仝刚
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：陕西省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 副猪嗜血杆菌对猪气管上皮细胞黏附作用的研究
- 为了探讨副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis，Hps)与原代培养的猪气管上皮细胞的黏附作用，应用气管支气管结扎灌注酶冷消化法分离气管黏膜上皮细胞，胶原覆盖的盖玻片上培养，使上皮细胞分化戍假复层黏膜纤毛上...
- 王津津张彦明汤智慧唐青海仝刚
- 关键词：副猪嗜血杆菌
- 文献传递
- 猪细胞周期蛋白A基因的克隆及其功能研究
- 2010年
- 本研究旨在克隆猪细胞周期蛋白A基因(CyclinA),并在猪脐静脉血管内皮细胞(SUVEC)中表达,以验证其功能。以人的CyclinA基因为信息探针,经电子克隆得到猪CyclinA基因,通过RT-PCR和DNA测序验证电子克隆结果并对其作生物信息学分析,用RT-PCR、Westernblot研究它在SUVEC中的表达情况。应用激光共聚焦显微镜分析它在细胞中的亚细胞定位,并通过流式细胞仪分析细胞周期以及用MTS法测定细胞的增殖能力。结果如下:核酸测序证明RT-PCR产物同电子克隆结果相符。该cDNA包含1299bp的完整开放阅读框(ORF),共编码432个氨基酸,经NCBIBLAST分析,该基因定位于猪的8号染色体上。Westernblot结果显示CyclinA基因编码蛋白的相对分子质量大小约为40ku,亚细胞定位研究表明该蛋白定位于细胞核中。经流式细胞仪分析表明稳定表达该基因的细胞,其G1期的细胞数量比对照组细胞增加了15%～20%,而S期的细胞数量比对照组细胞减少了约18%;MTS法检测显示细胞株SUVEC-CycAGFP的增殖活性明显高于对照组细胞。作者成功克隆到新基因猪源细胞周期蛋白A,并验证了其生物学功能,为今后开展病毒感染对猪细胞周期蛋白A影响的研究奠定了基础。
- 范丽唐青海张彦明刘伟仝刚
- 关键词：克隆真核表达细胞周期MTS
- 副猪嗜血杆菌对猪气管上皮细胞的黏附作用及其黏附模型的建立被引量：1
- 2010年
- 为了探讨副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)与原代培养的猪气管黏膜上皮细胞的相互作用,应用气管支气管结扎灌注酶冷消化法分离气管黏膜上皮细胞,于胶原覆盖的盖玻片上培养,使上皮细胞分化成假复层黏膜纤毛上皮细胞,然后以对数生长期不同Hps含量的菌液感染上皮细胞和猪脐静脉血管内皮细胞,分别作用1、2、34、h后,通过革兰氏染色法观察Hps对细胞的黏附情况。结果表明,Hps可黏附在上皮细胞和内皮细胞表面;Hps对气管上皮细胞有毒性作用,致细胞变性坏死和凋亡;Hps对细胞的黏附力与其在菌液中含量和作用时间有关,以菌落形成单位计,当含量为1.0×108mL-1且感染4 h后,黏附效果最好。高倍显微镜下可见大量Hps黏附于猪气管上皮细胞,只有个别Hps黏附于猪血管内皮细胞表面。说明Hps对猪气管黏膜上皮细胞的黏附能力远强于猪血管内皮细胞,可以利用猪气管黏膜上皮细胞建立副猪嗜血杆菌的黏附细胞模型。
- 王津津张彦明汤智慧唐青海仝刚郝艳阳
- 关键词：副猪嗜血杆菌
- 副猪嗜血杆菌对猪气管上皮细胞黏附作用的研究
- 为了探讨副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)与原代培养的猪气管上皮细胞的黏附作用,应用气管支气管结扎灌注酶冷消化法分离气管黏膜上皮细胞,胶原覆盖的盖玻片上培养,使上皮细胞分化成假复层黏膜纤毛上...
- 王津津张彦明汤智慧唐青海仝刚
- 关键词：副猪嗜血杆菌
- 文献传递
