廖学文
- 作品数：9 被引量：25H指数：3
- 供职机构：上海市农业科学院更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 一种球虫卵囊培养保存液及应用方法
- 本发明属于兽医寄生虫领域，涉及一种球虫卵囊培养保存液及应用方法。其特征在于，该培养保存液以盐酸聚六亚甲基胍为主要成份。其应用方法为，从含球虫卵囊的鸡粪或者肠道组织中分离纯化新鲜的球虫卵囊，加入适量的盐酸聚六亚甲基胍溶液，...
- 樊生超缪德年姚惠娟廖学文肖长峰
- 文献传递
- 犬干扰素的基因工程研究与应用被引量：6
- 2013年
- 犬干扰素不仅可用于防治犬病毒病,而且可用于犬寄生虫病和皮肤病等各类疾病的防治,具有广阔的应用前景。为了满足研究和临床应用的需要,基因工程犬干扰素的生产成为研究的重点和关键。本文系统综述了基因工程犬干扰素研究和应用情况,以为深入研究提供参考。
- 郭佳宏廖学文姚惠娟樊生超缪德年
- 关键词：干扰素基因工程
- 犬干扰素的基因工程研究与应用
- 犬干扰素不仅可用于防治犬病毒病，而且可用于犬寄生虫病和皮肤病等各类疾病的防治，具有广阔的应用前景。为了满足研究和临床应用的需要，基因工程犬干扰素的生产成为研究的重点和关键。本文系统综述了基因工程犬干扰素研究和应用情况，以...
- 缪德年廖学文姚惠娟樊生超
- 重组牛α-干扰素的原核表达与纯化被引量：1
- 2015年
- 为在大肠杆菌表达系统中高效表达牛α-干扰素(bovine interferon-α,Bo IFN-α),将经密码子优化后的牛α-干扰素成熟蛋白基因合成并克隆到表达载体p Cold II中,转化大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,获得可溶性的表达蛋白。对重组菌表达条件进行优化,结果显示在IPTG浓度为0.64 mmol/L,诱导温度为15℃,诱导时间为9 h的条件下,可溶性目的蛋白的表达量最高。重组蛋白经镍柱纯化后的纯度为99.2%,表达量为36 mg/L菌液。重组蛋白在MDBK细胞上抗水泡性口炎病毒的活性为1×106U/mg。
- 张弦缪德年廖学文黄克和张克春
- 关键词：原核表达纯化
- 猪流行性腹泻病毒检测与S蛋白中和抗原表位基因分析被引量：1
- 2016年
- 应用RT-PCR对2015年江苏、安徽、山东9个猪场的腹泻样品(新鲜粪便、肠道组织等)进行PEDV和TGV检测,并对检测到的一株PEDV(CHNJPK2015)的纤突蛋白中和抗原表位基因进行克隆测序和遗传进化分析。结果表明:9个猪场PEDV检测阳性率为100%,PEDV个体阳性率为63.89%,TGEV均未检出,说明本次流行的仔猪腹泻病主要是由PEDV感染引起的。所测毒株与参考毒株可分为3个群,CHNJPK2015株与AVCT12、Br1/87、CHM2013、LZC、SM98等毒株的S蛋白中和抗原表位基因的遗传距离较近,核苷酸序列同源性达99.5%—99.8%,处于同一群;而与2014年中国各地分离的CH/GDZQ/2014、FJ-FQ 2014、FJ-ZP 2014、PEDV-LY、PEDV-WS、PZ1406、SC1402、SH1404和疫苗株CV777序列的遗传距离较远,核苷酸序列同源性为92.9%—96.2%,处于不同的群。
- 丁卫星王荣谈郭佳宏廖学文缪德年
- 关键词：猪流行性腹泻病毒S蛋白进化树
- 重组猪γ-干扰素的表达与纯化被引量：1
- 2014年
- 将猪γ-干扰素（Porcine interferon-γ，PolFN-γ）成熟蛋白的基因合成克隆到表达载体pET30a中，转化大肠杆菌BL21（DE3）中表达。对重组菌的表达条件进行优化，发现在IPTG体积浓度为0．04mmol／L、诱导时间为3h、诱导温度为30℃的条件下，目的蛋白大部分以可溶形式表达。重组蛋白经亲和柱纯化后的纯度大于90％，表达量达40mg／L菌液。重组蛋白在MDBK细胞上抗滤泡性口炎病毒的活性为2×10^6U／mg。
- 王荣谈郭佳宏彭丽英廖学文姚慧娟樊生超缪德年
- 关键词：猪Γ-干扰素可溶性表达纯化
- 一种优化的PCV2d ORF2基因及病毒样颗粒的制备方法
- 本发明属于分子生物学领域，公开了一种优化的PCV2d ORF2基因及其病毒样颗粒的制备方法。本发明对编码猪圆环病毒2d亚型Cap蛋白的编码基因序列优化后，构建表达工程菌表达系统进行Cap蛋白的表达。在适合的表达条件下，该...
