崔晓峰
- 作品数:22 被引量:162H指数:7
- 供职机构:浙江大学更多>>
- 发文基金:国家杰出青年科学基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 中国番茄黄化曲叶病毒和烟草曲茎病毒AC2和AC4蛋白为RNA沉默的抑制子被引量:8
- 2004年
- 中国番茄黄化曲叶病毒Y10分离物(TYLCCNV-Y10)能系统侵染本氏烟(Nicotiana benthamiana) 等寄主植物,但不诱导明显的症状,而烟草曲茎病毒Y35分离物(TbCSV-Y35)单独侵染则诱导曲叶等症状.对表达GFP基因的转基因本氏烟接种实验表明,TYLCCNV-Y10不回复已建立的GFP沉默,也不抑制GFP沉默的建立;而TbCSV-Y35能部分回复已建立的沉默,且能在新叶抑制沉默的建立.农杆菌共浸润实验结果表明,TYLCCNV-Y10和TbCSV-Y35的AC2和AC4蛋白都能抑制GFP的局部沉默,并延迟GFP的系统沉默,为RNA沉默的抑制子.比较共浸润区GFP mRNA的积累结果表明,Y10 AC2与Y 35AC2蛋白具有相近的RNA沉默抑制能力,而Y35 AC4蛋白是一个比Y10 AC4蛋白更强的抑制子.因而,TbCSV-Y35和TYLCCNV-Y10致病性差异的原因可能与二者AC4蛋白的功能差异有关.
- 崔晓峰周雪平
- 关键词:中国番茄黄化曲叶病毒烟草曲茎病毒RNA沉默抑制子
- 植物病毒卫星DNAβ分子、侵染性克隆及表达载体制备方法
- 本发明公开了一种植物病毒卫星DNAβ分子、侵染性克隆及表达载体制备方法。该植物病毒卫星DNA分子即赛葵黄脉病毒卫星DNAβ,全序列长1348bp,与双生病毒DNA-A序列无同源性,含有一段约115nt的保守区域,一个11...
- 周雪平谢艳崔晓峰陶小荣李正和
- 文献传递
- 烟草曲茎病毒复制蛋白基因的原核表达和免疫定位被引量:2
- 2004年
- 利用PCR方法从烟草曲茎病毒 (TbCSV)Y35分离物的病株中获得复制蛋白 (Rep)基因 ,将其克隆到原核表达载体pGEX 4T 1上获得重组质粒pGEX Y35Rep。重组质粒导入大肠杆菌BL2 1(DE3)pLysS中 ,IPTG诱导表达后发现部分Rep融合蛋白以可溶性形式表达。利用GST Sepharose 4B亲和层析柱纯化了Rep的融合蛋白 ,免疫家兔获得Rep蛋白的抗体。对TbCSV侵染烟草中Rep蛋白的亚细胞分布研究发现 ,Rep蛋白主要分布于含有细胞核的组份中。利用免疫胶体金技术对感病烟草中Rep蛋白进行了定位 。
- 崔晓峰李云琴李桂新周雪平
- 关键词:烟草曲茎病毒
- 烟草曲茎病毒DNAβ分子、表达载体及外源基因表达方法
- 本发明公开了一种烟草曲茎病毒DNAβ分子、表达载体及外源基因表达方法。该烟草曲茎病毒DNAβ分子全基因组序列与SEQ ID No.5~No.8中任意一个序列至少有70%的同源性。本发明提供的表达载体是以一种粉虱传双生病毒...
- 周雪平李正和陶小荣谢艳崔晓峰
- 文献传递
- 基于特征识别的CAD/CAPP信息集成
- 该文研究内容的重点是基于特征识别的产品特征信息的识别和组织.对单个零件工程图通过二维特征识别的方法,自动提取几何特征信息;通过几何特征之间的关联和规则匹配,获取实体特征信息以及实体的属性信息.然后,在二维工程图样的基础上...
