魏文祥
- 作品数：37 被引量：65H指数：3
- 供职机构：苏州大学医学部基础医学与生物科学学院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学自然科学总论更多>>
- RPB5介导蛋白与HBx蛋白共表达对肝癌HepG2细胞凋亡的影响被引量：3
- 2015年
- 目的通过乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)与RPB5介导蛋白(RMP)在肝癌Hep G2细胞中的共表达,探索RMP与HBx对肝癌细胞凋亡的影响。方法脂质体介导瞬时转染细胞;实时荧光定量RT-PCR和western blot分别检测RMP与HBx在肝癌Hep G2细胞中的表达量;流式细胞仪检测细胞凋亡率;逆转录PCR检测细胞凋亡相关基因Bax、Caspase3、P53、Bcl-2 mRNA相对表达水平,western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达。结果与未经任何处理的Hep G2细胞比较,转染RMP质粒的稳定表达HBx的Hep G2细胞中RMP、HBx在基因及蛋白质水平表达均显著升高(P<0.01);细胞凋亡率显著降低;促凋亡基因Bax、Caspase3和P53 mRNA相对表达水平均显著下调(P<0.01),凋亡抑制基因Bcl-2 mRNA相对表达水平显著上调(P<0.01);促凋亡蛋白Bax表达量明显降低,抗凋亡蛋白Bcl-2表达量明显升高。结论 RMP与HBx共表达可降低肝癌Hep G2细胞凋亡率,提示RMP和HBx可能在肝癌发生和发展过程中起着重要的作用。
- 朱霞霞王琦李帅何峰魏文祥
- 关键词：乙型肝炎病毒X蛋白肝癌
- α—L岩藻糖苷酶对原发性肝癌的诊断价值
- 1996年
- 原发性肝癌患者血清α—L岩藻糖苷酶的活性明显升高,并随着病情的发展而变化,提示该酶可作为原发性肝癌诊断及监察的一个指标。
- 魏文祥高锦声杨莉玲尤宗起肖清水王冬云
- 关键词：原发性肝肿瘤
- Ad-ING4对人前列腺癌细胞PC-3体内外抑癌效应的研究被引量：14
- 2009年
- 背景与目的:腺病毒作为载体已被广泛用于肿瘤的基因治疗。ING4是生长抑制因子家族中的一个成员,是一种潜在的抑癌基因。本研究旨在探讨腺病毒介导的人ING4基因(Ad-ING4)对人前列腺癌细胞PC-3的体内外抑癌效应及其分子机制。方法:将扩增的Ad-ING4重组腺病毒感染PC-3细胞,用RT-PCR法检测ING4在PC-3细胞中的转录;MTT法检测ING4基因对PC-3细胞增殖的影响;流式细胞术和Hoechst33258染色法检测细胞凋亡的变化;半定量RT-PCR法检测ING4基因的表达对PC-3细胞中的bcl-2、bax、p53和caspase-3凋亡相关基因表达的影响。用Ad-ING4重组腺病毒在裸鼠PC-3移植瘤的瘤体内注射治疗,观察肿瘤生长变化,15d后处死裸鼠,摘除瘤体,称瘤重;用免疫组化法检测瘤组织中Bcl-2、Bax、Caspase-3和CD34蛋白的表达。结果:腺病毒介导的人ING4基因在PC-3细胞中成功转录,明显抑制PC-3细胞增殖,上调p53、bax、caspase-3基因表达和下调bcl-2基因表达,并诱导细胞凋亡。Ad-ING4重组腺病毒能显著抑制裸鼠PC-3移植瘤的生长,瘤重的抑制率达37%,与空病毒载体Ad-GFP组和细胞对照PBS组比较差异有统计学意义(P<0.05);免疫组化结果显示Ad-ING4重组腺病毒能明显上调Bax和Caspase-3蛋白的表达水平,下调Bcl-2和CD34蛋白的表达水平。结论:腺病毒介导的ING4基因在体内外均可明显抑制人前列腺癌细胞PC-3的生长,诱导其凋亡,其机制可能是上调P53、Bax、Caspase-3蛋白和下调Bcl-2蛋白表达水平。
- 杨慧翠盛伟华谢宇锋缪竞诚魏文祥杨吉成
- 关键词：ING4基因PC-3细胞前列腺癌肿瘤抑制
- 针对RMP基因的siRNA及其应用
- 本发明公开了针对RMP基因的siRNA及其应用，所述siRNA的正义链序列为：5′-GGA UUU GCU AGC UGA UAA ATT-3’，反义链为：5’-UUU AUC AGCUAG CAA AUC CTT-3′...
- 魏文祥沈百荣蒋敬庭杨慧翠李敏
- 文献传递
- RMP在肝癌细胞基因组稳定性和凋亡中的作用
- 研究RPB5调节蛋白(RMP)在正常肝细胞及肝癌细胞基因组稳定性中的作用,并探讨其与细胞凋亡的相关性。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)从mRNA水平检测正常细胞系及多种肿瘤细胞系中RMP的表达。不同剂量60Coy...
