孙斯凡
- 作品数:45 被引量:83H指数:5
- 供职机构:南京中医药大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目国家中医临床研究基地业务建设科研专项更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学更多>>
- 柴黄益肾颗粒对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1及Smad3表达的影响
- 孙斯凡张浩军李平
- 文献传递
- EPHX2基因过表达质粒的构建及意义探讨
- 2014年
- 目的:构建LETO、OLETF大鼠EPHX2基因过表达重组质粒,观察其在人胚肾细胞(human embryonic kidney293T,HEK293T)中的表达,及对HEK293T细胞NF-κBp65 mRNA表达的影响。方法:提取LETO、OLETF大鼠肾脏组织总RNA,RT-PCR方法扩增编码EPHX2基因的cDNA,克隆至T-载体并测序,经亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/V5-His,构建两型大鼠EPHX2过表达重组质粒,酶切鉴定并测序,采用磷酸钙共沉淀法转染HEK293T细胞系。Western Blot方法检测EPHX2融合蛋白的表达,RT-PCR方法检测EPHX2基因过表达对HEK293T细胞NF-κBp65表达水平的影响。结果:(1)两个重组质粒均含有完整EPHX2 cDNA,测序证实OLETF型大鼠较LETO型大鼠EPHX2重组质粒有五个核苷酸位点的改变。(2)转染HEK293T细胞后,Western Blot证实融合蛋白成功表达;(3)TNF-α刺激增加HEK293T细胞中NF-κBp65mRNA表达;(4)EPHX2基因过表达促进TNF-α刺激后的HEK293T细胞中NF-κBp65 mRNA表达升高(P<0.05)。结论:成功构建LETO型及OLETF型大鼠EPHX2过表达重组质粒(L-EPHX2/V5、O-EPHX2/V5),可在HEK293T细胞中过表达。为进一步探讨EPHX2基因在糖尿病肾病发生发展中的作用奠定了基础。
- 费敏李平赵婷婷孙斯凡古艳婷王华张浩军杨靖
- 关键词:重组质粒NF-ΚBP65糖尿病肾病
- 基于课程思政理念的病案导入法在中医内科学教学中的应用——以名家水肿案为例被引量:4
- 2022年
- 课程思政是将德育元素融入每一门课程中,让课堂教学成为落实思政教育、立德树人的主阵地。中医内科学是中医药专业的主体课程。以专业知识为载体,融入思政内容,将会对学生在理论学习、临床实习以及未来的职业生涯中形成正确的人生观、价值观、职业观起到重要的引导作用。此文以水肿为例,基于课程思政理念,将病案导入教学法应用于中医内科学教学中,精心设计教学内容,引导学生自主学习,力图突破教学瓶颈。这对于专业课教师提升素质修养、发挥育人职能,对于中医院校学生提高专业素养、树立专业自信均具有深远意义。
- 孙斯凡陈继红陈继红王旭何晓瑾孙伟
- 关键词:中医内科学水肿
- 糖尿病肾病ETFβ表达变化与脂毒性关系研究被引量:3
- 2015年
- 目的通过检测ETFβ在糖尿病肾病中的改变,探讨其与脂毒性的关系。方法体内实验采用腹腔注射链脲佐菌素合并单侧肾切除建立糖尿病肾病模型,并评价肾小管损伤情况,检测ETFβ在肾皮质中的表达变化。体外建立脂肪酸诱导肾小管细胞NRK 52E凋亡模型,构建ETFβ重组质粒,并将其转染至NRK 52E细胞,观察ETFβ过表达对脂肪酸诱导细胞凋亡的作用。结果链脲佐菌素合并单侧肾切除诱导的糖尿病肾病大鼠模型中,肾小管明显损伤,ETFβmRNA和蛋白表达均下降。脂肪酸可诱导NRK 52E细胞凋亡,过表达ETFβ可减少凋亡。结论糖尿病肾病模型中ETFβ表达下降,过表达ETFβ可降低脂肪酸诱导的肾小管细胞凋亡。
- 王华张浩军赵婷婷严美花董晞孙斯凡张并璇李平
- 关键词:糖尿病肾病脂肪酸凋亡
- 一种穴位药物辅助吸收装置
- 本发明公开了一种穴位药物辅助吸收装置,包括支架、传动行走机构、按摩轮总成、敷贴,支架呈工字形,包括纵向支架和横向支架,纵向支架上设置有纵向槽孔,纵向槽孔的一个内侧面上设有沿纵向槽孔延伸的齿条,纵向支架的两端分别设有挡板,...