- 缪德年夏叶李春华郑琳琳王宏华黄冬薄宗义廖学文
- 猪圆环病毒2d亚型病毒样颗粒的制备被引量：4
- 2017年
- 为了制备猪圆环病毒2d亚型病毒样颗粒,根据GeneBank上公布的PCV2d亚型HB-MC1株的序列和大肠杆菌密码子使用频率表优化合成PCV2d亚型ORF2基因,克隆到原核表达载体pET30a(+),获得重组表达质粒pET30a-Cap2d,将该质粒转化入Rosetta(DE3)宿主菌,IPTG诱导表达。利用SDS-PAGE对目的基因的表达及产物的可溶性进行分析,利用Western blot和琼脂凝胶免疫扩散试验鉴定重组蛋白的免疫原性,并利用电镜技术鉴定重组Cap2d蛋白形成的病毒样颗粒。SDS-PAGE结果表明PCV2d的ORF2基因在大肠杆菌中得到了高效可溶性表达;电镜下观察超声破碎后的上清中存在大量直径约17 nm的病毒样颗粒;Western blot和琼脂凝胶免疫扩散试验结果表明该可溶性蛋白可与猪PCV2阳性血清特异性结合,具有较好的免疫原性。本研究为制备PCV2d亚单位疫苗和相关检测试剂盒奠定了基础。
- 夏叶郭佳宏廖学文李春华易建中凌红丽蒋贻海缪德年
- 关键词：ORF2基因可溶性表达病毒样颗粒
- 一株抑菌型地衣芽孢杆菌的快速分离与鉴定及其对4株耐药致病菌的抑制作用被引量：12
- 2017年
- [目的]本文旨在分离具有良好抗菌活性的芽孢杆菌菌株作为抗生素替代品材料。[方法]通过热处理和抑菌板双重筛选对革兰氏阳性菌和阴性菌均具有抗菌活性的芽孢杆菌,并通过形态学、生理生化和分子生物学方法鉴定分离菌株。体外测定分离菌株发酵上清液对4株耐药致病菌的抑制作用。[结果]分离到6株对革兰氏阳性菌和阴性菌均具有抗菌活性的芽孢杆菌,其中分离菌株BB11的抑菌活性最强,对沙门氏菌C782和大肠杆菌K_(12)D_(31)的抑菌圈直径分别达15.34和6.26 mm。染色镜检BB11菌为带芽孢的革兰氏阳性菌,理化特性与芽孢杆菌相符。BB11菌的16S rRNA序列与地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)BCRC 15413序列的相似度在99%以上,gyr B基因序列与B.licheniformis BCRC 12826序列的相似度达到100%。BB11菌株的发酵上清液对具有多重耐药的致病性大肠杆菌K88、K99、987P和沙门氏菌C782均表现出较好的抑杀作用。[结论]分离到的地衣芽孢杆菌BB11具有用于开发多功能微生态制剂的潜能。
- 李明振廖学文屈汶辉黄克和缪德年张克春
- 关键词：地衣芽孢杆菌RRNA
