张建祥
- 作品数：10 被引量：24H指数：3
- 供职机构：郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：河南省医学科技攻关计划项目河南省科技攻关计划河南省基础与前沿技术研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 微小RNA-181a、微小RNA-23a和微小RNA-26b在乳腺癌孕激素受体表达中的调控机制被引量：4
- 2017年
- 目的探讨微小RNA（miRNA，miR）-181a、miR-23a和miR-26b对乳腺癌孕激素受体（PR）表达的调控机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）法检测40例乳腺癌患者乳腺癌组织和癌旁组织中miR-181a、miR-23a和miR-26b表达，采用免疫组织化学染色法检测乳腺癌组织和癌旁组织中PR表达。通过定点突变改变孕酮受体（PGR）基因3’端非编码区（3’-UTR）的miR-181a、miR-23a和miR-26b的结合位点的碱基，将突变后的基因连接至psiCHECK2载体，同时构建miR-vec-181a-5p、miR-vec-23a-3p和miR-vec-26b-5p反转录病毒载体，将其转染至MCF-7乳腺癌细胞中。检测转染psiCHECK2载体细胞荧光素酶相对表达水平。采用FQ-PCR法检测转染miR-vec-181a-5p、miR-vec-23a-3p和miR-vec-26b-5p反转录病毒载体后各细胞PR mRNA相对表达水平。结果所有患者癌旁组织miR-181a、miR-23a和miR-26b相对表达水平分别比较差异无统计学意义（t＝0.499、0.717、0.472，P＝0.621、0.478、0.640），乳腺癌组织中miR-181a、miR-23a和miR-26b相对表达水平分别显著低于相应癌旁组织中的表达水平（t＝7.632、6.984、4.382，P值均为0.000）；PR阳性患者乳腺癌组织中的miR-181a、miR-23a和miR-26b相对表达水平均显著低于PR阴性患者（t＝8.441、7.359、4.563，P值均为0.000）。野生型miR-181a、miR-23a和miR-26b共转染48 h时的荧光素酶相对活性分别为0.52±0.03、0.78±0.07和0.78±0.04，突变型miR-181a、miR-23a和miR-26b共转染48 h时的荧光素酶相对活性分别为0.95±0.05、0.93±0.06和1.02±0.05，两者差异有统计学意义（t＝25.546、5.636、12.984，P值均为0.000）。miR-vec-181a-5p、miR-vec-23a-3p和miR-vec-26b-5p反转录病毒载体转染MCF-7细胞6 h后PR mRNA水平均降低，但是miR-181a过表达对PR mRNA相对表达水平的影响可持续至转染后18 h，miR-26b和miR-23a转染组则在12 h后恢复至基础水平。在转染24 h后，所有转染组细胞PR mRNA相
- 张建祥李建华王芳李林谷元廷
- 关键词：乳腺癌孕激素受体微小RNA
- 晚期糖基化终末产物受体对甲状腺乳头状癌侵袭迁移的影响被引量：1
- 2020年
- 目的探讨外泌体(Exosome)中晚期糖基化终末产物受体(RAGE)与Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路对甲状腺乳头状癌侵袭迁移的影响及两者之间的关系。方法人甲状腺乳头状癌细胞株TPC-1购自美国典型菌种保藏中心(ATCC)。设置对照组(NC组)、Exosome组、Exosome+小干扰RNA(siRNA)-RAGE组。采用电镜检测外泌体Exosome大小和形态;蛋白质印迹法(Western blot)检测RAGE、c-Myc、细胞周期蛋白(Cyclin) D1、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和微管蛋白(Tubulin)蛋白表达水平;实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测c-Myc和Cyclin D1 mRNA水平;Traswell检测各组细胞的侵袭能力;划痕实验检测各组细胞迁移。