周红
- 作品数：124 被引量：442H指数：11
- 供职机构：江苏大学临床医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金江苏省普通高校研究生科研创新计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学哲学宗教更多>>
- oxLDL/β2GPⅠ/β2GPⅠ-Ab复合物调节A7r5表型转化及脂质转运分子表达被引量：3
- 2019年
- 目的探讨氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白Ⅰ/抗β2糖蛋白Ⅰ抗体复合物(oxLDL/β2GPⅠ/β2GPⅠ-Ab complex)对大鼠胸主动脉平滑肌细胞株(A7r5)表型转化和细胞表面脂质转运分子的影响,以及toll样受体4(toll like receptor 4,TLR4)信号通路在其中的作用。方法分别用oxLDL、oxLDL/β2GPⅠ复合物、oxLDL/抗β2GPⅠ抗体复合物、β2GPⅠ/抗β2GPⅠ抗体复合物、oxLDL/β2GPⅠ/抗β2GPⅠ抗体复合物刺激A7r5,收集总RNA和蛋白质,利用实时定量PCR、western blot及免疫荧光染色等方法检测细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、巨噬细胞表面标志CD68、半乳糖凝集素3(galectin-3,LGALS3)、B类清道夫受体3(CD36)和ATP结合盒转运体(ATP-binding cassette transporter)A1/G1(ABCA1/ABCG1)的表达情况;用TLR4阻断剂TAK-242(5μmol/L)或c-Jun氨基末端激酶1/2(c-Jun N-terminal kinases 1/2,JNK 1/2)阻断剂SP600125(90 nmol/L)预处理的方式,观察TLR4及下游信号分子在oxLDL/β2GPⅠ/β2GPⅠ-Ab复合物诱导A7r5表型转化和脂质转运分子表达变化的作用。结果 oxLDL/β2GPⅠ/β2GPⅠ-Ab复合物明显上调细胞CD68和LGALS3水平,降低α-SMA表达,而TAK-242能够反转该现象;oxLDL/β2GPⅠ/β2GPⅠ-Ab复合物能够促进细胞表达CD36,同时抑制ABCA1/ABCG1表达,TAK-242和SP600125能够逆转该过程。结论 oxLDL/β2GPⅠ/β2GPⅠ-Ab复合物促进A7r5细胞向"巨噬样"细胞发生表型转变,调节脂质转运相关分子的表达,增强脂质向细胞内转运的能力;TLR4和JNK1/2与该过程密切相关。
- 张鹏周红何超陈芋丹王婷张贵婷姚雨叶吴倩倩王韧
- 关键词：平滑肌细胞表型改变
- β2GPI/aβ2GPI通过激活TLR4抑制THP-1巨噬细胞对氧化型低密度脂蛋白的摄取被引量：1
- 2018年
- 目的探讨β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体复合物(β2GPI/aβ2GPI)对巨噬细胞脂质摄取功能和B型清道夫受体CD36表达的影响,以及Toll样受体4(TLR4)在该过程中的作用。方法用100 ng/mL佛波酯(PMA)将THP-1人单核细胞诱导为THP-1巨噬细胞,通过形态学变化和1,1'-二十八烷基-3,3,3',3'-四甲基吲哚碳花菁高氯酸盐标记的氧化低密度脂蛋白(DiI-oxLDL)吞噬试验加以鉴定。用RPMI1640培养液、β2GPI、抗β2糖蛋白I抗体(aβ2GPI)和β2GPI/aβ2GPI处理THP-1巨噬细胞,实时荧光定量PCR和Western blot法检测TLR4 mRNA和蛋白水平。用RPMI1640培养液、氧化低密度脂蛋白(oxLDL)、oxLDL联合β2GPI/aβ2GPI和oxLDL联合LPS处理THP-1巨噬细胞,油红O染色观察胞内脂质积累,免疫荧光细胞化学染色法检测CD36的表达,实时荧光定量PCR检测CD36 mRNA水平,Western blot法检测CD36蛋白水平。利用TLR4阻断剂TAK-242(1μg/mL)预处理THP-1巨噬细胞,观察抑制TLR4对上述刺激下THP-1巨噬细胞脂质积累和CD36表达的影响。结果PMA处理后,THP-1细胞呈现巨噬细胞形态并具备脂质吞噬能力;与RPMI1640相比,β2GPI/aβ2GPI处理可显著增加THP-1巨噬细胞TLR4表达;与单独oxLDL处理相比,oxLDL联合β2GPI/aβ2GPI能够抑制THP-1巨噬细胞的脂质积累和CD36表达,阻断TLR4可以部分逆转这一现象。结论β2GPI/aβ2GPI能激活TLR4抑制巨噬细胞对oxLDL的摄取和CD36表达。
