李占亭 作品数:37 被引量:110 H指数:5 供职机构: 第四军医大学唐都医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 陕西省自然科学基金 陕西省卫生厅科学研究基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
转化生长因子β1和上皮细胞间充质转分化在糖尿病肾脏疾病中的作用 被引量:1 2015年 在美国糖尿病。肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD)的发病率在近十年内升高近2倍,有近50%的患者走向终末期肾脏疾病(end stage renal disease,ESRD)。DKD已经成为导致患者肾脏代替治疗的常见肾脏病之一。高血糖引起的结构损伤包括基底膜肥厚、肾小管萎缩及肾间质纤维化,这些改变导致了肾小球滤过率增加、蛋白尿、高血压及肾功能的减退。在组织学上, 李占亭 孙脊峰 赵洁 魏国华 蒙军平 张涵 杜德伟 杨洁 师建国关键词:糖尿病肾脏疾病 转化生长因子Β1 转分化 间充质 终末期肾脏疾病 慢性肾衰血透患者TTV检测及其与细胞免疫功能的关系 被引量:2 2000年 目的 观察慢性肾衰 (CRF)血液透析 (HD)患者中 ,输血传播病毒 (TTV)的感染与患者细胞免疫功能的关系。方法 应用巢式逆转录 -聚合酶链反应 (RT PCR) ,双抗体夹心ELISA法及流式细胞仪 ,分别检测了 90例CRF血透患者和 12 8例对照组血清TTV DNA ,可溶性白细胞介素 2受体 (sIL 2R)和外周血T淋巴细胞亚群。并随机选择对其中1株TTV的部分基因序列进行测定 ,分析TTV与细胞免疫功能、输血次数、HD时间和肝功能的关系。结果 ⑴ 90例CRF血透患者中 ,TTV DNA阳性率为 46 6 7% ,明显高于正常对照组 (P <0 0 0 1) ,与日本报道的TTV DNA序列(AB0 0 8394)相应片段的同源性为 98 5 %。⑵CRF血透患者血清中 ,sIL 2R水平明显高于正常对照组 (P <0 0 1) ;CD3+,CD4+和CD4+/CD8+T细胞比例明显降低 (P <0 0 1)。⑶TTV DNA阳性率与sIL 2R、输血次数及HD时间呈显著的正相关 (r =0 486 ,P <0 0 1;r =0 .5 86 ,P <0 0 0 1;r =0 492 ,P <0 0 1) ,与CD+,CD4+和CD4+/CD8+T细胞比例呈负相关 (r = 0 476 ,P <0 0 1;r = 0 483,P <0 0 1;r= 0 496 ,P <0 0 1) ,而与年龄、性别及手术史均无显著的差别和相关性。结论 CRF血透患者有严重的TTV感染 ; 孙脊峰 傅恩清 焦凯 李占亭 王莉 王惠萍 李光荫关键词:慢性肾功能衰竭 TTV 细胞免疫功能 合并高血压维持性血液透析患者遵医行为的调查 被引量:3 2009年 目的:了解合并高血压维持性血液透析患者遵医行为,帮助其控制病情,提高生活质量。方法:采用自行设计的问卷,对随机抽样的120例合并高血压维持性血液透析患者,进行调查分析。结果:120例患者,完全遵医者36例,不完全遵医者62例,完全不遵医者22例。影响不遵医行为最常见的原因是缺乏高血压、血液透析知识,担心血液透析并发症,医疗费用高等。结论:合并高血压维持性血液透析患者不遵医行为发生率很高,原因复杂。应加强健康教育,保证足够的医疗费用,社会与家庭支持,才能帮助合并高血压维持性血液透析患者控制病情,提高生活质量。 王莉 杨洁 孙脊峰 杜德伟 李占亭 史芸关键词:高血压 肾透析 病人依从 问卷调查 维持性血液透析患者心理需求的调查分析 随着血液透析技术的成熟和提高,越来越多尿毒症患者选择了血液透析。目前全世界有80%以上尿毒症患者依靠透析疗法维持生命。由于长期受疾病折磨,加上透析不良反应和并发症的发生,给患者带来了身体和精神上的巨大痛苦。为了解维持性血... 王莉 杨峰 孙脊峰 杜德伟 李占亭 史芸关键词:维持性血液透析患者 复用透析器 心理需求 文献传递 HRE/CMV启动子的克隆和缺氧调控活性的测定 2007年 目的:将具有缺氧调控作用的多种缺氧反应元件(HRE)与CMV启动子组合,以获得缺氧应答启动子。将荧光素酶报告基因置于缺氧应答启动子的下游,通过检测荧光素酶活性的方法,方便地研究缺氧应答启动子缺氧诱导的作用。方法:合成多种HRE核苷酸序列,并设立HRE突变对照,克隆入pCI-neo中,构建HRE/CMV启动子。扩增HRE/CMV序列,定向亚克隆入pGL3-Basic中,获得HRE/CMV荧光素酶报告载体。瞬时转染HeLa细胞,在0.1%O2环境下培养细胞,并设立正常氧分压环境对照。检测荧光素酶的相对活性。