采用双尾t检验。结果电镜检测外泌体大小和形态正常,富含RAGE和CD63蛋白;与NC组比较,Exosome组的RAGE蛋白表达显著升高(t=4.737,P<0.01),与Exosome组比较,Exosome+siRNA-RAGE组的RAGE蛋白表达显著降低(t=2.315,P<0.05),差异均有统计学意义;与NC组比较,Exosome组的c-Myc和Cyclin D1 mRNA和蛋白水平显著增加,Wnt/β-catenin信号通路激活,而siRNA-RAGE可阻止Exosome对此信号通路的激活;与NC组比较,Exosome组的上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白E-cadherin显著降低,Vimentin显著升高(t=4.532、5.260,P<0.01),与Exosome组比较,Exosome+siRNA-RAGE组的E-cadherin显著升高,Vimentin显著降低(t=2.653、2.411,P<0.05),差异均有统计学意义;与NC组比较,Exosome组中的TPC-1细胞侵袭能力[侵袭细胞个数(394±7)个比(182±18)个]和迁移能力[划痕愈合面积(22±3)%比(96±4)%]显著增强(t=3.814、5.260,P<0.01),与Exosome组比较,Exosome+siRNA-RAGE组中的TPC-1细胞侵袭能力[侵袭细胞个数(157±13)个比(394±7)个]和迁移能力[划痕愈合面积(34±4)%比(22±3)%]明显减弱(t=2.512、2.643,P<0.05),差异均有统计学意义。结论甲状腺乳头状癌细胞外泌体中的RAGE可通过激活Wnt/β-catenin信号通路,下调E-cadherin和上调Vimentin,促进EMT进程,
- 马艳梅薛文萍张建祥郑守华邱新光李建华
- 关键词：外泌体晚期糖基化终末产物受体上皮-间充质转化
- 微小RNA-10b靶向蛋白去乙酰化酶4调控雌激素受体阳性MCF-7乳腺癌细胞他莫昔芬耐药性
- 2018年
- 目的探讨微小RNA（miRNA，miR）-10b靶向蛋白去乙酰化酶4（HDACA）调控雌激素受体阳性（ER＋）MCF-7乳腺癌细胞对他莫昔芬的耐药性。方法建立ER＋且他莫昔芬耐药的MCF-7细胞株MCF．．．7TR，实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）法检测MCF-7细胞和MCF-7-TR细胞miR-10b表达水平。分别采用噻唑蓝（MTr）法和锥虫蓝法检测转染pre-miR-10b、miR-10b抑制物、siHDACA的MCF-7细胞、MCF-7-TR细胞在不同他莫昔芬浓度下（0、5、10、15、20、30μmol／L）的增殖能力和活性。采用Westernblot检测HDACA蛋白表达情况。结果以MCF-7乳腺癌细胞miR-10b表达水平和侵袭能力作为标准，MCF-7-TR细胞乳腺癌细胞miR-10b表达水平和侵袭能力较MCF-7乳腺癌细胞分别为7．2±1．1和5．3±1．3。随着他莫昔芬浓度增加，各细胞增殖率均呈下降趋势，其中以MCF-7细胞最为明显，其次为MCF-7-TR＋miR-10b抑制物＋siHDAC4细胞以及MCF-7＋pre-miR-10b＋HDACA细胞，而MCF-7-TR＋siHDACA细胞和MCF-7-TR细胞增殖率下降程度最低。MCF-7细胞和MCF-7-TR＋miR-10b抑制物细胞的迁移能力下降最多，而MCF-7＋pre-miR-10b＋他莫昔芬（10μmol／L）细胞和MCF-7-TR＋他莫昔芬（10μmol／L）细胞的迁移能力比较差异无统计学意义（t=1．116，P=0．272），但显著高于MCF-7细胞和MCF-7-TR＋miR．10b抑制物细胞（t=0．124、10．769、14．569、11．577，P均为0．000）。MCF-7＋pre-miR-10b细胞HDACA蛋白表达水平低于MCF-7细胞，MCF-7-TR细胞HDACA蛋白表达水平MCF-7-TR＋miR-10b抑制物细胞，MCF-7＋siHDAC4细胞HDAC4蛋白表达水平低于MCF-7细胞。结论miR-lOb-HDAC4信号通路可能作为乳腺癌他莫昔芬耐药的一种分子机制。
