侯乐锋
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 大肠杆菌表达重组人胰激肽原酶
- 胰激肽原酶(pancreatic kininogenase)是一种催化大分子前体物释放生物活性肽的酶。胰激肽原酶具有广泛的药用价值,除降血压之外,还可以用于治疗糖尿病、肾病、改善肾脏功能,治疗心、脑血管疾病等。
本...
- 侯乐锋
- 关键词：大肠杆菌分离纯化
- 重组人胰激肽原酶在大肠杆菌中的表达被引量：2
- 2011年
- 根据人胰激肽原酶的氨基酸序列,采用大肠杆菌偏爱密码子,设计合成目的基因片段约750 bp。将设计得到的片段连接到pET-22b(+)表达载体中并测序,将重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta中进行诱导表达。将IPTG诱导表达的菌体进行SDS-PAGE电泳,在相对分子质量24 kD处可明显观察到高表达带,主要以包涵体形式存在,质量分数可达21.6%,进一步测得蛋白活性为2.27 nmol/s。利用MALDI串联飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS/MS)鉴定蛋白,蛋白得分106,大于可信得分83(P<0.05),确定了蛋白一级结构的正确性。
- 侯乐锋陈劲春卢嘉宝
- 关键词：大肠杆菌
