李勤
- 作品数：70 被引量：128H指数：5
- 供职机构：上海市血液中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市自然科学基金上海市卫生局科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 中国稀有Lu_(null)血型筛查及其LU基因检测被引量：1
- 2012年
- 目的随着我国医疗技术的发展,对于人群中出现频率小于千分之一的稀有血型的临床输配血及其应用,日益得到人们的关注。血站对献血者的血型常规检测未包含稀有血型项目,如何发掘和利用献血者中的稀有血型资源,为临床稀有血型患者输配血服务,值得我们关注和探讨。本研究以上海地区随机献血者中稀有Lunull血型为例,针对性研究该血型在中国人群随机献血者中的频率,检测其血清学及分子学特征,建立该稀有血型献血者数据库,探索该稀有血型资源在临床输配血服务中的应用前景。方法采用单克隆抗-Lub,使用96孔U型板IAT试验方法对上海地区共39897位献血者的Lutheran血型进行筛选。
- 王晨李勤朱自严
- 关键词：LULUNULL配血分子学不规则抗体
- 大熊猫与亚洲黑熊的红细胞膜蛋白质谱检测
- 2021年
- 熊科动物分布于我国的各个地区,不同的生存条件与生活习性导致其机体生理生化存在差异。红细胞作为气体运输的重要载体,对机体代谢及生命学过程有重要作用。本研究中,通过流式分选技术对大熊猫及亚洲黑熊红细胞进行纯化,并通过液相色谱偶联二级质谱的方法,对大熊猫及亚洲黑熊红细胞膜蛋白进行检测。通过检测,同检测到大熊猫红细胞膜蛋白388种,亚洲黑熊红细胞膜蛋白315种,并对上述检测中膜蛋白功能进行分类检索,发现二者红细胞膜蛋白主要功能较为一致,但也发现大熊猫参与能量代谢的膜蛋白略多于亚洲黑熊。
- 邓林华赵俸涌李勤黄山魏明张亚辉王承东李德生朱自严
- 关键词：大熊猫亚洲黑熊红细胞膜蛋白代谢
- 利用流式细胞术定量检测IgG抗-D活性浓度的研究
- 目的利用抗-D国际标准品,通过流式细胞术,检测IgG抗-D的活性浓度,探讨流式细胞术在血型抗体定量中的应用。方法将抗-D国际标准品按浓度梯度稀释,通过流式细胞术读取对应的荧光值,绘制标准曲线。在60 d内的不同时间点上,...
- 张嘉敏杨启修赵俸涌李勤郭忠慧朱自严
- 文献传递
- 中国人群RHD基因连传模式的研究
- 朱自严郭忠慧叶璐夷张嘉敏向东陈和平刘曦王晨沈伟王建莲李勤刘达庄
- 本课题名称为“中国人群RHD基因遗传模式的研究”，受上海市卫生局科学研究基金资助（01432），完成时间为2002.1～2004.12，课题负责人朱自严，完成单位为上海市血液中心。 从临床上讲，除ABO血型系外，RHD...
- 关键词：
- 关键词：RHD基因多态性
- 应用流式细胞术对自身免疫性溶血性贫血患者自身抗体掩盖下血型同种抗体检测的研究被引量：5
- 2022年
- 目的在自身免疫性溶血性贫血(自免溶贫)患者血样的检测中,自身抗体往往易被同种抗体掩盖,本研究试图通过对流式细胞术与传统血清学方法的比较研究,分析两者对自身抗体中混合同种抗体的检测能力差异,为自免溶贫患者输血前检测提供更敏感可靠的方法。方法随机选择使用5例人源抗-D及4例抗-E分别与经验证不具血型特异性的自身抗体按比例梯度混合,配制模拟自免溶贫患者血浆,使用凝胶卡法与流式细胞术分别对上述模拟血浆进行检测。结果三个效价组中(16,32,64),流式方法可检测出效价为自身抗体1/8~1/16的同种抗体,灵敏度均明显强于凝胶卡方法,且检出下限为凝胶卡方法的4倍(P<0.05)。结论流式细胞术较传统血清学方法对自身抗体掩盖下同种抗体的检测具有更高的灵敏度,采用该方法用于自免溶贫患者输血前检查可降低已有同种抗体介导的输血免疫风险,提高此类患者输血安全。
- 赵俸涌张玉宇王中英徐婷李勤张嘉敏向东朱自严
- 关键词：自身抗体流式细胞术血清学方法
- 灰霉菌黑色素合成相关基因参与其生长发育及致病过程
- 灰霉菌(Botryas cinerea)是一种典型的坏死营养型病原真菌,能够引起200多种植物产生灰霉病,已成为仅次于稻瘟病菌的重要植物病害防治病原真菌,世界范围内每年由灰霉病害导致的经济损失高达100000亿美元。课题...