结果:成功构建了HRE/CMV荧光素酶报告载体,其中mPGK-HRE/CMV载体表现出很好的缺氧诱导作用和高水平的表达。结论:mPGK-HRE/CMV启动子能够有效地进行缺氧诱导和调控工作。 杨洁 杜德伟 李占亭 贾林涛 赵晶 许彦鸣 杨安钢 孙脊峰关键词:缺氧反应元件 荧光素酶 缺氧调控载体功能活性的研究 被引量:1 2007年 目的构建具有缺氧调控活性的基因治疗载体,其表达可由缺氧选择性诱导,用于转导基因的可控性表达。方法合成各种缺氧应答基因的缺氧应答元件(HRE)寡核苷酸序列,与巨细胞病毒(CMV)启动子组合,驱动荧光素酶报告基因和治疗基因人红细胞生成素(hEPO)的转录。检测荧光素酶的活性和hEPO的表达以确定其缺氧转录活性。结果在各种缺氧调控载体中,由鼠磷酸甘油酸激酶(mPGK)的HRE与CMV启动子组合而成的缺氧应答启动子显示出高缺氧应答性,而且缺氧诱导的表达水平与完整的CMV启动子在常氧环境下的转录水平相近。结论3HRE/mPGK/CMV缺氧调控载体对于实现治疗基因的精确调控表达可能非常有用。 杨洁 张翔 陈锐 杜德伟 李占亭 赵晶 杨安钢 孙脊峰关键词:转录 荧光素酶 报告基因 TGF-β R Ⅱ真核表达载体及其RNA干扰质粒的构建及鉴定 被引量:3 2008年 目的构建含有TGF-βⅡ型受体(TGF-β R Ⅱ)的真核表达载体及针对TGF-β R Ⅱ的RNA干扰质粒,并观察RNA干扰对TGF-β R Ⅱ表达的抑制作用。方法PCR方法扩增TGF-β R Ⅱ的cDNA序列,将全长的TGF-β R ⅡcDNA插入pcD-NA3.1中,构建TGF-β R Ⅱ的真核表达载体pcDNA3.1-TGF-β R Ⅱ,并检测其在293T细胞中的表达。根据TGF-β R Ⅱ的基因序列,设计针对TGF-β R Ⅱ的干扰RNA,构建针对TGF-β R Ⅱ的RNA干扰质粒pSUPER-TGF-β R Ⅱ。脂质体介导质粒pSUPER-TGF-β R Ⅱ和pcDNA3.1-TGF-β R Ⅱ共转染293T细胞,Western blot法检测RNA干扰质粒的生物活性。结果真核表达载体pcDNA3.1-TGF-β R Ⅱ和RNA干扰质粒pSUPER-TGF-β R Ⅱ经酶切鉴定构建正确,测序结果显示未发生基因突变。间接免疫荧光检测pcDNA3.1-TGF-β R Ⅱ转染的293T细胞,可见绿色荧光。针对TGF-β R Ⅱ的RNA干扰质粒明显抑制293T细胞内TGF-β R Ⅱ的表达。结论已成功构建了TGF-β R Ⅱ的真核表达载体及针对TGF-β R Ⅱ的RNA干扰质粒,为进一步研究针对TGF-β R Ⅱ的RNA干扰对肾纤维化的预防及治疗作用奠定了基础。 杜德伟 孙脊峰 吴学勤 李端 杨洁 李占亭关键词:真核表达 RNA干扰 肾纤维化 IgA肾病的治疗进展 被引量:12 2007年 IgA肾病是最常见的原发性肾小球疾病,由于其发病机制尚未明确,目前仍无特异性治疗药物.临床上的治疗目标是有效降低蛋白尿,控制血压和(或)高尿酸并减少肾组织进一步损伤,维持肾功能稳定.对反复发作的镜下血尿患者,扁桃体切除术作为治疗的一种手段;对单纯性血尿和病理改变较轻者,主要加强随访观察;对于有尿蛋白和(或)高血压的缓慢进展的IgA肾病,血管紧张素转化酶抑制剂和血管紧张素受体拮抗剂可用于大部分病例,必要时可使用糖皮质激素,也可应用细胞毒性药物或吗替麦考酚酯等免疫抑制剂进行治疗;病情进展较快的高危患者,可用糖皮质激素冲击治疗,或使用细胞毒药物或免疫抑制剂等强化治疗. 李占亭 杨洁 孙脊峰 杜德伟 刘丽丽 王莉关键词:IGA肾病 刚性管理与柔性管理在护生实习中的应用 被引量:3 2010年 目的探讨适合护生实习的最佳管理模式。方法在护生实习管理中将刚性管理与柔性管理结合使用,在制度管理的基础上增加了激励机制和人文关怀,充分发挥管理的效能。结果护生综合素质明显提高,护生与教员的关系和谐,患者对护生的满意率明显提高。结论将刚性管理与柔性管理相结合应用于护理实习中,管理效果显著,值得临床推广。 王莉 孙脊峰 杜德伟 李占亭 史芸关键词:刚性管理 柔性管理 护生 高效缺氧诱导表达载体的构建与鉴定 2008年 目的:构建缺氧诱导表达载体,以介导报告基因在缺氧环境下的特异、高效表达。方法:通过分子生物学方法,将鼠磷酸甘油酸激酶基因的缺氧应答元件(HRE)和最小CMV(mCMV)启动子重组,构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)或萤光素酶报告基因的可诱导载体;通过酶切鉴定和测序分析,证实载体获得正确的构建;将重组载体转染HeLa细胞,观察EGFP荧光强度并检测萤光素酶活性。结果:HRE/mCMV启动子调控的报告基因载体具有特异和高效的诱导活性。结论:构建了可以进行特异和高效缺氧诱导的报告基因载体,为其进一步的开发和应用奠定了实验基础。 张翔 杨洁 丁蓉 陈锐 杜德伟 李占亭 赵晶 杨安钢 孙脊峰关键词:报告基因