史荣华
- 作品数：3 被引量：15H指数：2
- 供职机构：扬州大学兽医学院江苏省动物预防医学重点实验室更多>>
- 发文基金：长江学者和创新团队发展计划江苏高校优势学科建设工程项目江苏省教育厅重大基础研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 抗鸡β_2微球蛋白单克隆抗体的制备及其特性鉴定被引量：1
- 2013年
- 为制备抗鸡β2微球蛋白(β2-M)单克隆抗体(MAb),本研究以合成的多肽TF-29作为免疫原免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术筛选出特异性的抗鸡β2-M杂交瘤细胞株(3D1和6E7),亚类鉴定均为IgG1/κ链;间接ELISA测定3D1和6E7腹水效价分别为1∶25 600和1∶204 800。应用western blot和间接免疫荧光鉴定MAb的特异性显示,其不仅能够与原核表达产物也能够与真核细胞表达的β2-M特异性结合,还能够与禽类巨噬细胞系HD11中天然的β2-M特异性反应。3D1和6E7也能够特异性识别正常鸡血清与血浆中游离的β2-M。以上结果表明,本研究应用多肽筛选出抗鸡β2-M MAb,其效价稳定并具有良好的特异性,为深入探索鸡β2-M在免疫学中的功能提供实验依据。
- 刘秋郁川徐文才史荣华钱琨金文杰秦爱建
- 关键词：多肽单克隆抗体
- 抗鹅细小病毒单克隆抗体的制备及其免疫荧光检测方法的建立被引量：7
- 2013年
- 为建立免疫荧光检测鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)的方法,本研究利用超速离心纯化的GPV作为免疫原,制备了3株抗GPV特异性单克隆抗体,依次命名为GPV-Mab-6C8、GPV-Mab-1B9、GPV-Mab-2H8。试验结果表明,3株抗GPV抗体特异性良好,并能够中和GPV对鹅胚成纤维细胞的感染能力。利用抗GPV单抗作为一抗,FITC标记的羊抗鼠IgG为二抗,建立了检测GPV的间接免疫荧光方法(indirect immunofluorescence assay,IFA),该方法不仅能够检测鹅胚成纤维细胞中的GPV,还能够检测发病鹅组织冰冻切片中的GPV。本研究制备的抗GPV特异性单克隆抗体和建立的检测GPV的免疫荧光方法,为今后GPV细胞活疫苗的检测评价和临床诊断提供了技术手段。
- 郭卉涂飞吕亚楠史荣华金文杰邵红霞钱琨秦爱建
- 关键词：鹅细小病毒单克隆抗体间接免疫荧光
- 禽白血病病毒衣壳蛋白单克隆抗体研制及其双夹心ELISA的建立被引量：7
- 2013年
- 为制备禽白血病病毒(ALV)核衣壳蛋白p27的单克隆抗体,本研究以原核表达的融合蛋白GST-ALV p27免疫小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,通过间接免疫荧光(IFA)和间接ELISA进行筛选,制备了5株能够稳定传代并分泌抗p27单抗的杂交瘤细胞株,分别命名为5D3、4F12、5B10、1C5和3C6,亚类鉴定3C6为IgG2b,其余为IgG1。通过IFA、Western-blot及竞争抑制ELISA,表明该5株单抗与J亚群禽白血病病毒(ALV-J)呈阳性反应,而与其他常见禽源病毒无交叉反应。利用5D3和4F12单抗建立了双抗体夹心ELISA方法,经663份临床样本验证,该方法与商品化试剂盒的符合率达到95.17%,证明所研制的针对ALV p27蛋白的单抗及建立的双抗体ELISA方法具有较高的应用价值。
- 尹丽萍秦爱建钱琨邵红霞金文杰史荣华梁有志杭柏林孙薇薇
- 关键词：禽白血病病毒P27双抗体夹心ELISA