- 崔晓峰
- 关键词:CADCAPP信息集成
- 文献传递
- 双生病毒基因组结构、变异及病毒致病机理研究
- 周雪平谢艳崔晓峰陶小荣钱亚娟李正和
- 研究对病毒基因组(DNA-A)及DNAβ的比较分析表明双生病毒与伴随的卫星DNA之间存在共进化关系,明确了DNAβ是双生病毒引起病害典型症状所必需的,而DNAβ分子互补链编码的βC1基因是一个重要致病因子,βC1蛋白能以...
- 关键词:
- 关键词:双生病毒基因组致病机理
- 双生病毒——一类值得重视的植物病毒被引量:68
- 2003年
- 双生病毒是世界范围内广泛发生的一类植物单链DNA病毒,已在多种作物上引起严重危害。重组是导致双生病毒变异和病害流行的重要原因。近年来,在单组份双生病毒中发现有新型卫星DNA分子——DNAβ,DNAβ是病毒致病所必需的。本文就双生病毒的危害性、病毒的重组、DNAβ的发现及与致病性的关系、双生病毒与伴随的小分子DNA形成病害复合体、双生病毒DNA-A和小分子DNA的进化关系等问题进行了简要评述。
- 周雪平崔晓峰陶小荣
- 关键词:双生病毒DNA进化
- 病毒诱导的基因沉默及其在植物基因功能研究中的应用被引量:29
- 2004年
- RNA介导的基因沉默是近年来在生物体中发现的一种基于核酸水平高度保守的特异性降解机制 .病毒诱导的基因沉默 (virusinducedgenesilencing ,VIGS)是指携带植物功能基因cDNA的病毒在侵染植物体后 ,可诱导植物发生基因沉默而出现表型突变 ,进而可以研究该目的基因功能 .至今 ,已经建立了以RNA病毒、DNA病毒、卫星病毒和DNA卫星分子为载体的VIGS体系 ,这些病毒载体能在多种寄主植物 (包括拟南芥、番茄和大麦 )上有效抑制功能基因的表达 .VIGS已开始应用于N基因和Pto基因介导的抗性信号途径中关键基因的功能研究、抗病毒相关的寄主因子研究以及植物代谢和发育调控研究 .在当前植物基因组或EST序列大量测定的情况下 。
- 陶小荣周雪平崔晓峰钱亚娟
- 关键词:基因功能病毒载体
- 烟草曲茎病毒 AC4基因的原核表达与免疫定位被引量:3
- 2004年
- 利用 PCR方法从烟草曲茎病毒 ( Tb CSV) Y3 5分离物的病株中获得 AC4基因 ,将其克隆到原核表达载体 p ET-3 0 a上获得重组质粒 p ET-Y3 5 AC4,重组质粒导入大肠杆菌 BL2 1 ( DE3 ) p Lys S中 ,IPTG诱导后 SDS-PAGE发现 ,AC4蛋白已在大肠杆菌中获得了表达。利用 Ni2 +-NTA亲和树脂纯化了 AC4重组蛋白 ,免疫家兔获得 AC4蛋白的多克隆抗体。利用免疫胶体金技术对感病烟草中AC4蛋白进行定位发现,TbCSV AC4蛋白主要在细胞质的叶绿体和线粒体中积累。
- 李云琴崔晓峰胡东维李桂新周雪平
- 关键词:烟草曲茎病毒原核表达
- 植物病毒卫星DNAβ分子、侵染性克隆及表达载体制备方法
- 本发明公开了一种植物病毒卫星DNAβ分子、侵染性克隆及表达载体制备方法。该植物病毒卫星DNA分子即赛葵黄脉病毒卫星DNAβ,全序列长1348bp,与双生病毒DNA-A序列无同源性,含有一段约115nt的保守区域,一个11...
- 周雪平谢艳崔晓峰陶小荣李正和
- 文献传递