- 何超周红张贵婷陈芋丹张鹏王韧吴倩倩姚雨叶匡铭
- 关键词：THP-1巨噬细胞
- B7家族负性共刺激分子在急性髓系白血病中的表达特征被引量：1
- 2021年
- 目的:探讨B7家族4种负性共刺激分子B7-H1、B7-H3、B7-H4和B7-H6在人急性髓系白血病(AML)中的表达及分布特征。方法:采用流式细胞术检测8株AML细胞株和22例初治AML患者骨髓原始细胞中B7-H1、B7-H3、B7-H4和B7-H6膜蛋白的表达,设8例志愿者骨髓血细胞为对照,并应用阳性表达率、平均荧光强度(MFI)及原始细胞和淋巴细胞的MFI比值(MFI比)分析各B7分子的表达特征。结果:AML细胞株中,多数细胞膜表面表达B7-H3和B7-H6,B7-H3表达较强的细胞株有SKM-1和SHI-1,B7-H6表达较强的细胞株有K562和HL-60;B7-H1仅在HEL中表达较强,而其余AML细胞中基本不表达;B7-H4在AML细胞株中均不表达。初治AML患者的骨髓血细胞中,B7-H3和B7-H6在原始细胞膜表面的表达率及原始细胞和淋巴细胞的MFI比均显著高于对照组;B7-H3高表达组的外周血白细胞数显著高于低表达组,B7-H6高表达组的年龄也显著高于其低表达组;B7-H3和B7-H6在急性单核细胞白血病患者中表达显著升高。B7-H1和B7-H4在初治AML患者中的表达水平低下或不表达,且与对照组相比均无显著差异。结论:4种B7家族负性共刺激分子在AML中的表达和分布存在差异。B7-H3和B7-H6在初治AML患者的原始细胞中异常高表达,提示可能参与急性髓系白血病的发生发展。
- 张凌逸张巍林江陈巧云钱军袁倩周静东张婷娟张婷娟
- 关键词：流式细胞术急性髓系白血病膜蛋白
- 案例教学法在医学检验专业课教学中的运用被引量：34
- 2009年
- 在本科医学检验专业的临床血液学检验和临床基础检验学等专业课教学中实施案例教学法。这一教学方法在学生临床能力培养等方面收到了良好效果,受到学生的欢迎。
- 谷俊侠许文荣周红胡嘉波孙晓春
- 关键词：案例教学法临床思维
- Toll样受体4在抗β_2GPⅠ-β_2GPⅠ复合物诱导小鼠腹腔巨噬细胞表达炎症因子中的作用被引量：4
- 2014年
- 目的观察抗β2GPⅠ-β2GPⅠ复合物刺激小鼠腹腔巨噬细胞表达TNF-α、IL-1β、IL-6的效果,探讨Toll样受体4(TLR4)在其中的作用。方法对C3H/He N(TLR4正常)小鼠、C3H/He J(TLR4缺陷)小鼠腹腔注射非特异性兔Ig G(R-Ig G)、抗β2GPⅠ抗体,72 h后用细胞免疫荧光法检测小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α、IL-1β、IL-6的表达水平;抗β2GPⅠ-β2GPⅠ复合物对小鼠腹腔巨噬细胞进行体外刺激,荧光定量PCR法检测细胞表达上述因子的mRNA水平,western blot法检测其蛋白质分泌水平。结果抗β2GPⅠ抗体刺激的C3H/He N小鼠腹腔巨噬细胞产生TNF-α、IL-1β、IL-6的水平明显高于C3H/He J小鼠,并经细胞免疫荧光法验证;经体外刺激后,荧光定量PCR法结果显示抗β2GPⅠ-β2GPⅠ复合物诱导C3H/He N小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达水平高于空白组或C3H/He J刺激组(P均<0.01);western blot结果显示C3H/He N来源细胞TNF-α、IL-1β、IL-6分泌均显著高于C3H/He J来源细胞(P均<0.01)。结论抗β2GPⅠ-β2GPⅠ复合物能够促进小鼠腹腔巨噬细胞炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的表达,TLR4为介导此过程的受体之一。