- 张建祥马艳梅王芳李建华
- 关键词：乳腺癌雌激素受体阳性
- 血浆微小RNA-21鉴别甲状腺滤泡癌与乳头状甲状腺癌被引量：8
- 2018年
- 目的探讨血浆微小RNA（miRNAs，miR）-21在鉴别甲状腺滤泡癌和甲状腺乳头状癌中的应用价值。方法选择45例甲状腺滤泡癌患者、61例甲状腺乳头状癌患者及50例正常人作为研究对象，采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）技术检测血浆中miR-21表达水平。建立受试者工作特征（ROC）曲线，分析miR-21区分甲状腺滤泡癌与乳头状甲状腺癌的截断值（Cut-off值）及敏感性、特异性等指标。结果正常人、甲状腺滤泡癌和例甲状腺乳头状癌患者血浆miR-21相对表达水平分别为0．254±0．123、4．047±1．499、1．274±0．581，3组比较差异有统计学意义（P=0．010），甲状腺滤泡癌患者血浆miR-21相对表达水平显著高于甲状腺乳头状癌患者和正常人（P=0．010）；甲状腺乳头状癌患者血浆miR-21相对表达水平显著高于正常人（P=0．010）。建立以血浆miR-21表达水平为检验变量，以甲状腺滤泡癌和甲状腺乳头状癌为状态变量的ROC曲线，曲线下面积（AUC）为0．931[95％可信区间（CI）：0．890-0．991]。血浆miR-21相对表达水平鉴别甲状腺滤泡癌和甲状腺乳头状癌最佳Cut-off值为2．325。以血浆miR-21相对表达水平≥2．325作为诊断甲状腺滤泡癌的标准，此时该指标鉴别甲状腺滤泡癌和甲状腺乳头状癌的敏感度和特异度分别为85．11％和96．72％，阳性预测值和阴性预测值分别为95．24％和89．39％，约登指数为81．83％。结论检测患者血浆miR-21表达水平有助于甲状腺滤泡癌和甲状腺乳头状癌鉴别，辅助区分滤泡型甲状腺乳头状癌和甲状腺滤泡癌。
- 张建祥马艳梅张素琴王芳李建华
- 关键词：微小RNA-21甲状腺滤泡癌甲状腺乳头状癌
- 微小RNA-124靶向信号传导与转录激活因子3抑制乳腺癌增殖和侵袭的机制被引量：3
- 2017年
- 目的观察微小RNA（miRNA，miR）-124及信号传导与转录激活因子3（STAT3）在乳腺癌组织的表达，探讨miR-124靶向STAT3抑制乳腺癌细胞增殖和侵袭的分子机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）方法检测乳腺癌组织及癌旁组织miR-124的表达，并采用免疫组织化学法检测新鲜乳腺癌组织及癌旁组织中STAT3的表达，分析STAT3与miR-124表达的关系。分别采用miR-124类似物和anti-miR-124转染MDA-MB-231乳腺癌细胞，通过噻唑蓝（MTT）和Transwell侵袭实验检测乳腺癌细胞增殖、侵袭转移能力，采用Western blot法检测STAT3蛋白表达水平。结果乳腺癌组织和癌旁组织中STAT3表达阳性率和miR-124相对表达量分别为65.12%和1.26±0.28、12.79%和2.84±0.42，两组STAT3表达阳性率和miR-124相对表达量差异均有统计学意义（χ2＝49.510，P＝0.000；t＝29.027，P＝0.000）。转染anti-miR-124的MDA-MB-231细胞36 h时后的570 nm处吸光度（A570）值显著提高，转染miR-124类似物的MDA-MB-231细胞36 h时后的A570显著降低。未转染MDA-MB-231细胞、仅采用脂质体2000转染MDA-MB-231细胞、anti-miR-124转染细胞和miR-124类似物转染细胞侵袭细胞数分别为46、45、87、32个。miR-124类似物转染MDA-MB-231细胞后STAT3蛋白的表达水平低于未转染MDA-MB-231细胞和anti-miR-124转染MDA-MB-231细胞。结论miR-124能够靶向抑制STAT3进而调控乳腺癌细胞的增殖和侵袭。
