张亚晶
- 作品数:4 被引量:5H指数:1
- 供职机构:南方医科大学公共卫生与热带医学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广州市科技计划项目国家留学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 卵黄蛋白原启动子驱动的防御素基因在转基因按蚊中的高效可调控性表达
- 2007年
- 遗传修饰蚊虫,使其不传播疾病或使蚊虫种群密度下降,是一种控制蚊媒传染病的新策略.该策略实施的前提是能够改造蚊虫的基因组,使得效应分子在适宜启动子驱动下,在转基因蚊中高效特异表达.本研究旨在评价冈比亚按蚊卵黄蛋白原启动子驱动的中华按蚊防御素基因在转基因斯氏按蚊中的表达效果.克隆冈比亚按蚊卵黄蛋白原启动子序列,并将其与已克隆的中华按蚊防御素基因顺式插入穿梭载体pSLFa,然后再插入转化载体pBac[3xP3-DsRedafm]的AscⅠ位点;将重组质粒pBac[3xP3DsRed-AgVgT2-DefA]和帮助质粒phsp-pBacDNA显微注射入斯氏按蚊的虫卵.通过观察G1代幼虫眼部的特异荧光筛选出两株转基因阳性品系;Southernblot证明,防御素基因的表达元件以单拷贝的形式插入到蚊基因组中;RT-PCR分析显示,防御素基因在吸血后雌蚊的脂肪体中得到了特异高效表达,而且防御素的表达比较内源性卵黄蛋白原能维持较长的时间,因此多次吸血后的防御素表达呈现出可调性非周期型,这对其发挥抗病原作用非常重要.结果表明,按蚊属蚊虫的卵黄蛋白原启动子和防御素基因在不同种按蚊中功能保守,可以作为转基因抗疟研究中的候选调控分子和功能分子.
- 陈晓光张亚晶郑学礼王春梅
- 关键词:卵黄蛋白原启动子防御素转基因按蚊
- 中华按蚊防御素基因cDNA序列和基因组序列的克隆、鉴定及生物信息学分析
- 防御素(Defensins)是一类新近发现的,具有广谱抗微生物和细胞毒活性的可诱导的阳离子抗菌肽;在受到外来病原的侵袭时,蚊虫会通过激活其内源的防御素基因并在其脂肪体(相当于哺乳动物的肝脏)中大量表达,从而形成有效的防御...
- 张亚晶郑学礼陈晓光
- 蚊虫基因对疟原虫发育的影响
- 2005年
- 疟原虫在传播至脊椎动物宿主之前 ,必须在其传播媒介按蚊体内经历一个复杂的发育过程。蚊吸食了带有疟原虫配子体的血液后 ,配子体即开始在蚊体内发育 :动合子穿过蚊胃上皮细胞后转变为卵囊。疟原虫入侵蚊胃的同时 ,蚊的先天免疫系统被激活 ,但是 ,迄今为止没有公开发表的证据表明蚊虫的基因能够影响疟原虫的发育。本文通过基因抑制的方法发现 :在冈比亚按蚊体内 ,存在着对疟原虫发育具有保护作用的C型凝集素 (CTLs)及对其有拮抗作用的富含亮氨酸的蛋白质 (LRR)。
- Mike A.OstaGeorge K.ChristophidesFotis C.Kafatos张亚晶陈晓光
- 关键词:蚊虫胃上皮细胞C型凝集素体内发育动合子蚊体内
- 中华按蚊防御素基因cDNA序列和基因组序列的克隆及鉴定被引量:5
- 2006年
- 目的克隆中华按蚊防御素基因全长cDNA序列及基因组序列,并对其进行鉴定和生物信息学分析。方法根据已发表的埃及伊蚊和冈比亚按蚊等的防御素基因序列设计引物,提取中华按蚊总RNA并构建其基因组文库,分别进行多轮RT-PCR和巢式PCR扩增,将所得片段进行克隆、测序,并应用相关生物信息学软件对序列进行鉴定和分析。结果从中华按蚊基因组文库中扩增出完整的防御素基因组序列(由两个外显子和一个内含子组成)以及5′端和3′端的非编码序列(UTR)片段,总长度为2256bp;从中华按蚊总RNA中扩增出大小为324bp的cDNA片段,经测序证实为中华按蚊防御素基因全长cDNA序列,其开放阅读框共编码107个氨基酸,成熟肽部分具有40个氨基酸残基。结论首次克隆出中华按蚊防御素基因全长cDNA序列及基因组序列,为进一步的功能研究奠定了基础。
- 张亚晶陈晓光郑学礼王春梅
- 关键词:中华按蚊防御素CDNA序列基因组序列克隆