- 孔祥民周红解鸿翔谢娅超何超成思于尹婧夏龙飞
- 关键词：TOLL样受体4小鼠腹腔巨噬细胞炎症因子
- 参苓白术散联合二甲双胍治疗对2型糖尿病肥胖患者miR-221、MCP-1、TNF-α的影响被引量：26
- 2020年
- 目的探讨miR-221、单核细胞趋化蛋白(MCP-1)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在参苓白术散联合二甲双胍治疗2型糖尿病(T2DM)肥胖患者中表达水平的变化。方法86例T2DM肥胖患者随机分为对照组(二甲双胍治疗)和实验组(参苓白术散+二甲双胍联合治疗),持续治疗6个月,于治疗前、治疗1周、治疗3个月及治疗6个月采集2组空腹静脉血标本,实时荧光定量PCR检测miR-221的表达水平,ELISA法测血清MCP-1和TNF-α的水平,高效液相色谱法(HPLC)检测糖化血红蛋白(GHb),化学发光法检测胰岛素和C肽,己糖激酶法测定葡萄糖(Glu),并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);Pearson相关性分析miR-221与MCP-1、TNF-α、HOMA-IR、GHb、Glu之间的相关性。结果与治疗前比较,T2DM肥胖患者血清MCP-1、TNF-α、HOMA-IR、GHb水平在治疗后呈降低趋势,且治疗3个月后明显降低(P<0.05);而miR-221水平呈升高趋势,且治疗3个月后明显升高(P<0.05)。与对照组同时相点比较,实验组T2DM肥胖患者在治疗3个月后血清MCP-1、TNF-α、HOMA-IR、GHb水平均明显降低(P<0.05),而miR-221表达水平明显升高(P<0.05)。Pearson相关性分析结果表明,T2DM患者miR-221与HOMA-IR(r=-0.684,P=0.000)、MCP-1(r=-0.795,P=0.000)、TNF-α(r=-0.612,P=0.000)、Glu(r=-0.485,P=0.000)、GHb(r=-0.591,P=0.000)均呈负相关。结论参苓白术散联合二甲双胍治疗通过增加miR-221的表达,降低炎症因子(MCP-1、TNF-α)的表达,缓解T2DM肥胖患者的胰岛素耐受及高血糖。
- 孙露阳张欢妍于雪冰彭俊华周红
- 关键词：MIR-2212型糖尿病肥胖参苓白术散单核细胞趋化蛋白1
- 基于通用质粒标准品的实时荧光定量PCR检测组织因子剪接异构体F3tv1及F3tv2被引量：1
- 2012年
- 目的建立基于通用质粒标准品的实时荧光定量PCR(qPCR)法检测人组织因子(TF)两种剪接异构体(F3tv1和F3tv2)。方法设计基因特异性上游引物与通用下游引物,通过引物末端延伸法将2种扩增产物进行序列简并,用于构建通用质粒标准品。用qPCR法检测人白血病细胞株THP-1、Jurkat及外周血单核细胞中F3tv1与F3tv2的表达,分析该法的线性范围与特异性。结果所建qPCR方法对F3tv1与F3tv2扩增特异,线性范围均为108～101copies/μL。THP-1与外周血单核细胞中F3tv1相对表达量分别为(5.70×10-4)±(2.62×10-5)与(1.79×10-4)±(4.37×10-5);F3tv2分别为(4.94×10-5)±(2.19×10-6)与(2.98±2.18)×10-6,Jurkat细胞株F3tv1与F3tv2均未检出。结论建立的qPCR方法可对TF两种剪接异构体同时进行精确、定量地检测,为深入研究TF的选择性剪接调控机制提供实验依据。
- 穆原周红胥亚张晓蕾王婷
- 关键词：选择性剪接实时荧光定量PCR
- 组织因子(TF)和蛋白酶激活受体(PARs)在肿瘤细胞的表达及其作用被引量：11
- 2008年
