台玉磊
- 作品数:12 被引量:42H指数:3
- 供职机构:河南农业大学更多>>
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- Sus scrofa interferon epsilon-1基因的克隆与序列分析被引量:1
- 2012年
- [目的]克隆分析Sus scrofa interferon epsilon-1基因,以期为其生物学功能研究奠定基础。[方法]利用Homo sapiens interferon epsi-lon 1(IFNE1)序列(NM_176891.3)对猪HTG库进行搜索,通过对获得的2个片断(CU074336、AC127471)的序列分析,在5'-UTR和3'-UTR设计1对克隆引物,对7日龄仔猪的胃组织进行RT-PCR,将PCR产物克隆、测序,并进行相关分析。[结果]同源性分析结果表明,猪SIFNE1与人、小鼠interferon epsilon-1基因cDNA编码区(CDS)的同源性分别为83.6%和69.2%;蛋白序列同源性分别为76.2%和55.2%。推测其氨基酸序列信号肽为第1~21位氨基酸,IFabd结构域为第59~176位氨基酸,结构特征与人、小鼠的interferon epsi-lon-1相一致。[结论]该研究克隆了Sus scrofa interferon epsilon-1基因,为进一步研究SIFNE1基因的生物学功能奠定了基础。
- 杜会坡台玉磊王伟杰杨国宇
- 关键词:克隆
- 猪肿瘤抑制基因候选5的克隆与序列分析
- 2009年
- 基于电子延伸序列,克隆了仔猪肿瘤抑制基因候选5(TUSC5),并初步分析其组织分布情况;获得了TUSC5基因的全长序列636bp,包括开放阅读框架(ORF)534bp,编码177个氨基酸。克隆的仔猪TUSC5基因与人、小鼠、大鼠的TUSC5基因序列的同源性分别为83.5%,82.4%,82.6%,推测的氨基酸序列同源性分别为71.2%,77.5%,78%,成功克隆了猪TUSC5基因。
- 张志强杨国宇王伟杰韩立强王静武宇晓臧猛台玉磊
- 关键词:克隆
- CD147基因在家兔肠道的克隆与结构预测被引量:2
- 2009年
- 基于电子延伸序列,克隆并分析兔CD147基因。采用兔十二指肠黏膜组织提取总RNA,进行RT-PCR反应,测序并进行结构预测。克隆的兔CD147基因包含一个完整的开放阅读框架,全长为810bp,编码由270个氨基酸残基组成的CD147前体蛋白,推导的氨基酸序列信号肽为1~16个氨基酸。氨基酸序列与牛、人、褐鼠、野猪的同源性分别为62.5%,65.9%,59.5%和66.3%,三级结构预测表明CD147具有2个免疫球蛋白类似区。试验成功克隆了兔CD147基因,注册到GenBank(Accession.EU650668),并预测其三级结构,为进一步研究其生物学功能奠定基础。
- 贾海丽韩立强杨国宇钟凯郭豫杰台玉磊刘涛李平王艳玲
- 关键词:CD147克隆
- 荧光定量PCR检测仔猪断奶前后水通道蛋白基因mRNA表达差异
- 水通道蛋白(Aquaporins,AQPs)是指一类可以选择性高效转运水分子的细胞膜通道蛋白,研究表明水通道蛋白在消化道上皮细胞表达丰富,并参与肠内黏液的分泌。采用仔猪超早期断奶(SEW)技术而导致的仔猪腹泻是早期断奶仔...
