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刘春江
作品数:
1
被引量:7
H指数:1
供职机构:
中南大学湘雅医院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
郑湘榕
中南大学湘雅医院
张珊珊
中南大学湘雅医院
谭洁璐
中南大学湘雅医院
尹飞
中南大学湘雅医院
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2009
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大鼠胎脑神经干细胞的分离培养及电穿孔转染
被引量:7
2009年
目的分离培养大鼠胎脑神经干细胞(NSC),研究电穿孔技术在NSC中的转染效率。方法从SD胎鼠脑组织中分离、培养和扩增NSC,利用免疫荧光组织化学技术对NSC及其分化细胞进行鉴定。使用电穿孔技术将质粒pEGFP.N1转染人NSC,利用其表达的绿色荧光蛋白(GFP)作为转染成功的报告物或标记物,在荧光显微镜下根据发出绿色荧光的NSC数量,计算出转染效率。结果从SD胎鼠脑组织中分离的细胞在体外可长时间自我增殖,原代及传代克隆细胞均表达NSC的特异性抗原巢蛋白,且诱导分化后可表达星形胶质细胞的特异性抗原-胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经元的特异性抗原.神经元特异性烯醇化酶(NSE)。用电穿孔技术转染神经干细胞,其效率为17.9%~69.1%,平均30.5%。结论本实验成功分离出具有自我增殖和多向分化潜能的胎鼠NSC,并证实电穿孔技术可对其进行高效转染,为进一步研究NSC的转基因治疗提供实验基础。
刘春江
尹飞
郑湘榕
张珊珊
谭洁璐
关键词:
神经干细胞
电穿孔
转染
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