
- 目的:探讨尿多酸肽(CDA-Ⅱ)对体外培养原代红系细胞γ-珠蛋白基因和蛋白表达的影响,为CDA-Ⅱ对β-地中海贫血的治疗提供新思路。方法:以不同浓度CDA-Ⅱ(0 mg/mL、1 mg/mL、2 mg/mL、3 mg/mL、4 mg/mL)作用原代红系细胞24 h、48 h和72 h,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)和Cell counting kit-8(CCK-8)法分别检测γ-珠蛋白基因的表达及细胞增殖-毒性情况;以3 mg/mL CDA-Ⅱ为实验组、200 nmol/L地西他滨和100μmol/L羟基脲为阳性对照组以及等体积PBS+DMSO为阴性对照组作用细胞后,采用RT-PCR检测γ-珠蛋白、DNA甲基转移酶1(DNMT1)和FOXO3a mRNA表达的变化;Western Blot(WB)检测γ-珠蛋白表达的情况。结果:RT-PCR结果表明,3 mg/mL CDA-Ⅱ作用细胞48 h和72h后上调γ-珠蛋白基因的表达作用明显(P<0.05),分别为空白对照组(0 mg/mL)的2.5倍和2.68倍;CCK-8结果显示细胞存活率存在时间和浓度依赖性下降,24 h、48 h和72 h的半数抑制浓度(IC50)分别为(5.28±0.67)mg/mL、(3.89±0.63)mg/mL、(2.35±0.20)mg/mL;与阴性对照组比较,CDA-Ⅱ组与地西他滨、羟基脲阳性对照组既可以降低DNMT1基因的表达(P<0.05)、升高FOXO3a基因的表达,同时可以上调γ-珠蛋白基因和蛋白的表达(P<0.01)。结论:CDA-Ⅱ对红系细胞γ-珠蛋白基因和蛋白的高表达可能与DNMT1和FOXO3a有关。
- 江雷方栋黄语妹杨高晖盘玲媛刘容容赖永榕
- 关键词:尿多酸肽DNMT1FOXO3A
- 地西他滨对K562细胞γ-珠蛋白基因表达及细胞增殖的影响被引量:1
- 2012年
- 目的研究地西他滨对K562细胞γ-珠蛋白基因表达及细胞增殖的影响,探讨药物治疗β-地中海贫血的新思路。方法分别用不同浓度(0 nmol/L、50 nmol/L、100 nmol/L、200 nmol/L、300 nmol/L)地西他滨作用于K562细胞24 h、48 h、72 h,用CCK-8检测药物对K562细胞存活率的影响,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用实时荧光定量RT-PCR检测γ-珠蛋白基因表达。结果地西他滨对K562细胞生长有抑制作用,作用后细胞凋亡率增加,γ-珠蛋白基因表达显著提高(P<0.05)。结论地西他滨可以提高K562细胞γ-珠蛋白基因表达。
- 谢冬梅赖永榕刘容容谭滨彬杨高晖
- 关键词:地西他滨K562细胞细胞凋亡
- 异基因造血干细胞移植治愈不稳定血红蛋白病Hb Mizuho 1例
- 2023年
- 患儿,男,8岁10个月,陕西西安人。患儿1岁时出现面色苍白、巩膜黄染,在当地医院检查发现黄疸、轻中度贫血,诊断溶血性贫血,原因未明确,未予特殊处理。
- 李婵杨高晖刘练金陈英华周雪梅赖永榕刘容容
- 关键词:巩膜黄染不稳定血红蛋白溶血性贫血异基因造血干细胞移植中度贫血
- 同胞异基因造血干细胞移植治疗重型地中海贫血后巨细胞病毒感染的危险
- 杨高晖林雨刘练金章忠明赖永榕李桥川
- D63.重型β-地中海贫血患者维生素D3的测定
- 胡陈万赖永榕杨高晖
- 文献传递
- 304例重型β-地中海贫血铁过载状况临床分析被引量:9
- 2015年
- 目的:调查304例重型β-地中海贫血(β-地贫)患者铁过载状况的临床分析.方法:回顾性调查分析2010年11月至2013年1月重型β-地贫患者临床资料,其中男192例,女112例.年龄2~25岁,中位年龄8岁.均抽取外周血行血清铁蛋白(SF)检测.结果:304例患者中脾肿大80例(26.3%),肝肿大70例(23%),行脾脏切除术39例(12.8%).输血量为2~960 u,中位输血量为134 u.5例(1.6%)行规范化祛铁治疗,253例(83.2%)不规范化祛铁治疗,46例(15.1%)未行祛铁治疗.SF为453~23 640 μg/L,中位值为3 917 μg/L.其中96.4%的患者SF>1 000 μg/L,76.6%的患者SF>2 500 μg/L.结论:部分重型β-地贫患者,祛铁治疗不规范,输血不足,铁过载及生长发育迟缓情况较为严重.
