刘莹
- 作品数:7 被引量:5H指数:2
- 供职机构:广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 南极冰藻谷胱甘肽还原酶cDNA片段的克隆及分析
- 从南极冰藻(Chlamydomonas sp.)ICE-L中提取总RNA,然后根据报道的多种藻类及植物谷胱甘肽还原酶保守区设计简并引物,RT-PCR获得1条长度为850 bp的条带,回收该条带并进行TA克隆、蓝白斑筛选、...
- 刘莹丁燏吴灶和简纪常鲁义善
- 关键词:南极冰藻谷胱甘肽还原酶克隆
- 南极衣藻ICE-L谷胱甘肽还原酶基因的克隆表达与定量分析
- 刘莹丁燏吴灶和简纪常鲁义善
- 关键词:谷胱甘肽还原酶基因克隆
- 南极衣藻谷胱甘肽-S-转移酶基因的表达及其对大肠杆菌低温耐受性的增强作用
- 2013年
- 谷胱甘肽-S-转移酶(Glutathione-S-transferase,GST,EC2.5.1.18)是生物体内一种重要的抗氧化酶,为阐明GST在南极衣藻(Chlamydomonas sp.ICE-L)中的具体地位,采用实时荧光定量PCR对不同温度下南极衣藻的GST基因的表达进行了分析;并构建了原核表达载体pET28a(+)-GST,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,通过平板培养法探讨了重组菌E.coli BL21(pET28a(+)-GST)对低温胁迫的耐受性。结果显示,GST在0℃时表达量最高,最高可达对照组的两倍多;pET28a(+)-GST重组表达载体在E.coli BL21中实现了高效表达,且主要以包涵体形式存在,经HisTrap HP柱分离纯化获得高纯度的GST融合蛋白,并通过SDS-PAGE及Western blot分析得以验证;对低温胁迫实验发现南极衣藻GST蛋白的表达可以提高重组菌E.coli BL21对低温的耐受性,说明GST基因对南极衣藻适应南极低温环境具有重要作用。
- 彭跃跃丁燏王金慧简纪常鲁义善刘莹
- 关键词:谷胱甘肽-S-转移酶
- 流沙湾海区异养菌和弧菌动态变化规律研究被引量:1
- 2010年
- 对流沙湾海区异养菌、弧菌动态变化规律及其优势菌群进行了初步探讨。采用平板稀释法对异养菌和弧菌数量进行了周年检测;对优势菌株进行分离纯化,并对代表性月份样品优势菌中的孤菌进行菌种鉴定。结果显示,流沙湾海区的异养菌和弧菌密度分别为8.8×10^3~9.60×10^5cfu/mL和1.0×10^3-2.45×10^4cfu/mL,其中异养菌数量高峰出现在6月,弧菌数量高峰出现在12月,异养菌、弧菌数量与水温变化的相关性不明显;流沙湾海区优势菌群中存在着溶藻弧菌等多种致病性弧菌。
- 丁燏申玉春吴灶和简纪常刘莹王威朱春华
- 关键词:异养菌弧菌优势菌群
- 南极衣藻(Chlamydomonas sp.ICE-L)谷胱甘肽还原酶基因的原核表达及其条件优化被引量:2
- 2011年
- 采用RT-PCR技术克隆南极衣藻GR基因ORF全长cDNA,然后经酶切、连接等步骤构建其原核表达载体;并对其表达的诱导时间、IPTG浓度、温度进行了优化,以期获得较大量的酶蛋白。结果表明,将构建的原核表达载体pET-GR导入大肠杆菌BL21,可以高效表达融合蛋白;且表达的蛋白均以包涵体的形式存在;经SDS-PAGE电泳结果显示,获得的目的蛋白分子量为52.2kDa,符合预期分子量;GR蛋白在大肠杆菌中诱导表达优化条件为,1.0mmol/L的IPTG,28℃诱导3h。这些结果为进一步深入研究该基因的特性与功能奠定了基础。
- 刘莹丁燏简纪常吴灶和缪锦来
- 关键词:谷胱甘肽还原酶原核表达冰藻
- 南极衣藻谷胱甘肽还原酶基因的克隆、表达与定量分析
- 谷胱甘肽还原酶(GR)是生物体内重要的抗氧化酶。本研究对南极衣藻GR的全长cDNA进行克隆,并构建了该基因的原核表达载体。同时,分析了GR基因在不同盐度和CdCl2作用前后的表达变化。此外,还克隆了南极冰藻β-肌动蛋白基...
- 刘莹
- 文献传递
- 南极衣藻ICE-L谷胱甘肽还原酶基因的克隆表达与定量分析
- 由于南极独特的气候及地理特征,形成了一个酷寒、强辐射、低光照的环境,生存于其中的微藻对这种独特的环境具有相应的适应机制.谷胱甘肽还原酶(GR)是生物体内重要的抗氧化酶之一,在极端环境的适应中具有重要地位.本研究对南极衣藻...
- 刘莹丁燏吴灶和简纪常鲁义善
- 关键词:谷胱甘肽还原酶基因克隆