李连连
- 作品数：6 被引量：11H指数：2
- 供职机构：河北科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 一种以粗孔微球硅胶为内核的苯丙氨酸解氨酶交联酶聚体的制备方法
- 本发明涉及一种以粗孔微球硅胶为内核的苯丙氨酸解氨酶交联酶聚体及其制备方法,包括以下步骤：a、粗孔微球硅胶的活化,b、酶‑硅胶混合液的共沉淀,c、酶‑硅胶混合液的共沉淀聚体的共价交联，d、以粗孔微球硅胶为内核的苯丙氨酸解氨...
- 崔建东李连连边红杰
- 文献传递
- 以粗孔微球硅胶为核芯的交联酶聚体的制备
- 2015年
- 采用苯丙氨酸解氨酶(PAL)为模型酶,制备了以粗孔微球硅胶为内核的苯丙氨酸解氨酶交联酶聚体(NH-PAL-CLEAs),优化了制备条件。并研究了NH-PAL-CLEAs的部分催化性能。研究结果表明,当硅胶量为117.75mg,酶液添加量为1mL(2U),戊二醛浓度为0.2%(体积分数)时,所制备的NH-PAL-CLEAs的最大酶活回收率是25%。与传统的PAL-CLEAs相比,NHPAL-CLEAS无需离心或过滤,只用短时间静置就能被回收重复利用。同时,NH-PAL-CLEAs也表现出较好的操作稳定性。这种制备方法不仅克服传统制备交联酶聚体(CLEAs)颗粒小、难回收,离心或过滤回收易结块的问题,而且缩短了生产周期,减少了能源消耗,提高了固定化酶的利用率,是一种非常具有工业应用前景的固定化酶方法。
- 崔建东赵雅敏李连连
- 关键词：酶工程苯丙氨酸解氨酶固定化酶
- 以大孔硅胶为载体的苯丙氨酸解氨酶交联酶聚体的制备及性质研究被引量：9
- 2014年
- 通过交联酶聚体与氨基化硅胶(活化硅胶)的共价交联,制备了以氨基化硅胶、无氨基化硅胶为载体的苯丙氨酸解氨酶交联酶聚体MSG(SG)-PAL-CLEAs、SG-PAL-CLEAs。优化了硅胶的氨基化条件以及MSG-PAL-CLEAs的制备条件,并且对游离酶,苯丙氨酸解氨酶交联酶聚体(PAL-CLEAs),MSG-PAL-CLEAs和SG-PAL-CLEAs的稳定性进行了比较。优化的硅胶氨基化条件:3-氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)/硅胶2∶1(v/w),氨基化温度110℃,氨基化时间10h,在此条件下所得硅胶键合氨基数目是480μmol/g硅胶。优化的MSG-PAL-CLEAs制备条件:0.05g硅胶/mL酶液,吸附时间2.5h,吸附pH8.8,沉淀剂为硫酸铵,饱和度80%,交联剂戊二醛的浓度为1%,交联时间1h。SG-PALCLEAs的制备条件和MSG-PAL-CLEAs的制备条件大体相似,不同的是沉淀剂硫酸铵的饱和度为40%,交联剂戊二醛的终浓度为1.5%。研究结果表明,制备得到的MSG-PAL-CLEAs和SG-PAL-CLEAs的酶活回收率均为45%左右。与传统的PAL-CLEAs相比,MSG-PAL-CLEAs的重复使用性和储藏稳定性均有了显著提高,MSG-PAL-CLEAs转化4个批次后,酶活保留79%,而PAL-CLEAs转化2个批次酶活仅保留49%。25℃,PAL-CLEAs储存29d酶活保留26%,而MSG-PAL-CLEAs的酶活保留仍高达50%。
- 李连连崔建东
- 关键词：苯丙氨酸解氨酶
- 一种以粗孔微球硅胶为内核的苯丙氨酸解氨酶交联酶聚体的制备方法
- 本发明涉及一种以粗孔微球硅胶为内核的苯丙氨酸解氨酶交联酶聚体及其制备方法，包括以下步骤：a.粗孔微球硅胶的活化；b.酶-硅胶混合液的共沉淀；c.酶-硅胶混合液的共沉淀聚体的共价交联；d.以粗孔微球硅胶为内核的苯丙氨酸解氨...
- 崔建东李连连边红杰
- 文献传递
- 牛血清白蛋白辅助交联对苯丙氨酸解氨酶交联酶聚体影响的研究被引量：4
- 2013年
- 通过牛血清白蛋白(BSA)辅助交联,制备了牛血清白蛋白苯丙氨酸解氨酶交联酶聚体(BSA-PAL-CLEAs)。优化了BSA-PAL-CLEAs的制备条件,并比较研究了游离酶、苯丙氨酸解氨酶交联酶聚体(PAL-CLEAs)和BSA-PAL-CLEAs的稳定性差异。研究发现,BSA-PAL-CLEAs的最佳制备条件:BSA浓度为5mg/mL,硫酸铵饱和度80%,戊二醛(10%v/v)10μL,交联时间2h,所得BSA-PAL-CLEAs的酶活回收率(25%)是不加BSA时(13%)的1.92倍。稳定性研究表明,BSA-PAL-CLEAs的温度稳定性、储藏稳定性比PAL-CLEAs都有所提高;但是,游离酶、PAL-CLEAs、BSA-PAL-CLEAs的pH稳定性相差不大;BSA-PAL-CLEAs在有机溶剂中的稳定性比PAL-CLEAs有所下降。
- 孙立梅李连连崔建东
- 关键词：牛血清白蛋白苯丙氨酸解氨酶
- 以硅胶为载体的苯丙氨酸解氨酶交联酶聚体的制备及性质研究
- 目前，苯丙氨酸解氨酶(PAL)在临床和工业上有广泛的应用，但是在应用过程中，酶的稳定性相对较差，为了提高PAL在实际应用中的稳定性，本文通过交联酶聚体(CLEAs)和载体固定化技术的综合应用，制备了以粗孔微球硅胶为内核的...
- 李连连
- 关键词：苯丙氨酸解氨酶硅胶氨基化酶学性质