- 陆倩倩杨高晖赖永榕刘容容罗琳
- 关键词:重型Β-地中海贫血铁过载血清铁蛋白输血
- MRI T_(2)^(*)技术评估地中海贫血患者心脏、肝脏及胰腺铁负荷的相关性研究被引量:1
- 2023年
- 目的:基于1.5T磁共振成像(MRI)T_(2)^(*)技术探讨地中海贫血(TM)患者心脏、肝脏及胰腺铁负荷的相关性。方法:收集163例TM患者不同时期MRI T_(2)^(*)图像数据(每次间隔6个月),并按照不同患者首次检查时间,分成间隔6个月、12个月、18个月及24个月进行亚组分析。采用CMRtools软件测量所有患者心脏T_(2)^(*)(H-T_(2)^(*))、肝脏T_(2)^(*)(L-T_(2)^(*))值,并探究两者之间的关系。另收集50例TM患者H-T_(2)^(*)、L-T_(2)^(*)及胰腺T_(2)^(*)(P-T_(2)^(*))数据,探讨P-T_(2)^(*)与H-T_(2)^(*)之间、P-T_(2)^(*)与L-T_(2)^(*)之间的相关性。结果:首次检查组、6个月组及12个月组的H-T_(2)^(*)与L-T_(2)^(*)之间(r=0.431、0.492、0.430,P均<0.001)均呈中度正相关。18个月组及24个月组的H-T_(2)^(*)与L-T_(2)^(*)之间(r=0.326、0.367,P=0.031、0.046)均呈低度正相关。P-T_(2)^(*)与H-T_(2)^(*)、L-T_(2)^(*)均呈中度正相关(r=0.455、0.586,P=0.001,P<0.001)。结论:TM患者H-T_(2)^(*)、L-T_(2)^(*)及P-TT_(2)^(*)之间相关程度不明显,相互反映彼此铁负荷的可靠程度较低。采用MRI T_(2)^(*)技术评估TM患者铁负荷时应进行较全面的脏器铁评估。
- 徐维慧许峰铭唐成杨高晖罗朝天彭鹏
- 关键词:地中海贫血铁负荷
- D58.地西他滨对体外培养重型β-地中海贫血红系细胞的γ珠蛋白调控作用
- 谢冬梅赖永榕刘容容谭滨彬杨高晖
- 文献传递
- 广西重型β地中海贫血患者铁过载及其相关并发症和机制研究
- 第一部分 广西重型β地贫患者铁过载状况研究 目的调查广西重型β地贫患者铁过载发病率及铁过载严重程度 方法从2010年11月至2013年1月共收集重型β地贫患者310例,其中男性196例,女性114例。年龄为2~25岁,中...
- 杨高晖
- 关键词:重型Β地中海贫血铁过载左室射血分数铁过载左室射血分数铁过载Β-地中海贫血铁过载Β-地中海贫血
- 文献传递