刘姣
- 作品数：61 被引量：132H指数：6
- 供职机构：中国热带农业科学院热带生物技术研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学经济管理环境科学与工程更多>>
- 木薯MeSSⅢ基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体构建及验证被引量：7
- 2020年
- 木薯块根淀粉葡聚糖链结构是决定淀粉品质的关键因素,可溶性淀粉合成酶Ⅲ(SSⅢ)是调控植物支链淀粉葡聚糖长链合成的关键酶,木薯有两个MeSSⅢ的同源基因MeSSⅢ-1和MeSSⅢ-2。为了研究木薯MeSSⅢ对木薯块根淀粉品质形成的影响,根据MeSSⅢ-1和MeSSⅢ-2的保守区段,本研究构建了MeSSⅢ-1和MeSSⅢ-2的双基因编辑载体。利用在线软件CRISPR-P v2.0同时设计靶标MeSSⅢ-1和MeSSⅢ-2的sg RNA,通过酶切连接构建重组pCAMBIAP1301-Cas9-MeSSⅢ-gRNA质粒。将基因编辑载体转化农杆菌LBA4404后侵染木薯脆性胚性愈伤组织,筛选阳性脆性胚性愈伤组织,并提取其总DNA。通过PCR扩增靶点MeSSⅢ-1和MeSSⅢ-2的区段,并将扩增片段进行Sanger测序,分析其编辑的靶标位点。结果发现MeSSⅢ-1和MeSSⅢ-2靶标位点被成功编辑,本研究有助于进一步获得MeSSⅢ基因突变体,以深入解析该基因在木薯淀粉合成通路中的作用。
- 李崭王亚杰陆小花李瑞梅刘姣符少萍胡新文郭建春姚远
- 关键词：淀粉合成酶CRISPR
- 海马齿甜菜碱醛脱氢酶基因在大肠杆菌中表达被引量：2
- 2014年
- 本研究利用从海马齿中克隆到的甜菜碱醛脱氢酶基因构建到高效表达载体p GEX-4T-1上,构建重组载体p GEX-4T-Sp BADH,并对GST-Sp BADH融合表达的IPTG诱导浓度、诱导不同温度、不同菌液浓度和诱导时间等条件进行优化。研究结果表明:随诱导时间增长GST-Sp BADH融合蛋白表达量提高,在37℃时,OD为0.6左右,诱导5 h GST-Sp BADH融合蛋白的表达量达到最大,在0.2 mmol/L IPTG浓度下,可以有效诱导GST-Sp BADH融合蛋白的表达。本研究结果以期解析Sp BADH基因的功能以及在海马齿抗盐过程中的作用机理。
- 杨成龙刘姣周扬李瑞梅段瑞军符少萍胡新文郭建春
- 关键词：海马齿甜菜碱醛脱氢酶原核表达
- 3个木薯品种的叶绿体基因组16S rRNA-23S rRNA基因间隔序列的特征分析被引量：3
- 2012年
- 以华南6、8、10号木薯为材料,通过PCR克隆3个木薯品种的叶绿体16S-23S基因间隔序列,与其他17种植物的该序列进行亲缘关系分析。从进化树可以看出,该序列进化分析符合Webster分类系统,同科植物可以很好的聚为1类。此外,3个木薯品种的16S-23S基因间隔序列相似性高达99.94%;大戟科间的序列相似性为97.52%;其他植物科内的序列相似性不低于96%。该研究还分析了3个木薯品种16S-23S基因间隔序列的基因分布,该序列的基因分布情况一致,包含16S rRNA 5′端,trnI基因,ycf68基因,trnA基因,23SrRNA3′端,ISR-B,发现该序列的保守性较强,个别碱基差异并不影响基因分布,该研究可为后期木薯叶绿体遗传转化体系建立提供理论依据。
- 李亚梅段瑞军李瑞梅刘姣符少萍郭建春
- 关键词：木薯叶绿体
- 植物酸性转化酶基因表达调控研究
- 酸性转化酶是植物体中蔗糖代谢的关键酶，在调节韧皮部糖的卸载、控制贮藏器官中糖的组成、参与植物对逆境胁迫的响应、影响植物早期生长发育以及在信号转导等方面都具有重要的作用。植物酸性转化酶基因的表达受器官和发育特异性以及糖、受...