- 台玉磊
- 关键词:仔猪断奶期水通道蛋白
- 文献传递
- 猪肌肉素基因的cDNA克隆与表达被引量:1
- 2008年
- 从人肌肉素基因出发,在dbEST数据库中进行同源性搜索,找到七个有较高同源性的Expressed Sequence Tag(DY426490,CF787546,AJ660979,AJ664670,AJ663820,AJ680159,DN106254)。通过拼接和进一步RT-PCR实验验证,获得猪肌肉素基因全长cDNA序列,其全长651bp,开放阅读框为54~452bp,编码有132个氨基酸。同源性分析结果表明,与人、小鼠和大鼠的肌肉素基因cDNA编码区(CDS)同源性分别为87.2%、77.6%和77.9%。利用克隆出的猪肌肉素cDNA,构建表达载体pGEX-4T-1-musclin,并在BL21大肠杆菌中成功表达和纯化了分子量为38.59kD的融合蛋白GST-Musclin,并运用蛋白印迹技术进行鉴定。
- 王伟杰李宏基韩立强王月影王静李卫华林茂旺台玉磊张志强藏猛王艳龄杨国宇
- 关键词:纯化
- 猪神经介素B和受体基因的克隆与组织分布被引量:1
- 2008年
- 基于电子延伸序列,克隆并分析了猪神经介素B(NMB)和受体(NMBR)基因。猪NMBcDNA克隆片段长度为567 bp,开放阅读框架长度为366 bp,编码121个氨基酸。NMBR cDNA克隆片段长度为1 194 bp,开放阅读框架长度为1 173 bp,编码390个氨基酸。同源分析表明,猪NMB的核酸序列与牛、人、小鼠和大鼠的同源性分别为87.1%,85.2%,78.1%和76.6%,氨基酸序列的同源性分别为81%,74.4%,70.2%和70.1%;NMBR的核酸序列与牛、人、小鼠和大鼠的同源性分别为91%,89%,84.2%和83.6%,氨基酸序列的同源性分别为92.3%,90.3%,86.9%和86.4%。组织分布结果显示,猪NMB在多种组织均有分布,NMBR仅分布在大脑。克隆的猪NMB和受体基因分别注册GenBank(EU375564和EU670045)。
- 王静李宏基王伟杰武宇晓李平张志强台玉磊臧猛杨国宇
- 关键词:受体克隆
- 猪KISS-1基因克隆、序列分析被引量:8
- 2008年
- 在猪的不同组织中克隆KISS-1基因,提取总RNA,利用设计的引物进行RT-PCR,PCR产物与pMD-19T载体连接后转化E.coliDH5α,检测阳性克隆并测序;结果:克隆的猪KISS-1基因与牛、人、大鼠、小鼠同源性分别为81.0%、76.8%、71.4%、72.4%;克隆了猪KISS-1基因全长并注册GenBank(Accession.EU934235),猪KISS-1基因在多种组织中表达。
- 臧猛晁利刚张志强台玉磊王静武宇晓杨国宇
- 关键词:KISS-1基因GPR54克隆
- 猪Chemerin和受体基因的克隆与组织分布被引量:2
- 2009年
- 基于电子延伸序列,本试验克隆并分析了猪Chemerin和受体(ChemerinR)基因;各种组织提取总RNA,利用设计的引物进行RT-PCR,PCR产物与pMD19-T连接后转化E.coliJM109,检测阳性克隆并测序;结果表明:猪Chemerin cDNA克隆片段为558 bp,开放阅读框架为492 bp,编码有163个氨基酸。ChemerinR cDNA克隆片段为1 470 bp,开放阅读框架为1 092 bp,编码363个氨基酸。同源分析结果表明,猪Chemerin的核酸序列与牛、人和大鼠的同源性分别为86.7%、79.1%和73%,氨基酸序列的同源性分别为83.1%、83.4%和67.7%,ChemerinR的核酸序列与人、大鼠和小鼠的同源性分别为80.4%、77.6%和72.6%,氨基酸序列的同源性分别为88.2%、80.7%和79.3%。组织分布结果显示:猪Chemerin在多种组织均有分布,ChemerinR仅在膀胱、大脑和肌肉有分布。
- 王静李宏基韩立强王伟杰武宁晓张志强台玉磊臧猛杨国宇
- 关键词:CHEMERIN受体电子克隆
- 猪干扰素IFNE1基因克隆及重组表达载体的构建被引量:1
- 2008年
- 依据电子延伸序列设计一对克隆引物,用RT-PCR法从猪胃组织扩增出猪干扰素epsilon 1(IFNE1)基因的完整编码区并进行序列分析;再根据克隆的序列设计一对表达引物,用PCR法从重组克隆载体中扩增出含EcoRI/XhoI酶切位点的猪IFNE1片段,插入原核表达载体,转化至宿主菌,诱导表达,SDS-PAGE鉴定融合蛋白。结果表明,克隆的猪IFNE1基因包含完整的开放阅读框架,长为586bp,ORF为582bp,编码193个氨基酸,与人、小鼠的同源性分别为83.6%和69.2%,推测的氨基酸序列与人、小鼠的同源性分别为76.2%和55.2%,表达的融合蛋白分子量约为47kD。
- 台玉磊王艳玲王伟杰韩立强张志强臧猛王静杨国宇
- 关键词:克隆原核表达
- 猪Mighty基因的克隆与组织表达分析被引量:7
- 2009年
- Mighty基因是在骨骼肌中发现的一个新颖的肌形成前期因子。基于电子延伸序列,本试验成功克隆出了Mighty基因,其全长874 bp,开放阅读框为579 bp,编码有193个氨基酸,提交GenBank(EU559709)。同时,试验采取半定量RT-PCR法,以18S rRNA为内标,研究了Mighty基因在仔猪18个组织中的分布和mRNA的表达水平。
- 张志强李宏基王伟杰韩立强王静武宇晓臧猛台玉磊杨国宇
- 关键词:MIGHTY基因克隆