朱立强
- 作品数:6 被引量:40H指数:3
- 供职机构:郑州大学第二附属医院更多>>
- 发文基金:国际科技合作与交流专项项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 杜氏盐藻S腺苷高半胱氨酸水解酶酵母双杂交诱饵载体的构建及自激活和毒性检测被引量:2
- 2012年
- 目的:构建杜氏盐藻S腺苷高半胱氨酸水解酶(SAHH)的酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-SAHH,并检测其对酵母细胞的毒性和自激活作用。方法:应用RT-PCR扩增杜氏盐藻的SAHHcDNA,测序分析后与酵母双杂交诱饵载体pGBKT7连接,构建诱饵载体pGBKT7-SAHH。用PEG/LiAc法将诱饵载体转入AH109和Y187酵母中,通过表型筛选检测诱饵蛋白对酵母有无毒性和自激活作用。结果:成功构建了诱饵载体pGBKT7-SAHH并成功转化到酵母细胞AH109和Y187中,表达的融合蛋白对宿主酵母细胞无毒性。在AH109和Y187酵母细胞中诱饵载体均未激活报告基因HIS3和ADE2,但是激活了报告基因MEL1。结论:诱饵载体pGBKT7-SAHH可用酵母双杂交方法筛选与SAHH相互作用的蛋白。
- 柴丹丹李庆华阎赟梦毛丽红李靓朱立强薛乐勋
- 关键词:酵母双杂交诱饵载体自激活杜氏盐藻
- 基于RNA-seq的杜氏盐藻全转录组测序与分析被引量:7
- 2016年
- 目的:利用RNA-seq技术对杜氏盐藻细胞的全部转录本进行测序、功能分析。方法:提取杜氏盐藻总RNA,反转录得c DNA,在Illumina平台上进行测序,经拼接、组装、聚类后获得全部unigene,并将所得unigene与数据库比对,对其进行功能注释和分类。结果与结论:共得到197 295个unigene,将获得的unigene与NR、SWISSPROT、CDD、KEGG和TREMBI数据库进行比对,有89 800个unigene获得注释。其中95 767个unigene映射到GO的不同功能节点;5 710个unigene获得COG注释,并分为22个功能分类;9 497个unigene获得了KEGG注释,映射到282条信号通路。所得杜氏盐藻的转录组信息为今后相关研究与应用提供了丰富的资源和线索。
- 朱立强李庆华张彦婷朱相展关方霞薛乐勋
- 关键词:杜氏盐藻转录组RNA-SEQ
- 酵母双杂交技术筛选杜氏盐藻cDNA文库中与S-腺苷高半胱氨酸水解酶相互作用的蛋白
- 2016年
- 目的:应用酵母双杂交技术筛选杜氏盐藻c DNA文库中能与S-腺苷高半胱氨酸水解酶(ds SAHH)相互作用的蛋白。方法:将构建好的p GBKT7-ds SAHH诱饵载体转化至酵母细胞Y187,与转化有杜氏盐藻c DNA文库的酵母细胞AH109杂交,从杜氏盐藻c DNA文库中筛选出能与ds SAHH相互作用的蛋白质。扩增所得基因片段全长,并在原核内表达该融合蛋白。随后采用Far-western blot、His pull-down及免疫共沉淀方法验证ds SAHH与目的蛋白在体内、外的相互作用。结果:以ds SAHH为诱饵筛选出3个阳性克隆,扩增得到dsRACK1、ds Met AP1和dse EF1α3个新基因。His pull-down和免疫共沉淀体内外实验证实dsRACK1能与ds SAHH相互作用。结论:dsRACK1是ds SAHH的相互作用蛋白。
- 李庆华张彦婷朱立强柴丹丹关方霞薛乐勋
- 关键词:酵母双杂交蛋白相互作用免疫共沉淀
- 重症监护病房患者尿路感染的危险因素与病原菌分布及耐药性分析被引量:21
- 2017年