- 刘姣符少萍段瑞军李瑞梅胡艳平夏文睿郭建春
- 关键词：酸性转化酶基因
- 海水胁迫对白子菜生长及生理特性的影响被引量：4
- 2017年
- 通过盆栽试验,以白子菜[Gynura divaricata(L.)DC.]为研究材料,设置6个海水浓度(0、10%、20%、30%、40%、50%),研究不同浓度海水处理对白子菜生长及生理特性[根系活力、膜透性、膜脂过氧化产物丙二醛(简称MDA)含量、保护酶活性、渗透调节物质含量、叶绿素含量]的影响。结果表明,白子菜能在0~50%海水胁迫下完成生活史,且≤30%海水浓度胁迫下白子菜形态无明显变化,各项生理活动能正常进行;在≥40%海水浓度处理下,白子菜株高、地上部生物量等指标均减少,保护酶活性下降,MDA含量、细胞膜透性明显增加,此时渗透调节物质的增加有助于减轻海水对植物细胞膜的伤害,增强植物的耐盐性。由结果可知,白子菜对低浓度的海水胁迫具有较强的适应性和耐受性,可以进一步挖掘其在盐渍土改良中的利用价值。
- 王蕾覃和业徐微风刘姣王永壮符少萍郭建春段瑞军
- 关键词：海水胁迫生理特性盐渍土改良
- MeCWINV6酵母单杂交文库构建及其调控基因筛选被引量：8
- 2016年
- MeCWINV6是木薯6个细胞壁转化酶基因之一。本研究中应用酵母单杂交技术筛选MeCWINV6启动子的上游转录调节因子,为进一步研究该基因的表达调控提供基础。由MeCWINV6的启动子构建诱饵融合载体,转化酵母细胞构建诱饵菌株。运用SMART技术构建木薯酵母单杂交c DNA文库,再共转化诱饵菌株,经同源重组筛选MeCWINV6启动子的上游转录调节因子。构建的c DNA文库库容为7.08×106,插入片段大小在250~2 000 bp间。筛选大于1 000 bp的35个阳性克隆,经测序和Blast同源性分析筛选出锌指蛋白、组氨酸蛋白H1.2和AT-hook核定位蛋白三个转录因子以及一个线粒体受体TOM5。为进一步研究MeCWINV6基因的表达调控机制提供了候选转录因子。
- 郭育强刘姣符少萍段瑞军李瑞梅姚远胡新文郭建春
- 关键词：SMART技术DNA文库
- 木薯MeCYP79D1和MeCYP79D2基因启动子克隆及表达模式分析
- 2024年
- MeCYP79D1和MeCYP79D2基因是调控木薯生氰糖苷合成的关键基因,研究其表达特性对低氰木薯改良具有重要意义。为了探究MeCYP79D1和MeCYP79D2基因在SC8木薯品种中的表达模式,本研究克隆获得了SC8木薯品种的MeCYP79D1和MeCYP79D2基因启动子,发现它们的启动子上具有ABA、SA、GA、Me JA及生长素等激素响应元件,同时具有低温、干旱、伤害胁迫相关元件。采用ABA、SA、GA3、MeJA、低温处理,证明MeCYP79D1和MeCYP79D2基因表达受激素和低温调控。MeCYP79D1和MeCYP79D2基因主要在须根中表达,其次为嫩叶;在块根发育过程中,MeCYP79D1和MeCYP79D2基因主要在块根形成期和膨大前期表达。此研究结果为解析MeCYP79D1和MeCYP79D2基因表达调控机理提供了新的线索。
- 王昕符东青李瑞梅刘姣郭建春胡新文姚远王亚杰
- 关键词：启动子克隆基因表达
- 木薯MeGLYI-13基因及其编码蛋白在调控真核生物抗逆性方面的应用
- 本发明公开了木薯MeGLYI‑13基因及其编码蛋白在调控真核生物抗逆性方面的应用。所述真核生物为酵母、拟南芥或木薯。所述木薯MeGLYI‑13基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述木薯MeGLYI‑13基因编...
- 李瑞梅唐芬莲郭建春姚远刘姣王亚杰
- 一种组织培养容器
- 本实用新型公开了一种组织培养容器，包括顶部具有开口的容器本体和容器盖，在容器盖的顶壁上设有开口，在所述开口上覆盖有滤菌透气膜，并在容器本体的水平底壁上设有多个分区，所述分区由多条横向分割线和与所述横向分割线相垂直的多条纵...
- 李瑞梅郭建春符少萍段瑞军刘姣
- 文献传递
- 一种简易可调节水装置
- 本实用新型公开了一种简易可调节水装置，包括储液箱和顶盖，在所述顶盖上设有进液口，在所述储液箱的侧面设有出液口，在所述顶盖上还设有能全部或部分覆盖所述进液口的盖体，在所述出液口处设有与其相连通的出液管，所述出液管上设有出液...
- 李瑞梅郭建春符少萍段瑞军刘姣
- 文献传递