- 张成花何一凡李勤朱品宽王奕文许玲
- 文献传递
- 选择性siRNA干扰FCGRⅡA影响THP-1吞噬调理红细胞被引量：1
- 2020年
- 为探讨能否通过小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)干扰影响巨噬细胞Fcγ受体介导的吞噬作用,采用FCGRⅡA siRNA转染佛波酯(phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)活化人单核细胞THP-1,并设NO-TARGET、GAPDH、no-siRNA(1640)为对照。培养48~72h后,用FCM分析CD14+细胞的CD32、CD32b分布,用CD14的平均荧光强度(mean fluorescence intensity,MFI)值作为内参,得到CD32、CD32b相对MFI值;用Western blotting观察CD32a、CD32b的蛋白表达水平;进行单核细胞单层实验(monocyte monolayer assay,MMA),结合流式细胞术分析THP-1中能吞噬调理红细胞的吞噬百分比。采用配对t检验分析FCGRⅡA组与各对照组间的分布差异。Western blotting结果证实,FCGRⅡA组CD32a量明显减少(分别为NO-TARGET组、GAPDH组、1640组的22%、42%、31%),而CD32b不降低;FCM分析显示,FCGRⅡA组MFI CD32/CD14较NO-TARGET组、1640组、GAPDH组下降(P<0.05),而CD32b无明显减少;同时MMA结果显示,FCGRⅡA组吞噬细胞占比分别比NO-TARGET组、GAPDH组、1640组减少9.6%、9.2%和4.4%。提示siRNA选择性干扰可有效降低Fcγ受体CD32a表达,并降低PMA活化的THP-1吞噬能力,可作为潜在手段干扰输血反应所涉及的巨噬细胞吞噬作用。
- 杨颖李勤张嘉敏赵俸涌杨启修叶璐夷朱自严
- 关键词：THP-1小干扰RNA
- NLRP3炎性小体在单核细胞清除老化红细胞过程中的活化
- 2016年
- 目的分析单核细胞在体外清除老化红细胞时,NLRP3炎性小体是否活化。方法 THP-1细胞经PMA诱导,使其具有吞噬能力,和42℃水浴老化红细胞,及Ig G抗D致敏红细胞分别共培养。镜检观察THP-1对这两种红细胞的吞噬率。使用ELISA及QRT-PCR检测培养上清及THP-1细胞中IL-1β表达量。使用免疫印迹技术检测NLRP3炎性小体的表达量。尼日利亚菌素刺激的THP-1细胞作为NLRP3炎性小体活化的阳性对照组。结果 THP-1细胞对Ig G抗D致敏红细胞、42℃水浴老化红细胞、新鲜红细胞的吞噬率分别是(46.00±3.46)%、(35.32±5.71)%、及(13.72±2.29)%。这3组培养上清中的IL-1β含量分别是(19.85±0.32)pg/m L,(16.91±2.64)pg/m L,及(14.76±0.69)pg/m L。QRT-PCR对IL-1β的检测结果,及免疫印迹对NLRP3炎性小体的检测结果均符合该趋势。差异明显(P<0.05)。结论 THP-1细胞对42℃水浴老化红细胞及Ig G抗D致敏红细胞的清除,分别在体外模拟了涉及CD47–SIRPα通路的非调理性清除模式,及涉及Ig G-FcγR通路的调理性清除模式。这两种老化红细胞的清除机制,均可使单核细胞的NLRP3炎性小体活化,上调促炎细胞因子IL-1β分泌量。
- 李勤周洁张嘉敏赵俸涌朱自严
- 关键词：老化红细胞细胞因子
- 组织血型抗原Le^(y)低表达的人巨核细胞系的建立和鉴定
- 2022年
- 目的应用CRISPR/cas9技术,建立血小板Le^(y)抗原差异化表达的人白血病巨核细胞系,为后续研究Le^(y)抗原在血小板活化中的作用奠定基础。方法选取人巨核细胞白血病细胞DAMI,用Western Blot及流式细胞法确定Le^(y)抗原的表达量;用实时定量PCR方法检测编码Le^(y)抗原合成相关的岩藻糖基转移酶(fucosyltransferase,FUT)基因的表达,确定候选敲除基因,用CRISPR/Cas 9敲除候选FUT基因,使用流式细胞仪分选出Le^(y)抗原低表达的细胞群,培养细胞并鉴定Le^(y)抗原的表达量。用活细胞染色结合流式细胞法监测细胞增殖。结果DAMI细胞上具有大量的Le^(y)抗原表达;FUT1和FUT4在DAMI中有相对较高的mRNA表达,可能对Le^(y)抗原的表达起关键作用;敲除FUT1后的DAMI细胞系Le^(y)抗原的表达量与对照相比有显著降低,细胞增殖能力与野生型细胞相比没有显著改变。结论Le^(y)抗原的生物合成涉及多种FUT基因,对其中主要的FUT进行基因敲除无法彻底阻断Le^(y)抗原的合成,只能降低Le^(y)抗原的表达,本研究应用CRISPR/cas9技术敲除FUT基因建立的稳转人白血病巨核细胞系,为研究Le^(y)抗原对血小板功能的影响和意义奠定了基础。
- 朱慧君马勤勤赵俸涌李勤陆萍
- 关键词：血小板功能岩藻糖基转移酶基因敲除
- 噬菌体展示技术及其在弓形虫研究中的应用被引量：1
- 2004年
- 谭红岩李勤王媛媛钱旻
- 关键词：弓形虫噬菌体展示技术丝状噬菌体病毒颗粒外源基因蛋白基因