- 安金龙孙伟赵静孙斯凡
- 文献传递
- 一种穴位药物辅助吸收装置
- 本发明公开了一种穴位药物辅助吸收装置,包括支架、传动行走机构、按摩轮总成、敷贴,支架呈工字形,包括纵向支架和横向支架,纵向支架上设置有纵向槽孔,纵向槽孔的一个内侧面上设有沿纵向槽孔延伸的齿条,纵向支架的两端分别设有挡板,...
- 安金龙孙伟赵静孙斯凡
- 文献传递
- 二氢生物蝶呤还原酶基因启动子核心调控区域的定位及研究
- 2015年
- 目的:前期结果表明QDPR参与糖尿病肾病的发生发展。本研究对QDPR基因启动子核心调控区域定位,分析其转录调控功能。方法:构建含有大鼠QDPR基因翻译起始位点上游2 092 bp序列的萤火虫萤光素酶报告基因重组质粒。生物信息学预测潜在的核心启动子区域,并构建该区域多个片段缺失的萤火虫萤光素酶报告基因重组质粒。分别瞬时转染HEK293T细胞,通过双萤光素酶报告基因活性分析,定位QDPR基因启动子的核心调控序列。结果:与-2 092^-1序列相比,缺失QDPR基因上游-529^-116序列的萤光素酶活性只有原来的1%(P<0.01),而仅保留-529^-1序列的萤光素酶活性是原来的64%(P<0.05)。将QDPR基因上游-529^-116序列逐段缺失后发现,分别缺失-529^-429,-428^-250,-141^-116三段序列的萤光素酶活性都显著升高(P<0.01),而缺失-249^-142序列的萤光素酶活性则显著下降(P<0.05)。结论:大鼠QDPR基因的核心启动子可能位于翻译起始密码子上游-529^-116区域内,该区域内存在多个转录因子Sp1的结合位点,可能是QDPR基因潜在的正性调控区和负性调控区。
- 刘蓉蓉文玉敏赵海玲张浩军孙斯凡李平
- 关键词:核心启动子
- 黄连素对2型糖尿病肾病大鼠及QDPR基因启动子的作用及机制研究
- 背景: 糖尿病(diabetic mellitus,DM)是严重危害国民健康的重大疾病。2010年我国学者发表在《New England Journal of Medicine》对我国流行病学调查表明:20岁以上成年人...
- 孙斯凡
- 关键词:糖尿病肾病黄连素基因启动子动物模型
- 人EPHX2基因启动子荧光素酶报告基因载体的构建及其转录活性分析
- 董晞张浩军李忻古艳婷孙斯凡李平
- 大鼠Uqcrfs1重组质粒的构建及其在HEK293T细胞中的表达
- 2012年
- 目的:构建大鼠Uqcrfs1的重组质粒并检测其在人胚胎肾293T细胞中的表达。方法:应用RT-PCR方法从大鼠肾脏组织总RNA中扩增出编码Uqcrfs1的cDNA,克隆至pUM-T载体并测序,然后亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/V5-His,酶切鉴定及测序正确后以磷酸钙共沉淀法瞬时转染HEK 293T细胞,使用RT-PCR、Western Blot方法检测重组质粒在转录及蛋白水平的表达。结果:测序结果证实PCR扩增得到编码Uqcrfs1的cDNA序列正确;磷酸钙共沉淀法转染HEK293T细胞后,在基因转录与蛋白表达水平,结果达到预期。结论:成功构建大鼠Uqcrfs1的重组质粒,该重组质粒可在HEK293T中过表达。
- 孙斯凡古艳婷李平王红盼董晞杨靖赵婷婷王旭
- 关键词:重组质粒糖尿病肾病