徐苗苗
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
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- 大鼠表皮干细胞中α促黑素细胞激素及其受体的表达被引量：1
- 2014年
- 目的 观察体外培养的大鼠表皮十细胞（ESC）中α促黑素细胞激素（α-MSH）及黑皮质素受体1（MC1R）的表达情况. 方法 采用改良Ⅳ型胶原快速黏附法培养大鼠ESC,倒置相差显微镜下观察细胞生长形态变化,并采用免疫荧光法和流式细胞仪分别观察ESC标志物细胞角蛋白19（CK19）和整合素β1、整合素α6和CD71表达,通过免疫荧光法检测ESC中α-MSH的表达以及ESC标志物与MC1R共染的表达. 结果 （1）倒置相差显微镜下可见,接种10 min后即有细胞贴壁;培养2～3d时有小克隆形成;培养4～5d,细胞增殖明显加快,克隆逐渐增大;培养7～8d,细胞生长至70％ ～ 80％融合,呈铺路石状,折光性好.（2）免疫荧光法检测结果显示所分离的细胞均表达ESC标志物CK19和整合素β1,流式细胞仪检测结果显示所分离的细胞整合素α6阳性表达率为88.1％,CD71阳性表达率为1.3％.综上,所培养的细胞鉴定为ESC.（3）免疫荧光法检测结果显示ESC表达α-MSH,同时CK19与MC1R、整合素α6与MC1R荧光双染也呈阳性表达. 结论 体外培养的大鼠ESC可以表达α-MSH及MC1R.
- 徐苗苗邓先见姚波高成王强王永飞刘倩程勇
- 关键词：表皮干细胞
- 大鼠表皮基底层干细胞体外分离与培养被引量：2
- 2013年
- 目的建立简单、可靠的大鼠表皮基底层干细胞体外分离培养方法。方法取新生大鼠背部皮肤,采用胰酶两步消化法获得单细胞悬液,Ⅳ型胶原差速贴壁法富集干细胞,将慢黏附细胞作为对照组细胞,均以角质形成细胞无血清培养基培养。以β1-整合素和角蛋白19(K19)双重荧光染色鉴定细胞表型,克隆形成实验检测细胞体外增殖能力。结果分离培养的细胞为多角形、呈铺路石样排列,倍增时间约为24h,细胞形态和生长规律符合基底层干细胞的特征。免疫荧光鉴定显示细胞共表达β1-整合素和K19,基底层干细胞克隆形成能力显著强于对照细胞。结论两步消化联合Ⅳ型胶原差速贴壁法获取基底层干细胞简易可行,培养的细胞活力好、表型可靠。
- 邓先见姚波李力徐苗苗顾玮杨策蒋建新
- 关键词：成体干细胞细胞培养技术表皮干细胞