- 张建祥李建华王芳谷元廷
- 关键词：乳腺癌信号传导与转录激活因子3增殖
- 半乳糖凝集素-1表达对甲状腺乳头状癌增殖、迁移和侵袭的影响被引量：2
- 2018年
- 目的 观察半乳糖凝集素-1（Galectin-1）在甲状腺乳头状癌组织中的表达,并探讨其对甲状腺乳头状癌增殖、迁移和侵袭的影响.方法 选择123例在我院进行甲状腺手术治疗的患者作为研究对象,采用免疫组织化学法检测手术切除组织中Galectin-1和Galectin-3表达,分析两种蛋白诊断甲状腺良性病变组织、甲状腺乳头状癌组织的价值.以甲状腺乳头状癌细胞株TCP-1作为研究对象,沉默Galectin-1基因表达,比较未沉默和沉默Galectin-1后TPC-1细胞增殖、迁移和侵袭能力.结果 Galectin-1和Galectin-3诊断甲状腺乳头状癌的敏感度、特异度、阳性似然比和阴性似然比分别为94.1％和96.8％、29.406和0.061、94.7％和81.9％以及5.199和0.072.Galectin-1诊断甲状腺乳头状癌的特异度显著高于Galectin-3（χ2=8.453,P=0.004）,两者诊断甲状腺乳头状癌的敏感度差异无统计学意义（χ2=0.253,P=0.617）.未转染TPC-1细胞株和仅转染脂质体TPC-1细胞株在转染12、24、36、48、72 h时的570 mm波长处吸光度（A570）值显著高于干扰Galectin-1基因的TPC-1细胞[未转染TPC-1细胞株t=2.470、4.478、8.860、17.539,P=0.019、0.000、0.000、0.000;仅转染脂质体TPC-1细胞株t=3.471、3.527、7.580、20.270,P=0.001、0.001、0.000、0.000].染TPC-1细胞株和仅转染脂质体TPC-1细胞株划痕直线最大宽度显著低于敲除Galectin-1基因的TPC-1细胞（P=0.000）.Transwell小室侵袭实验结果显示,未转染TPC-1细胞株和仅转染脂质体TPC-1细胞株侵袭细胞数量显著高于敲除Galectin-1基因的TPC-1细胞（P=0.000）.结论 Galectin-1能够促进甲状腺乳头状癌增殖、迁移和侵袭.
- 张建祥马艳梅邱新光李建华
- 关键词：甲状腺乳头状癌增殖迁移
- 乳腺癌FHIT表达及其临床价值的meta分析被引量：3
- 2017年
- 目的:系统评价FHIT蛋白在乳腺癌中的表达及临床意义。方法:检索中国知网、万方数据、维普网、Pubmed、Springer Link等数据库,按照纳入、排除标准选取文献,应用Rev Man 5.3.5.0及STATA 13.0软件对纳入的研究进行meta分析。结果:共纳入29篇文献,共计2 546例乳腺癌组织标本。Meta分析结果显示,乳腺癌组织中FHIT的表达低于乳腺良性病变组织[OR(95%CI)=0.12(0.06,0.23)]、癌旁正常组织[OR(95%CI)=0.05(0.02,0.11)]和正常组织[OR(95%CI)=0.06(0.02,0.14)];FHIT在乳腺癌Ⅰ-Ⅱ期中的表达高于Ⅲ-Ⅳ期[OR(95%CI)=2.51(1.87,3.38)]、肿瘤长径小于等于2 cm组高于大于2 cm组[P<0.01,OR=1.43,95%CI(1.10,1.84)]、高分化组高于低分化组[OR(95%CI)=2.18(1.33,3.57)]、无腋窝淋巴结转移组高于有转移组[OR(95%CI)=2.24(1.58,3.16)]、雌激素受体阴性组低于阳性组[OR(95%CI)=0.46(0.34,0.62)]、孕激素受体阴性组低于阳性组[OR(95%CI)=0.51(0.30,0.86)],患者不同年龄、绝经状态和组织分型中FHIT的表达差异无统计学意义。结论:FHIT表达缺失在乳腺癌发生、发展中起重要作用,与乳腺癌的临床病理特征有密切关系。