- 目的探讨组织因子(tissue factor,TF)和蛋白酶激活受体(protease-activated receptors,PARs)在肿瘤细胞的表达及其作用。方法采用双抗夹心酶联免疫吸附试验、发色底物法、免疫细胞化学染色法、逆转录PCR等检测SW620、SW480、95 D、LTEP-α-2 BGC803、SGC7901、MGC803等肿瘤细胞株的TF、PAR1和PAR2表达;利用相关的激动剂、拮抗剂及单克隆抗体重点处理SW620细胞,观察TF、PAR1及PAR2对细胞增殖、迁移能力及白细胞介素8(IL-8)分泌的影响作用。结果不同肿瘤细胞株均表达TF,但表达程度有所不同;PAR1和PAR2在肿瘤细胞的表达呈现基因和蛋白水平的不一致;凝血因子Ⅶa、PAR1和PAR2的激动剂均可促进SW 620细胞的增殖、迁移和IL-8的分泌;抗TF抗体、抗PAR2抗体和PAR2拮抗剂均可明显抑制相应刺激物诱导的细胞增殖、迁移及IL-8的分泌。结论TF及PARs(主要为PAR2)在结肠癌细胞株SW620表面大量表达,增强细胞的增殖、迁移能力及IL-8的分泌。TF部分通过细胞表面PAR2影响肿瘤细胞的生物学特性。
- 周红胡红心石文霞王婷
- 关键词：蛋白酶激活受体肿瘤细胞白细胞介素-8
- EGCG干预LPS诱导的THP-1细胞TLR4及下游通路的活化被引量：3
- 2016年
- 目的:探讨表没食子儿茶素-3-没食子酸酯(EGCG)对细菌脂多糖(LPS)诱导的人单核细胞株THP-1 Toll样受体4(TLR4)及下游信号转导通路的干预作用。方法:采用不同浓度的EGCG和LPS处理THP-1细胞,MTT检测细胞增殖能力;实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)检测细胞TLR4和肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA的表达;Western blotting检测TLR4以及下游信号分子胞外信号调节激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p38的蛋白水平变化;ELISA检测细胞培养上清TNF-α蛋白含量。结果:EGCG(20 mg·L-1)能降低LPS刺激的THP-1细胞TLR4(蛋白和mRNA)的表达(P<0.05);EGCG(5,10,20 mg·L-1)能抑制TLR4下游分子ERK,JNK,p38的磷酸化,并呈现一定的浓度依赖性(P<0.05);同时,EGCG(20 mg·L-1)能干预LPS刺激的细胞TNF-α(蛋白和mRNA)的表达(P<0.05)。结论:EGCG可通过干预LPS刺激的TLR4表达及下游分子ERK,JNK,p38磷酸化,抑制细胞TNF-α表达,这可能是EGCG的抗炎机制之一。
- 王婷周红夏龙飞何超于尹婧成思
- 关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯TOLL样受体4肿瘤坏死因子Α
- 氟伐他汀对人THP-1细胞TLR4及下游信号转导通路的影响被引量：1
- 2014年
- 目的探讨氟伐他汀对脂多糖(LPS)刺激的人急性单核细胞白血病细胞系(THP-1)Toll样受体4(TLR4)及下游信号转导通路的干预作用。方法采用不同剂量的氟伐他汀、LPS处理THP-1细胞,MTT法检测细胞增殖情况,实时荧光定量RTPCR(qRT-qPCR)检测细胞中TLR4和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA的表达,western blot检测TLR4及下游磷酸化胞外信号调节激酶(ERK)、磷酸化核因子κB(NF-κB p65)蛋白的表达水平。ELISA法测定细胞培养上清中TNF-α蛋白的含量。结果氟伐他汀(10 mg/L)降低LPS刺激的THP-1细胞TLR4(蛋白质和mRNA)的表达(t分别为7.55、7.80,P均<0.05),1、5、10mg/L氟伐他汀能显著抑制LPS刺激的下游分子ERK的磷酸化(q分别为11.78、18.15、18.88,P<0.05);亦能抑制LPS刺激的NF-κB p65的磷酸化(q分别为5.13、6.87、11.68,P<0.05)。同时,氟伐他汀(10 mg/L)能显著干预LPS刺激的细胞TNF-α(蛋白质和mRNA)的表达(q分别为4.23、3.01,P<0.05)。结论氟伐他汀可通过干预LPS刺激的TLR4表达及下游分子ERK、NF-κB p65的磷酸化,抑制THP-1细胞TNF-α的表达,可能为氟伐他汀的抗炎机制之一。
- 王婷周红解鸿翔胥亚刘敬敬张晓蕾
- 关键词：氟伐他汀细菌脂多糖胞外信号调节激酶核因子ΚB
