夏国盛
- 作品数:6 被引量:8H指数:2
- 供职机构:南方医科大学南方医院更多>>
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- siRNA抑制FHL2对胃肠癌细胞β-catenin活性的影响被引量:2
- 2010年
- 目的本研究旨在调查通过siRNA抑制FHL2表达后对β-catenin活性及其下游基因sur-vivin表达的影响,探讨两者在肠癌发生中的协同作用。方法 (1)PCR扩增含有β-catenin作用位点、长为340bp的survivin基因启动子片段,克隆入PGL3-basic载体,构建荧光素酶报告质粒pluc340。(2)脂质体瞬时转染法将β-catenin活性报告质粒pTOPFLASH、pFOPFLASH和pluc340转染入胃肠癌及正常细胞株,双荧光素酶法测定其启动子活性,并评价其对fhl2siRNA的反应。(3)RT-PCR方法检测基因表达。结果成功构建了survivin启动子片段pluc340;荧光素酶活性检测显示:β-catenin转录活性在胃肠癌细胞明显高于正常细胞;siRNA抑制FHL2表达后,β-catenin转录活性下降,survivin表达降低。结论抑制FHL2的表达能够降低β-catenin转录活性及下游癌基因的表达,干扰Wnt信号通路,说明fhl2有望成为肠癌治疗的新靶点。
- 张文静郭蒸夏国盛王玮牛凌云姜泊王继德
- 关键词:FHL2Β-CATENINSURVIVIN肠癌
- 肝螺杆菌MCSTP的基因克隆及生物信息学分析
- 2009年
- 目的克隆肝螺杆菌(H.hepaticus)甲基基团接受趋化信号转导蛋白(MCSTP)全基因,并应用生物信息学方法对其进行分析。方法以肝螺杆菌全基因组作为模板,设计肝螺杆菌MCSTPc1977特异性引物,利用PCR方法扩增目的基因片段,连接至原核表达载体pET22b(+),从而构建原核表达质粒pET22b+/MCSTP并测序鉴定。应用生物信息学方法分析MCSTP基因的序列同源性及其结构特征。结果克隆的MCSTP基因经测序可知与GenBank公布的肝螺杆菌标准株ATCC51449序列一致性达99%,仅第1160bp处由A变为T。利用生物信息学方法进行分析可发现此基因与空肠弯曲杆菌、幽门螺杆菌具有非常低的相似性,表明其在微生物界中具有一定的特异性。结论成功构建pET22b+/MCSTP重组质粒,并通过生物信息学技术进行序列及结构分析,为进一步研究其生物学功能及致病机制提供了线索和依据。
- 牛凌云白杨郭蒸夏国盛李菁秦和平王继德
- 关键词:肝螺杆菌基因克隆生物信息学
- 几种药物代谢相关蛋白基因在结肠癌细胞中的表达与化疗敏感性的相关性
- 目的:
本研究首先通过检测5种不同结肠癌细胞株中TS、TP、GST-π、pgp、MRP1等药物代谢相关基因的mRNA和蛋白表达水平的差异,结合5-FU、L-OHP的体外药敏实验,探讨TS、TP、GST-π、pg...
- 夏国盛
- 关键词:结肠癌干细胞化疗敏感性药物代谢蛋白表达
- 文献传递
- 肝螺杆菌甲基基团接受趋化信号转导蛋白的克隆表达及纯化被引量:1
- 2009年
- 目的克隆肝螺杆菌(H.hepaticus)甲基基团接受趋化信号转导蛋白(MCP)基因,制备MCP重组蛋白,为以后检测我国人群肝螺杆菌感染率提供实验基础。方法利用PCR方法扩增目的基因片段,连接至原核表达载体pET22b(+),构建MCP的原核表达质粒pET22b+/MCP。将质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,通过Ni-NTA亲和层析系统纯化重组蛋白。结果构建了原核表达质粒pET22b+/MCP,含有该质粒的大肠杆菌经1 mmol/L IPTG诱导4 h后表达一相对分子质量约14 kD的重组蛋白,经Ni-NTA亲和层析系统纯化获得了MCP的纯化重组蛋白rhMCP。结论获得了肝螺杆菌MCP的纯化重组蛋白,为进一步利用血清学方法调查我国人群肝螺杆菌感染率提供可能。
- 牛凌云夏国盛李菁郭蒸秦和平王继德白杨
- 关键词:肝螺杆菌克隆重组蛋白
- XAF1对胃肠癌细胞有丝分裂与凋亡的影响
- 2010年
- 目的研究XAF1对胃肠癌细胞周期的影响,以及细胞周期与凋亡诱导的关系。方法在胃肠癌细胞AGS和Lovo中瞬时/稳定转染XAF1,应用免疫荧光和流式细胞技术研究XAF1与MPM2分布及表达的关系,并观察XAF1过表达对化疗药物诱导的凋亡有无影响。结果免疫荧光染色发现XAF1过表达的细胞其MPM2染色也呈强阳性,并出现细胞凋亡的典型形态;XAF1显著增加细胞对血清剥夺及5-FU和cisplatin诱导凋亡的敏感性。结论XAF1能够增加胃肠癌细胞对凋亡的敏感性,因而有望成为肿瘤基因治疗的重要靶标。
- 张文静夏国盛郭蒸牛凌云姜泊王继德
- 关键词:XAF1细胞周期凋亡胃肠癌
- 结肠癌细胞中TS、TP、GST-π、Pgp、MRP1表达对奥沙利铂化疗敏感性的预测价值被引量:5
- 2010年
- 目的探讨结肠癌细胞中TS、TP、GST-π、Pgp、MRP1表达对奥沙利铂化疗敏感性的预测价值。方法 Realtime RT-PCR检测不同结肠癌细胞株中TS、TP、GST-π、Pgp、MRP1mRNA的表达,结合奥沙利铂的体外药物敏感实验,分析TS、TP、GST-π、Pgp、MRP1的表达水平与奥沙利铂化疗敏感性的相关性。结果奥沙利铂IC50均值与GST-π(rs=0.609,P=0.001)、Pgp(rs=0.428,P=0.026)、TP(rs=0.394,P=0.042)呈正相关,与TS(rs=0.322,P=0.101)、MRP1(rs=0.090,P=0.655)无显著相关关系。结论检测结肠癌细胞中TP、GST-π、Pgp表达水平对奥沙利铂化疗敏感性具有一定预测价值,对临床医生合理选择结肠癌化疗方案具有指导意义。
- 夏国盛王亚东张文静郭蒸牛凌云王继德
- 关键词:胸苷酸合成酶多药耐药相关蛋白1奥沙利铂化疗敏感性