张碧乾
- 作品数:3 被引量:16H指数:2
- 供职机构:华中师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 大引物PCR定点突变方法的改进被引量:5
- 2009年
- 对大引物PCR定点突变方法进行改进,主要包括:避免在一个PCR反应中同时使用扩增全长基因的常规引物,选择不同载体克隆原始基因和突变基因,通过抗性选择筛选突变子,从而完全避免原始基因的干扰.实验结果证明利用改进后的方法进行基因点突变,可以减少操作步骤,提高突变频率.
- 张碧乾邓会群宫彩霞杨青彭建新洪华珠李爱英
- 关键词:基因克隆
- 美达霉素生物合成中糖基转移酶Med-ORF8定点突变及功能分析
- 美达霉素/(medermycin/)是由链霉菌/(Streptomyces sp AM-7161/)产生的芳香聚酮抗生素,具有一定的抗菌抗肿瘤活性。美达霉素聚酮母核通过稀有的C-C糖苷键与脱氧糖胺相连。前期实验表明美达霉...
- 张碧乾
- 关键词:糖基转移酶定点突变功能分析
- 文献传递
- 分子伴侣协助下抗肿瘤抗生素美达霉素生物合成中的糖基转移酶Med-ORF8的原核表达被引量:11
- 2011年
- 糖基转移酶在天然产物的糖基化修饰过程中起关键作用。目前链霉菌源抗肿瘤抗生素美达霉素(Medermycin)生物合成途径中的糖基转移酶Med-ORF8的原核表达及酶学性质还未有研究。首先通过结构模拟确定Med-ORF8的端部加上His-标签不会影响其三维结构的正确折叠,然后利用2种pET原核表达载体来进行Med-ORF8的原核表达,发现以pET-28a(+)为载体进行表达时,目的蛋白产量非常高,但是以不可溶的包涵体形式为主。当分子伴侣基因(编码大肠杆菌触发因子)与Med-ORF8的编码基因共表达时,在优化诱导条件的情况下,可以有效减少包涵体的形成,提高了Med-ORF8的可溶性表达效率,为Med-ORF8的酶学分析打下基础。
- 万娟邓会群张碧乾王蔚蔡晓凤李爱英
- 关键词:糖基转移酶原核表达分子伴侣