于婧
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
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- TSC2反义寡核苷酸对人食管癌EC9706细胞增殖、凋亡的影响
- 2011年
- 目的:探讨抑癌基因TSC2反义寡核苷酸对人食管癌EC9706细胞增殖、凋亡的影响.方法:运用阳离子脂质体介导TSC2的反义寡聚核苷酸(ASODN)转染食管癌Ec9706细胞,并分5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L3组作为实验组.以终浓度为15μmol/L正义寡核苷酸(SODN)/无关寡核苷酸(N-ODN)及未转染组分别作为无关对照组、细胞对照组.分别在转染后连续培养24 h、48 h、72 h这3个不同时间点,用MTT检测细胞的增殖情况;免疫细胞化学检测TSC2蛋白表达:RT-PCR检测tsc2mRNA表达.用TUNEL检测转染后48 h细胞的凋亡情况.结果:同一时间点,不同浓度的TSC2反义寡核苷酸对食管癌EC9706细胞增殖有不同的促进作用,实验组与正义组、无关组及正常对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05),以浓度为15μmol/L作用最强:实验组各组凋亡指数均低于对照组,且与对照组相比,差异具有统计学意义(13.11±0.13,9.31±0.29,4_38±0.43vs 16.46±0.43,16.63±0.34,16.23±0.45,均P<0.05).同一浓度的TSC2反义寡核苷酸,在不同时间点对食管癌EC9706细胞增殖的促进作用,随时间的增加而增强,以72 h作用最强.同一时间,不同浓度的TSC2反义寡核苷酸对食管癌EC9706细胞TSC2基因的表达有不同程度的抑制作用,实验组与正义、无关及正常对照组相比,差异有统计学意义(F蛋白=50.60、330.69及1221.28,均P<0.05;FmRNA=260.23、572.22及1004.35,均P<0.05),以浓度为15μmol/L作用最强;同一浓度的TSC2反义寡核苷酸,在不同时间内对食管癌EC9706细胞TSC2基因的表达的抑制作用,随时间的增加而增强,以72 h作用最强.结论:抑癌基因TSC2反义寡核苷酸可促进食管癌EC9706细胞增殖、抑制其凋亡.
- 冯付明杨娟杨娟赵路张红李晟磊赵路
- 关键词：反义寡核苷酸EC9706细胞增殖凋亡
- 食管鳞癌组织及周围正常食管黏膜组织差异表达基因的筛选被引量：2
- 2011年
- 目的:研究食管鳞癌组织及周围正常食管黏膜组织的差异表达基因,为寻找食管鳞癌早期诊断高敏感性,高特异性的分子指标提供理论依据.方法:分别抽提人食管鳞癌组织及周围正常食管黏膜组织总mRNA,逆转录成cDNA,用单标法以Cy3-dUTP为标记制成探针,与基因芯片进行杂交,筛选出差异表达的基因,并用生物信息学方法做进一步分析.结果:在45051个人类全基因组芯片中依Ratio实验组(癌组织)/对照组(正常食管组织)>4.0或<0.25的数据项,共发现1113条差异表达基因,其中464条上调,649条下调.经生物信息学分析,表明包含多种功能基因.RT-PCR验证其中3条基因,表达方向与芯片检测结果一致,符合预期结果.结论:在食管鳞癌的发生、发展中存在着大量异常表达基因;基因芯片是一高效筛选食管癌相关基因的方法.
- 赵路杨娟于婧张红高冬玲陈奎生
- 关键词：基因芯片食管鳞癌差异表达基因
- RNA干扰抑制食管癌EC9706细胞中3－磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1基因的表达及其对肿瘤细胞恶性生物学行为的影响被引量：3
- 2011年
- 目的研究RNA干扰抑制食管癌EC9706细胞中3－磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1（PDK1）的表达及其对肿瘤细胞恶性生物学行为的影响。方法以PDK1siRNA转染EC9706细胞，分别采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot法检测PDK1mRNA和蛋白的表达以及下游Akt蛋白的磷酸化水平。分别以四甲基偶氮唑蓝（MTF）法、流式细胞术、Transwell侵袭实验和裸鼠移植瘤实验检测PDK1 siRNA对EC9706细胞增殖、凋亡、侵袭以及体内抑瘤能力的影响。结果与未转染组相比，PDK1siRNA转染细胞后继续培养24、48和72h时，PDK1 mRNA的表达均明显降低，抑制率分别为（28．5±4．2）％、（51．1±5．7）％和（60．6±4．1）％，PDK1蛋白和Akt蛋白的磷酸化水平也明显降低（P〈0．05）。PDK1siRNA能有效抑制EC9706细胞的增殖、侵袭并促进细胞凋亡，且能抑制裸鼠移植瘤的生长并降低移植瘤组织中PDK1蛋白的表达。结论PDK1可能与食管癌细胞的增殖、凋亡和侵袭等生物学行为密切相关，是肿瘤基因治疗的有效靶点。
- 于婧陈奎生李亚南杨娟赵路
- 关键词：RNA干扰食管肿瘤EC9706细胞裸鼠
- 食管鳞状细胞癌组织中Skp2蛋白及mRNA的表达被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨Skp2在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达及其意义。方法:应用免疫组化SP法和原位杂交技术检测49例ESCC组织及其相应正常食管黏膜组织中Skp2蛋白及其mRNA的表达。结果:正常食管黏膜组织、ESCC组织中Skp2蛋白阳性表达率分别为26.5%(13/49)和55.1%(27/49),mRNA阳性表达率分别为28.6%(14/49)和59.2%(29/49),2组相比差异均有统计学意义(χ2蛋白=4.971,χ2mRNA=5.939,P均<0.05)。伴有淋巴结转移的ESCC组织Skp2蛋白和mRNA阳性表达率高于无淋巴结转移组(χ蛋2白=5.883,χ2mRNA=7.605,P均<0.05)。浸润浅肌层、深肌层及外膜的ESCC组织中Skp2蛋白的阳性表达率差异均无统计学意义(χ2=2.441,P=0.295),但Skp2mRNA阳性表达率差异有统计学意义(χ2=7.621,P=0.022)。结论:Skp2蛋白及mRNA异常表达与ESCC的发生、发展及浸润转移有关。
- 翟娜娜张威于婧张岚高冬玲陈奎生
- 关键词：食管肿瘤SKP2鳞状细胞癌