- 李敏杨慧翠杨吉成盛伟华连晓宁曹锴魏文祥
- 关键词：肝癌细胞RNA干扰放疗基因组稳定性
- 慢粒白血病骨髓细胞的染色体提前凝集的研究
- 1991年
- 本文应用细胞融合诱导染色体提前凝集(Prematurechromosomecodensation,PCC)技术,对7例慢粒患者进行间期染色体的研究。结果:7例慢粒患者的(Proliferativepotentialindex,PPI)平均值为37.3±11.5％。其中,5例临床慢性期患者PPI平均值为42.4±8.9％;2例缓解期患者PPI值分别是27.3％和21.9％。慢性期与缓解的PPI值有显著性差异(P<0.05)。而PPI值s期PCC及原始细胞数均无明显的相关性。
- 魏文祥高锦声
- 关键词：慢性白血病骨髓细胞染色体凝集
- 绒毛间期细胞期前凝集染色体的诱导及其意义被引量：1
- 1996年
- 绒毛间期细胞期前凝集染色体的诱导及其意义魏文祥，郑斯英，高锦声，叶玲玲，鲍虹，潘１９７０年Ｊｏｈｎｓｏｎ等［１］发现在仙台病毒（Ｓａｎｄａｉｖｉｒｕｓ）的作用下，分裂期的ＨｅＬａ细胞和间期的ＨｅＬａ细胞发生融合，而且在间期细胞内出现一种期前凝集的染色...
- 魏文祥郑斯英高锦声叶玲玲鲍虹潘湧
- RMP基因干扰对肝癌细胞周期的影响被引量：1
- 2011年
- 目的:建立RMP(RPB5-Mediating Protein)基因干扰的稳定细胞株,研究RMP基因干扰对正常肝细胞及其肝癌细胞周期的影响。方法:构建RMP基因的短发卡RNA(short-hairpin RNA,shRNA)真核表达载体pGPU6-Neo-RMPi-484。通过脂质体转染的方法转染到SMMC-7721肝癌细胞中,G418筛选出干扰RMP基因的细胞株;RT-PCR检测RMP基因的表达;流式细胞仪PI染色检测细胞周期;RT-PCR检测周期相关基因的表达。结果:成功构建pGPU6-Neo-RMPi真核表达载体,筛选出稳定干扰细胞株,并且发现干扰RMP基因能够明显引起SMMC-7721肝癌细胞的G2/M期阻滞。结论:干扰RMP基因引起SMMC-7721肝癌细胞G2/M期阻滞,可能是通过下调G2/M期检验点相关基因CyclinB、P21和CDK1的表达实现的。
- 郭云兰杨慧翠连晓宁曹锴王晓婷仲蕾魏文祥
- 关键词：肝癌细胞细胞周期
- 慢性粒细胞白血病的临床与细胞遗传学的研究
- 1992年
- 慢性粒细胞白血病(慢粒)是一种造血系统的慢性恶性增殖性疾病,我室经研究10年,探讨慢粒的病因、诊断、临床分型、予测复发等工作,兹将有关资料,综合报告如下。一、109例慢粒的临床分期与Ph 染色体关联的研究总结109例大系列Ph 阳性慢粒,进行Ph 染色体的出现率与临床分期相关性的深入研究。采用骨髓短期培养G 显带染色体制备,每例慢粒患者各检查20个完整的分裂相。根据ISCN确认,计数Ph 染色体的出现率。
- 高绵声李以明叶玲玲魏文祥夏国兴谷俊侠张桂如邵景章薛永权
- 关键词：白血病细胞遗传学
- 非传统型前折叠束RPB5交互因子在肝癌HepG2细胞中的生物学功能及其分子机制被引量：1
- 2014年
- 目的 探讨非传统型前折叠束RPB5交互因子（URI）对肝癌HepG2细胞生物学功能的影响及其分子机制.方法 设计并构建URI真核表达和URI shRNA干扰载体,转染肝癌HepG2细胞并筛选稳定转染细胞株.采用CCK-8实验和软琼脂克隆形成实验检测各组细胞的增殖能力和体外锚定非依赖性生长的能力,采用流式细胞仪检测γ射线照射后各组细胞的细胞周期和细胞凋亡,采用Western blot法检测凋亡相关蛋白的表达量.结果 成功构建了URI表达质粒和干扰质粒,并获得相应的稳定转染细胞株.HepG2组、pCDNA3.1-URI-HepG2组和pGPU6-URIi-HepG2组细胞转染第7天相对于第1天的增殖促进率分别为（588.78±32.12）％、（959.33±58.80）％和（393.93±39.70）％,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.HepG2组、pCDNA3.1-URI-HepG2组和pGPU6-URIi-HepG2组的克隆数分别为（43±7）个、（85±5）个和（20±4）个,差异有统计学意义（P＜0.05）.γ射线照射后,pCDNA3.1-URI-HepG2组细胞凋亡和G2/M期阻滞较HepG2组明显降低（P＜0.05）,pGPU6-URIi-HepG2组细胞凋亡和G2/M期阻滞较HepG2组明显升高（P＜0.05）.Western blot结果显示,HepG2细胞的URI、Bax和Bcl-2蛋白相对表达水平分别为0.92±0.03、1.11±0.13和0.82±0.01,pCDNA3.1-URI-HepG2组细胞的URI、Bax和Bcl-2蛋白相对表达水平分别为1.79±0.12、0.48±0.01和2.20±0.30,pGPU6-URli-HepG2组细胞的URI、Bax和Bcl-2蛋白相对表达水平分别为0.50±0.04、1.52 ±0.20和0.38±0.01.pCDNA3.1-URI-HepG2组细胞凋亡相关蛋白Bax表达水平低于HepG2组,Bcl-2蛋白表达水平高于HepG2组;pGPU6-URIi-HepG2组细胞Bax蛋白表达水平高于HepG2组,Bcl-2蛋白表达水平低于HepG2组,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 URI能够通过促进细胞增殖和抵抗细胞凋亡来促进肝癌细胞的生长.而干扰URI表达后,肝癌细胞的增殖能力被抑制,细胞抵抗γ射线照射的能力降低,URI可能成为肝癌治疗的新靶点。
- 周围钟妍玉王洪民杨思俊魏文祥
- 关键词：RNA干扰Γ射线细胞周期