- 目的探讨重症监护病房患者尿路感染的危险因素、病原菌分布及耐药性,为重症监护病房患者尿路感染的临床预防治疗实践提供参考依据。方法选取2014年1月-2015年12月医院收治的重症监护病房患者1 621例为研究对象,统计患者的尿路感染发生率,并对导致感染发生的相关因素、致病菌及药敏性进行调查研究。结果 1 621例重症监护病房患者中,发生尿路感染患者289例,尿路感染率为17.83%;年龄、住院时间、GCS评分、昏迷时间、尿路侵入性操作和感染史等因素是导致患者尿路感染的影响因素;289例尿路感染患者共检测出病原菌322株,其中革兰阴性菌199株占61.80%、革兰阳性菌111株占34.47%、真菌12株占3.73%,粪肠球菌和屎肠球菌分别检出54株和34株;54例粪肠球菌对替考拉宁、利奈唑胺和替加环素的耐药率较低;对喹奴普汀/达福普汀的耐药率较高;34例屎肠球菌对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺、替加环素等耐药率较低;对青霉素G、环丙沙星的耐药率较高。结论重症监护病房患者尿路感染情况较为严重,粪肠球菌和屎肠球菌是导致重症监护病房患者尿路感染的主要革兰阳性菌,临床实践中应针对病原菌的药敏试验结果给予患者针对性的治疗方案。
- 朱立强李庆华孙金旗胡溢博陈茂才冀恒涛
- 关键词:粪肠球菌屎肠球菌重症监护病房尿路感染
- 支原体耐药变迁及其与HPV的关系研究被引量:2
- 2017年
- 目的分析郑州地区解脲支原体和人型支原体的流行病学及对常用抗生素的耐药变迁情况,为合理使用抗生素及治疗支原体感染提供依据;同时对支原体与HPV的关系进行研究。方法收集2013~2015年在我院行支原体和HPV检查的样本,对其检测结果进行比较研究。结果 2013~2015年做支原体培养及药敏检测的样本共计30 171例,其中阳性16 230例,阳性率为53.79%,其中单独解脲支原体(UU)阳性13 577例(45.00%),单独人型支原体(MH)阳性255例(0.85%),两者混合感染2 398例(7.95%)。从样本类型上看,送检率由高到低分别为白带、精液、尿道拭子、宫颈分泌物、前列腺液,阳性率最高的标本类型为白带和宫颈分泌物,精液次之,尿道拭子和前列腺液最低。支原体对美满霉素、强力霉素、交沙霉素和四环素的敏感率很高,均在95%左右;对甲砜霉素、克林霉素及环丙沙星的敏感率非常低,均在15%以下;大环内脂类药物中对红霉素、阿奇霉素、克拉霉素的敏感率有上升趋势,而对罗红霉素的敏感率在下降;喹诺酮药物中除了加替沙星其余药物耐药性均很严重。支原体与HPV感染存在相关性,支原体阳性组HPV阳性率高于支原体阴性组,两组阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论支原体的感染情况及药敏情况均不容乐观,并与HPV感染相关,相关医疗机构应做好支原体的筛查宣传防治工作并合理使用抗生素,以减少支原体感染、提高治疗效果的目的。
- 朱立强吴武佳李工厂裴宁何燕霞
- 关键词:解脲支原体人型支原体HPV耐药变迁
- 从血液中分离出一株偶发分枝杆菌被引量:8
- 2015年
- 非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria,NTM)是指除了MTB复合群和麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌。到目前为止,共发现154种NTM,且有增加趋势。Runyon根据菌落色素与生长速度将NTM分为四组,其中Ⅳ组在固体培养基上生长7d内可见菌落,为快速生长分枝杆菌(rapidly growing mycobacteria,RGM),包括脓肿分枝杆菌、龟分枝杆菌、偶发分枝杆菌、耻垢分枝杆菌和草分枝杆菌等。
- 吴武佳李庆华马晓光朱立强
- 关键词:偶发分枝杆菌脓肿分枝杆菌麻风分枝杆菌草分枝杆菌血平板全自动血培养仪