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戴启字
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1
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供职机构:
中国人民解放军
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相关领域:
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合作作者
陆建福
中国人民解放军
邓昆
中国人民解放军
王会英
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钱磊
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杨廷桐
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2012
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鼠抗人AIF高效单克隆抗体的制备
2012年
目的制备抗人凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor,AIF)单克隆抗体(McAb)并对其生物学特性进行鉴定。方法利用Ensembl数据库及抗体设计筛查软件(Dragonfly,USA)对AIF蛋白氨基酸序列进行分析,设计AIF抗原肽免疫动物,采用杂交瘤技术制备抗人AIF McAb并纯化。结果获得了3株可稳定分泌抗人AIF的杂交瘤细胞株,分泌的AIF McAb亚型鉴定重链均为IgGl,轻链为Kappa链。间接EUSA法检测结果显示,制备的抗人AIF McAb效价达到1:252400,纯化后纯度高于95%;。Western blot检测结果显示.制备的抗人AIF McAb存在与抗原带一致的Mr67kD特异条带。免疫组化检测结果显示:制备的抗人AIFMcAb可在体外结合天然的人AIF蛋白。在结肠癌组织细胞中有棕色阳性颗粒表达,说明此抗体也可用于免疫组织化学染色。结论成功制备了高活性、高纯度、高特异性抗人AIF McAb,为进一步研究AIF在肿瘤组织中的凋亡调控机制及寻找临床治疗靶点奠定了基础。
戴启字
邓昆
王会英
杨廷桐
陆建福
钱磊
关键词:
凋亡诱导因子
杂交瘤细胞
单克隆抗体
抗体制备
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