- 张建祥王方袁博周亚楠胡泷姜文静宗红
- 关键词：乳腺癌FHITMETA分析病例对照研究
- 瑞诺脱细胞生物组织补片在乳头乳晕成形术中的应用
- 2014年
- 目的:观察瑞诺脱细胞生物组织补片应用于乳头乳晕成形术的术后疗效。方法:选取100例需要行乳头乳晕成形术的患者,随机分为实验组(n=50)和对照组(n=50)。实验组使用瑞诺脱细胞生物组织补片行乳头乳晕成形术,对照组转移自身腺体瓣行乳头乳晕成形术。结果:实验组术后疗效满意率为90%,对照组术后疗效满意率为72%,实验组患者疗效优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:瑞诺脱细胞生物组织补片是一种理想的可用于乳头乳晕成形术的生物材料。
- 张建祥田艳艳李靖若李晓莉谷元廷
- 关键词：生物材料
- 基于Donabedian模型的三级公立医院日间医疗质量评价体系研究
- 2024年
- 目的:构建三级公立医院日间医疗质量评价指标体系,为客观评价日间医疗质量提供科学依据。方法:采用文献检索和半结构化访谈法确定初始指标,设计专家函询问卷,采用德尔菲法和层次分析法构建基于Donabedian模型的三级公立医院日间医疗质量评价指标体系并确定各指标权重。结果:两轮专家函询的问卷有效回收率分别为90.91%和100%,专家权威系数为0.892,专家协调系数为0.137~0.246(P<0.05),各级指标判断矩阵均通过一致性检验(CR<0.1),最终构建的日间医疗质量评价指标体系包含3个一级指标、11个二级指标和38个三级指标。结论:本研究构建的三级公立医院日间医疗质量评价体系具有较高的科学性和可靠性,能够客观、全面地评价日间医疗质量,促进日间医疗质量规范化管理和持续改进。
- 张钰珠刘新奎赵艳婷杨林朋路亚柯张建祥田庆丰刘尊尊王硕果韩慧欣
- 关键词：评价指标德尔菲法层次分析法
- 微小RNA-145靶向蛋白激酶B3调节甲状腺癌细胞生长和转移的机制被引量：3
- 2018年
- 目的探讨微小RNA（miRNA，miR）-145及蛋白激酶Bγ（Akt3）甲状腺癌组织中的表达，以及miR-145靶向Akt3调节甲状腺癌细胞增殖和侵袭的机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）法检测手术切除的49例新鲜甲状腺癌组织及癌旁组织miR-145和Akt3的表达，分析Akt3与miR-145表达之间的关系。以甲状腺癌细胞株（TPC-1）作为研究对象，采用噻唑蓝（MTT）和Transwell侵袭实验检测miR-145对甲状腺癌细胞生长、侵袭转移能力的影响，Akt3表达水平采用Western blot进行。结果反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测结果显示，甲状腺癌组织和癌旁组织中miR-145相对表达量分别为1．65±0．33和3．13±0．53，Akt3相对表达量分别为2．96±0．85和0．83±0．32，两者差异有统计学意义（P=0．000）；TPC-1细胞和原发性甲状腺滤泡细胞miR-145相对表达量分别为1．91±0．57和3．47±0．59，Akt3相对表达量分别为3．62±1．04和0．764±0．32，两者差异有统计学意义（P=0．000）。转染抗miR-145的TPC-1细胞吸光度（A）570增加最为迅速，转染miR-145类似物的TPC-1细胞A5，0上升最慢（P=0．000）。与未转染TPC-1细胞和仅采用脂质体2000转染的TPC-1细胞比较，抗miR-145转染细胞侵袭细胞数显著增加（P=0．000），而miR-145类似物转染的TPC-1细胞侵袭数量显著降低（P=0．000）。miR-145类似物转染与未转染的TPC-1细胞磷酸化Akt（p-Akt）和Akt-3蛋白表达水平明显低于抗miR-145转染TPC-1细胞。结论miR-145能够靶向下调Akt3表达水平抑制甲状腺癌细胞的增殖和侵袭。
- 张建祥马艳梅张素琴王芳李建华
- 关键词：甲状腺癌增殖
